Impatto epigenetico di un programma psicoterapeutico in adolescenti con gravi esperienze avverse

L'investigatore propone uno studio clinico controllato randomizzato a cui parteciperanno adolescenti che sono in procinto di ristabilire i propri diritti con il Colombian Family Welfare Institute. Il team di studio confronterà gli stati di metilazione del genoma dei campioni di saliva di un gruppo di 21 adolescenti (bambini, dai 13 ai 16 anni), [sia] prima che dopo un intervento residenziale di 8 giorni (programma psicoterapeutico IP-Colombia). Verrà incluso un gruppo di controllo randomizzato (lista d'attesa) (n=21), da cui verranno raccolti campioni al basale e campioni dopo 8 giorni nelle loro normali condizioni di vita. Per la randomizzazione, la valutazione dell'esposizione allo stress durante l'infanzia sarà misurata utilizzando un questionario sulle esperienze avverse.

Il programma IP-Colombia è un intervento multicomponente svolto nel contesto del campo terapeutico, basato su terapie di desensibilizzazione e rielaborazione dei movimenti oculari (EMDR) e interventi basati sulla consapevolezza. Accanto agli interventi, vengono svolte attività per facilitare stili di vita sani, empatia, [e] il riconoscimento e l'espressione delle emozioni attraverso l'esercizio, laboratori artistici, creazione musicale, danza e teatro. Precedenti studi condotti dalla Colombia Innocence in Danger Foundation hanno mostrato gli effetti significativi del protocollo IP-Colombia nel trattamento di bambini con disturbo da stress post-traumatico associato a grave violenza interpersonale. Il team della Colombia Innocence in Danger Foundation, che ha 10 anni di esperienza con questo intervento di cui hanno beneficiato circa 380 ragazzi, ragazze e adolescenti, sarà responsabile di questo intervento.

L'analisi molecolare sarà coordinata dalla dott.ssa Perla Kaliman, ricercatrice collaboratrice presso il Center for Healthy Minds dell'Università del Wisconsin-Madison, diretta dal dott. Richard Davidson. Il Dr. Kaliman, in collaborazione con il Dr. Davidson, ha condotto i primi studi che mostrano gli effetti epigenetici degli interventi di riduzione dello stress. L'elaborazione del DNA e l'analisi del metiloma saranno effettuate presso l'Università del Wisconsin-Madison, nel laboratorio del Dr. Reid Alisch [da] un team riconosciuto in tutto il mondo per la sua esperienza nell'epigenetica delle esperienze avverse nei giovani.

I campioni di saliva saranno raccolti in duplicato, utilizzando i kit Oragene per l'analisi della metilazione del DNA (DNA Genotek, Canada). I campioni verranno inviati immediatamente dopo la raccolta a temperatura ambiente al Center for Healthy Minds (Madison, Wisconsin).

Il DNA verrà estratto utilizzando il kit Qiagen per campioni di saliva umana, seguendo il protocollo del produttore. I campioni di DNA genomico saranno analizzati in un gel di agarosio all'1%, per verificare che il DNA sia ad alto peso molecolare, e saranno quantificati utilizzando Qubit (Qiagen, USA). I livelli di metilazione del DNA saranno determinati utilizzando HumanMethylation450 (Illumina) ei valori beta saranno ottenuti utilizzando il pacchetto R min. I dati di metilazione che corrispondono alla metilazione in un polimorfismo a singolo nucleotide (SNP) verranno eliminati dall'analisi se contengono un SNP all'interno della sonda, se sono noti per reagire in modo incrociato o se un campione ha un valore P di rilevamento > 0.01.