Proteína, Cálcio e Secreção de Hormônios Intestinais (PROCAL2)

Um trabalho recente na Universidade de Bath mostrou que, quando ingerido com 50 g de hidrolisado de proteína de soro de leite, o Capolac® (minerais do leite com alto teor de cálcio) estimula de forma potente a disponibilidade do importante hormônio peptídeo-1 semelhante ao glucagon (GLP-1). No entanto, atualmente não está claro como a forma de proteína ingerida com a presença ou ausência de cálcio pode afetar a secreção de hormônios intestinais e o esvaziamento gástrico. Portanto, pretendemos realizar um estudo sobre o efeito da co-ingestão de duas formas diferentes de proteína na presença ou ausência de cálcio na disponibilidade de hormônios intestinais e no esvaziamento gástrico. Este projeto ajudará a fornecer evidências importantes para auxiliar trabalhos futuros e recomendações para intervenções baseadas em nutrição para a prevenção e tratamento da obesidade e DM2.

Quinze homens e mulheres metabolicamente saudáveis, com idades entre 18 e 65 anos, IMC entre 18,5 e 25 kg/m2 serão recrutados para participar de um estudo cruzado randomizado. Cada participante passará por 4 tentativas. Cada teste durará ~3 horas e será separado por um mínimo de 48h:

CONTROL (CON) - 30 g de proteína de controle apenas CONTROL + CÁLCIO (CON-C) - 30 g de proteína de controle + 9547 mg Capolac® (2500 mg de cálcio ingerido) PROTEÍNA (PRO) - 30 g de proteína agregada apenas PROTEÍNA + CÁLCIO (PRO -C) - 30 g Proteína agregada + 9547 mg Capolac® (2500 mg de cálcio ingerido)

Cada uma dessas bebidas também conterá 500 mL de água, adoçante de baixa caloria (80 mg de sucralose) e será rotulada com 150 mg de acetato de sódio 13C1 e 100 mg de octanoato de sódio 13C1 para a medição do esvaziamento gástrico.

Os participantes serão solicitados a chegar ao laboratório entre 09:00 e 10:00 da manhã, depois de não comer entre 10-14 horas, ou seja, em jejum (a ingestão de água é permitida e incentivada). Ao chegar ao laboratório, um membro da equipe de flebotomistas treinado inserirá uma cânula (um pequeno tubo de plástico) em uma veia dorsal da mão pré-aquecida no dorso da mão ou, se não obtiver sucesso, na veia antecubital. Os participantes receberão uma das quatro bebidas de teste, que uma vez ingeridas iniciarão o teste. Logo após a ingestão da bebida teste solicitaremos aos participantes o preenchimento de uma escala de palatabilidade.

Amostras de sangue serão coletadas no início e 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos após a ingestão da bebida teste. Amostras de respiração serão coletadas em extainers na linha de base e a cada 5 minutos até o ponto de tempo de 120 minutos para determinar o esvaziamento gástrico. Um questionário de apetite também será preenchido no início e a cada 60 minutos após a ingestão da bebida de teste para avaliar as sensações de apetite. Após o ponto de tempo de 120 minutos, os participantes serão solicitados a consumir uma refeição de almoço até que estejam confortavelmente satisfeitos. Uma vez satisfeitos com a refeição do almoço, eles preencherão o questionário final de apetite. O dia de teste estará completo. Após a conclusão do estudo, os participantes serão solicitados a preencher um questionário sobre restrição alimentar.

Um subconjunto de 5 participantes receberá uma sonda nasogástrica por uma enfermeira qualificada do BAPEN. 5ml de aspirado do estômago serão amostras na linha de base, 30, 60 e 120 minutos, que serão distribuídas igualmente para perfil de analito e trabalho de cultura in vitro. 3 ml de aspirado gástrico serão usados ​​para estimular uma linha celular GLUTag. Os experimentos serão realizados incubando as células com o aspirado gástrico neutralizado em 250 µl de Krebs Ringer Buffer (KRB) por 2 h a 37˚C, 5 % CO2. Uma segunda cultura, idêntica à descrita anteriormente, será realizada, apenas com a adição de antagonistas de receptores celulares específicos.