Análise de carga de mutação mtDNA em mesoangioblastos (MABS05)

Justificativa: Doenças mitocondriais causadas por defeitos na fosforilação oxidativa (OXPHOS) devido a mutações heteroplásmicas do DNA mitocondrial (mtDNA) são raras (frequência 1/5.000), mas graves distúrbios multissistêmicos. As manifestações clínicas são altamente variáveis, mas afetam predominantemente os tecidos que demandam energia, como cérebro e músculos. A miopatia é uma característica comum dos distúrbios do mtDNA, estando presente em mais de 50% dos portadores da mutação do mtDNA, e afeta seriamente o bem-estar geral e a qualidade de vida dos pacientes. Atualmente, nenhum tratamento está disponível para esses pacientes, embora a indução da regeneração muscular por tratamento com exercícios tenha demonstrado aliviar sua miopatia. Isso implica que esses pacientes podem produzir fibras musculares com melhor desempenho, provavelmente porque a carga de mutação é menor. Os mesoangioblastos (MABs) são precursores miogênicos que têm sido reconhecidos como uma fonte para o desenvolvimento de uma terapia sistêmica com células-tronco miogênicas, e o transplante alogênico tem sido aplicado com sucesso em camundongos e cães com distrofia muscular de Duchenne. Um estudo clínico subsequente de fase I/II em meninos com DMD demonstrou que o tratamento com MABs de doadores foi relativamente seguro, mas não resultou em melhora clínica, o que pode ser parcialmente atribuído ao uso necessário de agentes imunossupressores. O uso de MABs autólogos contornaria isso e um estudo anterior de nosso grupo demonstrou que isso é viável para metade dos portadores de mutação do mtDNA de 6 mutações diferentes do mtDNA, já que sua carga de mutação do mtDNA em mesoangioblastos estava (quase) ausente (<10%) . No entanto, existem muito mais mutações do mtDNA no mtDNA de 16,5 kb e o objetivo deste estudo é determinar a carga de mutação do mtDNA em mesoangioblastos de outros portadores de mutações do mtDNA e identificar os pacientes ou mutações para os quais esta é uma abordagem viável.

Objetivo: Os objetivos primários deste projeto são avaliar a carga de mutação do mtDNA em mesoangioblastos de portadores de mutação do mtDNA e identificar quais pacientes apresentam nenhuma/baixa (<10%) carga de mutação do mtDNA em mesoangioblastos. Os objetivos secundários visam determinar a proliferação, diferenciação miogênica e capacidade OXPHOS de mesoangioblastos, seu estado inflamatório sistêmico e avaliação da carga de mutação do mtDNA em células satélites.

Desenho do estudo: Estudo de observação monocêntrico. População do estudo: 30 adultos portadores de uma mutação pontual heteroplásmica do mtDNA ou deleção em grande escala do mtDNA (>2kb).

Intervenção: De cada participante será coletada uma biópsia de músculo esquelético de 30mg e uma amostra de 20ml de sangue venoso.

Principais parâmetros/pontos finais do estudo: Avaliar a carga de mutação do mtDNA em mesoangioblastos derivados do músculo esquelético.