Analisi del carico di mutazione del mtDNA nei mesoangioblasti (MABS05)

Razionale: le malattie mitocondriali causate da difetti nella fosforilazione ossidativa (OXPHOS) dovute a mutazioni del DNA mitocondriale eteroplasmico (mtDNA) sono rare (frequenza 1/5.000), ma gravi disturbi multisistemici. Le manifestazioni cliniche sono molto variabili, ma interessano prevalentemente i tessuti che richiedono energia, come cervello e muscoli. La miopatia è una caratteristica comune dei disturbi del mtDNA, essendo presente in oltre il 50% dei portatori di mutazione del mtDNA, e compromette gravemente il benessere generale e la qualità della vita dei pazienti. Attualmente non è disponibile alcun trattamento per questi pazienti, anche se è stato dimostrato che l'induzione della rigenerazione muscolare mediante il trattamento con esercizi allevia la loro miopatia. Ciò implica che questi pazienti possono produrre fibre muscolari con prestazioni migliori, molto probabilmente perché il carico di mutazione è inferiore. I mesoangioblasti (MAB) sono precursori miogenici che sono stati riconosciuti come fonte per lo sviluppo di una terapia sistemica con cellule staminali miogeniche e il trapianto allogenico è stato applicato con successo a topi e cani con distrofia muscolare di Duchenne. Un successivo studio clinico di fase I/II su ragazzi con DMD ha dimostrato che il trattamento con MAB da donatore era relativamente sicuro, ma non ha comportato un miglioramento clinico, che può essere in parte attribuito all'uso richiesto di agenti immunosoppressori. L'uso di MAB autologhi eluderebbe questo e uno studio precedente del nostro gruppo ha dimostrato che ciò è fattibile per metà dei portatori di mutazioni del mtDNA di 6 diverse mutazioni del mtDNA, poiché il loro carico di mutazioni del mtDNA nei mesoangioblasti era (quasi) assente (<10%) . Tuttavia, ci sono molte più mutazioni del mtDNA nel mtDNA da 16,5 kb e lo scopo di questo studio è determinare il carico di mutazione del mtDNA nei mesoangioblasti di altri portatori di mutazioni del mtDNA e identificare i pazienti o le mutazioni per i quali questo è un approccio fattibile.

Obiettivo: Gli obiettivi primari di questo progetto sono valutare il carico di mutazione del mtDNA nei mesoangioblasti di portatori di mutazione del mtDNA e identificare quali pazienti mostrano un carico di mutazione del mtDNA nullo/basso (<10%) nei mesoangioblasti. Obiettivi secondari mirano a determinare la proliferazione, il differenziamento miogenico e la capacità OXPHOS dei mesoangioblasti, il loro stato di infiammazione sistemica e la valutazione del carico di mutazioni del mtDNA nelle cellule satelliti.

Disegno dello studio: studio di osservazione monocentrico. Popolazione in studio: 30 portatori adulti di una mutazione puntiforme del mtDNA eteroplasmica o delezione del mtDNA su larga scala (> 2kb).

Intervento: da ciascun partecipante verrà prelevata una biopsia del muscolo scheletrico da 30 mg e un campione di sangue venoso da 20 ml.

Principali parametri/endpoint dello studio: valutare il carico di mutazione del mtDNA nei mesoangioblasti derivati ​​dal muscolo scheletrico.