Secrezione di proteine, calcio e ormoni intestinali (PROCAL2)

Un recente lavoro presso l'Università di Bath ha dimostrato che quando ingerito con 50 g di idrolisato di proteine ​​del siero di latte, Capolac® (minerali del latte ad alto contenuto di calcio) stimola potentemente la disponibilità dell'importante ormone glucagon-like peptide-1 (GLP-1). Tuttavia, al momento non è chiaro come la forma di proteine ​​ingerite con la presenza o l'assenza di calcio possa influenzare la secrezione ormonale intestinale e lo svuotamento gastrico. Pertanto ci proponiamo di eseguire uno studio sull'effetto della co-ingestione di due diverse forme di proteine ​​in presenza o in assenza di calcio sulla disponibilità di ormoni intestinali e sullo svuotamento gastrico. Questo progetto contribuirà a fornire prove chiave per aiutare il lavoro futuro e raccomandazioni per interventi basati sulla nutrizione per la prevenzione e la gestione dell'obesità e del diabete di tipo 2.

Quindici uomini e donne metabolicamente sani, di età compresa tra 18 e 65 anni, BMI tra 18,5 e 25 kg/m2 saranno reclutati per partecipare a uno studio incrociato randomizzato. Ogni partecipante sarà sottoposto a 4 prove. Ogni prova durerà ~3 ore e sarà separata da un minimo di 48 ore:

CONTROL (CON) - 30 g Solo proteine ​​di controllo CONTROL + CALCIO (CON-C) - 30 g Proteine ​​di controllo + 9547 mg Capolac® (2500 mg di calcio ingerito) PROTEIN (PRO) - 30 g Solo proteine ​​aggregate PROTEIN + CALCIO (PRO -C) - 30 g Proteine ​​aggregate + 9547 mg Capolac® (2500 mg di calcio ingerito)

Ciascuna di queste bevande conterrà anche 500 ml di acqua, dolcificante a basso contenuto calorico (80 mg di sucralosio) e sarà etichettata con 150 mg di 13C1 sodio acetato e 100 mg di 13C1 sodio ottanoato per la misurazione dello svuotamento gastrico.

Ai partecipanti verrà chiesto di arrivare al laboratorio tra le 09:00 e le 10:00 dopo non aver mangiato per un periodo compreso tra 10 e 14 ore, ovvero a digiuno (l'assunzione di acqua è consentita e incoraggiata). All'arrivo in laboratorio, un membro del personale flebotomo addestrato inserirà una cannula (un tubicino di plastica) in una vena dorsale della mano preriscaldata sul dorso della mano o, in caso di insuccesso, nella vena antecubitale. Ai partecipanti verrà quindi data una delle quattro bevande di prova, che una volta ingerite avvieranno il processo. Subito dopo l'ingestione della bevanda di prova chiederemo ai partecipanti di compilare una scala di appetibilità.

I campioni di sangue verranno prelevati al basale e 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minuti dopo l'ingestione della bevanda di prova. I campioni di respiro verranno raccolti in exetainer al basale e ogni 5 minuti fino al punto temporale di 120 minuti per determinare lo svuotamento gastrico. Verrà inoltre completato un questionario sull'appetito al basale e ogni 60 minuti dopo l'ingestione della bevanda di prova per valutare le sensazioni di appetito. Dopo il punto temporale di 120 minuti, ai partecipanti verrà chiesto di consumare un pasto per il pranzo fino a quando non saranno comodamente sazi. Una volta soddisfatti del pranzo, compileranno il questionario finale sull'appetito. La giornata di prova sarà quindi completata. Dopo il completamento dello studio, ai partecipanti verrà chiesto di completare un questionario sull'alimentazione contenuta.

Un sottogruppo di 5 partecipanti verrà dotato di un sondino nasogastrico da un'infermiera BAPEN qualificata. 5 ml di aspirato dallo stomaco saranno campioni al basale, 30, 60 e 120 minuti che saranno distribuiti equamente per la profilazione dell'analita e il lavoro di coltura in vitro. 3 ml di aspirato gastrico verranno utilizzati per stimolare una linea cellulare GLUTag. Gli esperimenti saranno eseguiti incubando le cellule con l'aspirato gastrico neutralizzato in 250 µl di Krebs Ringer Buffer (KRB) per 2 ore a 37˚C, 5% CO2. Verrà condotta una seconda coltura, identica a quella precedentemente descritta, solo con l'aggiunta di specifici antagonisti del recettore cellulare.