Secreción de proteínas, calcio y hormonas intestinales (PROCAL2)

Un trabajo reciente en la Universidad de Bath ha demostrado que cuando se ingiere con 50 g de hidrolizado de proteína de suero, Capolac® (minerales de la leche con alto contenido de calcio) estimula poderosamente la disponibilidad de la importante hormona péptido-1 similar al glucagón (GLP-1). Sin embargo, actualmente no está claro cómo la forma de proteína ingerida con la presencia o ausencia de calcio puede afectar la secreción de hormonas intestinales y el vaciado gástrico. Por lo tanto, nuestro objetivo es realizar un estudio sobre el efecto de la ingesta conjunta de dos formas diferentes de proteína en presencia o ausencia de calcio sobre la disponibilidad de hormonas intestinales y el vaciamiento gástrico. Este proyecto ayudará a proporcionar evidencia clave para ayudar en el trabajo futuro y recomendaciones para intervenciones basadas en la nutrición para la prevención y el control de la obesidad y la DT2.

Quince hombres y mujeres metabólicamente sanos, de 18 a 65 años de edad, con un IMC entre 18,5 y 25 kg/m2, serán reclutados para participar en un estudio cruzado aleatorizado. Cada participante se someterá a 4 intentos. Cada prueba durará ~3 horas y estará separada por un mínimo de 48h:

CONTROL (CON) - 30 g Proteína de control solo CONTROL + CALCIO (CON-C) - 30 g Proteína de control + 9547 mg Capolac® (2500 mg de calcio ingeridos) PROTEÍNA (PRO) - 30 g Proteína agregada solo PROTEÍNA + CALCIO (PRO -C) - 30 g Proteína agregada + 9547 mg Capolac® (2500 mg de calcio ingeridos)

Cada una de estas bebidas contendrá además 500 mL de agua, edulcorante bajo en calorías (80 mg de sucralosa) y se etiquetarán con 150 mg de acetato de sodio 13C1 y 100 mg de octanoato de sodio 13C1 para la medición del vaciado gástrico.

Se pedirá a los participantes que lleguen al laboratorio entre las 09:00 y las 10:00 horas después de no comer durante 10 a 14 horas, es decir, en ayunas (se permite y fomenta la ingesta de agua). Al llegar al laboratorio, un flebotomista capacitado insertará una cánula (un pequeño tubo de plástico) en una vena dorsal de la mano precalentada en el dorso de la mano o, si no tiene éxito, en la vena antecubital. Luego, a los participantes se les dará una de las cuatro bebidas de prueba, que una vez ingeridas iniciarán la prueba. Justo después de la ingestión de la bebida de prueba, pediremos a los participantes que llenen una escala de palatabilidad.

Se tomarán muestras de sangre al inicio y a los 15, 30, 45, 60, 90 y 120 minutos después de la ingestión de la bebida de prueba. Las muestras de aliento se recolectarán en extainers al inicio y cada 5 minutos hasta el punto de tiempo de 120 minutos para determinar el vaciado gástrico. También se completará un cuestionario de apetito al inicio del estudio y cada 60 minutos después de la ingestión de la bebida de prueba para evaluar las sensaciones de apetito. Después del punto de tiempo de 120 minutos, se les pedirá a los participantes que consuman un almuerzo hasta que estén cómodamente llenos. Una vez satisfechos con el almuerzo, completarán el cuestionario final de apetito. El día del juicio entonces estará completo. Después de la finalización del estudio, se les pedirá a los participantes que completen un cuestionario sobre alimentación restringida.

Una enfermera calificada de BAPEN colocará una sonda nasogástrica en un subconjunto de 5 participantes. 5 ml de aspirado del estómago serán muestras al inicio, 30, 60 y 120 minutos que se distribuirán por igual para el perfil de analitos y el trabajo de cultivo in vitro. Se utilizarán 3 ml de aspirado gástrico para estimular una línea celular GLUTag. Los experimentos se realizarán incubando las células con el aspirado gástrico neutralizado en 250 µl de tampón de Ringer de Krebs (KRB) durante 2 horas a 37 ˚C, 5 % de CO2. Se realizará un segundo cultivo, idéntico al descrito anteriormente, solo que con la adición de antagonistas específicos de los receptores celulares.