Analýza zatížení mutací mtDNA v mezoangioblastech (MABS05)

Odůvodnění: Mitochondriální onemocnění způsobená defekty oxidativní fosforylace (OXPHOS) v důsledku mutací heteroplazmatické mitochondriální DNA (mtDNA) jsou vzácná (frekvence 1/5 000), ale závažná multisystémová onemocnění. Klinické projevy jsou velmi variabilní, ale postihují především energeticky náročné tkáně, jako je mozek a svaly. Myopatie je běžným rysem poruch mtDNA, je přítomna u více než 50 % nositelů mutace mtDNA a vážně ovlivňuje celkovou pohodu a kvalitu života pacientů. V současné době není pro tyto pacienty k dispozici žádná léčba, i když bylo prokázáno, že navození svalové regenerace pohybovou léčbou zmírňuje jejich myopatii. To znamená, že tito pacienti mohou produkovat svalová vlákna, která fungují lépe, s největší pravděpodobností proto, že mutační zátěž je nižší. Mezoangioblasty (MAB) jsou myogenní prekurzory, které byly rozpoznány jako zdroj pro vývoj systémové terapie myogenními kmenovými buňkami a alogenní transplantace byla úspěšně aplikována na myši a psy s Duchennovou svalovou dystrofií. Následná klinická studie fáze I/II u chlapců s DMD prokázala, že léčba dárcovskými MAB byla relativně bezpečná, ale nevedla ke klinickému zlepšení, což lze částečně přičíst nutnému použití imunosupresiv. Použití autologních MAB by to obešlo a předchozí studie naší skupiny prokázala, že je to proveditelné pro polovinu nositelů mutací mtDNA 6 různých mutací mtDNA, protože jejich nálož mutací mtDNA v mezoangioblastech (téměř) chyběla (<10 %) . V mtDNA o velikosti 16,5 kb je však mnohem více mutací mtDNA a cílem této studie je určit zátěž mutací mtDNA v mezoangioblastech jiných přenašečů mutací mtDNA a identifikovat pacienty nebo mutace, pro které je tento přístup proveditelný.

Cíl: Primárním cílem tohoto projektu je vyhodnotit zátěž mutací mtDNA v mezoangioblastech nositelů mutace mtDNA a identifikovat, kteří pacienti nevykazují žádnou/nízkou (<10%) zátěž mutací mtDNA v mezoangioblastech. Sekundární cíle se zaměřují na stanovení proliferace, myogenní diferenciace a kapacity OXPHOS mezoangioblastů, jejich stav systémového zánětu a hodnocení mutační zátěže mtDNA v satelitních buňkách.

Design studie: Monocentrická pozorovací studie. Studijní populace: 30 dospělých nositelů heteroplazmatické mtDNA bodové mutace nebo rozsáhlé mtDNA delece (>2kb).

Intervence: Od každého účastníka bude odebráno 30 mg biopsie kosterního svalstva a 20 ml vzorku žilní krve.

Hlavní parametry studie/koncové body: Zhodnoťte zátěž mutací mtDNA v mezoangioblastech pocházejících z kosterního svalstva.