Vylučování bílkovin, vápníku a střevních hormonů (PROCAL2)

Nedávná práce na University of Bath ukázala, že při požití 50 g hydrolyzátu syrovátkové bílkoviny Capolac® (minerály v mléce s vysokým obsahem vápníku) silně stimuluje dostupnost důležitého hormonu glukagonu podobného peptidu-1 (GLP-1). V současné době však není jasné, jak forma proteinu požitého s přítomností nebo nepřítomností vápníku může ovlivnit sekreci střevních hormonů a vyprazdňování žaludku. Proto se snažíme provést studii o vlivu společného užívání dvou různých forem proteinu v přítomnosti nebo nepřítomnosti vápníku na dostupnost střevních hormonů a vyprazdňování žaludku. Tento projekt pomůže poskytnout klíčové důkazy pro budoucí práci a doporučení pro intervence založené na výživě pro prevenci a léčbu obezity a T2D.

K účasti v randomizované zkřížené studii bude vybráno 15 metabolicky zdravých mužů a žen ve věku 18-65 let, BMI mezi 18,5 a 25 kg/m2. Každý účastník podstoupí 4 zkoušky. Každá zkušební verze bude trvat ~ 3 hodiny a bude oddělena minimálně 48 hodinami:

CONTROL (CON) - 30 g pouze kontrolní protein CONTROL + VÁPNÍK (CON-C) - 30 g kontrolní protein + 9547 mg Capolac® (2500 mg přijatého vápníku) PROTEIN (PRO) - 30 g pouze agregovaný protein PROTEIN + VÁPNÍK (PRO -C) - 30 g Agregátního proteinu + 9547 mg Capolac® (2500 mg přijatého vápníku)

Každý z těchto nápojů bude také obsahovat 500 ml vody, nízkokalorické sladidlo (80 mg sukralózy) a bude označen 150 mg octanu sodného 13C1 a 100 mg oktanoátu sodného 13C1 pro měření vyprazdňování žaludku.

Účastníci budou požádáni, aby dorazili do laboratoře mezi 09:00 a 10:00 poté, co 10-14 hodin nejedli, tj. byli nalačno (je povolen a podporován příjem vody). Po příjezdu do laboratoře vyškolený flebotom zavede kanylu (malou plastovou hadičku) do předehřáté dorzální ruční žíly na hřbetu ruky, nebo v případě neúspěchu do antekubitální žíly. Účastníci pak dostanou jeden ze čtyř testovacích nápojů, které po požití zahájí zkoušku. Ihned po požití testovacího nápoje požádáme účastníky o vyplnění stupnice chutnosti.

Vzorky krve budou odebrány na začátku a 15, 30, 45, 60, 90 a 120 minut po požití testovaného nápoje. Vzorky dechu budou odebírány do extainerů na začátku a každých 5 minut až do časového bodu 120 minut ke stanovení vyprázdnění žaludku. Na začátku a každých 60 minut po požití testovaného nápoje bude také vyplněn dotazník k chuti k jídlu, aby se vyhodnotily pocity chuti k jídlu. Po uplynutí 120 minut budou účastníci požádáni, aby snědli oběd, dokud nebudou pohodlně sytí. Jakmile budou spokojeni s obědem, vyplní závěrečný dotazník k chuti k jídlu. Poté bude zkušební den dokončen. Po dokončení studie budou účastníci požádáni o vyplnění dotazníku o omezeném stravování.

Podskupině 5 účastníků nasadí nazogastrickou sondu kvalifikovaná sestra BAPEN. 5 ml aspirátu ze žaludku budou vzorky na začátku, 30, 60 a 120 minutách, které budou rovnoměrně rozděleny pro profilování analytu a kultivaci in vitro. Ke stimulaci buněčné linie GLUTag se použijí 3 ml žaludečního aspirátu. Experimenty budou prováděny inkubací buněk s neutralizovaným žaludečním aspirátem ve 250 µl Krebs Ringer Buffer (KRB) po dobu 2 hodin při 37˚C, 5 % CO2. Bude provedena druhá kultura, identická s dříve popsanou, pouze s přidáním specifických antagonistů buněčných receptorů.