mtDNA-mutaatiokuormitusanalyysi mesoangioblasteissa (MABS05)

Perustelut: Heteroplasmisten mitokondrioiden DNA:n (mtDNA) mutaatioista johtuvat oksidatiivisen fosforylaation (OXPHOS) puutteet ovat harvinaisia ​​(taajuus 1/5 000), mutta vakavia monisysteemihäiriöitä. Kliiniset ilmenemismuodot ovat hyvin vaihtelevia, mutta vaikuttavat pääasiassa energiaa vaativiin kudoksiin, kuten aivoihin ja lihaksiin. Myopatia on mtDNA-häiriöiden yleinen piirre, jota esiintyy yli 50 %:ssa mtDNA-mutaatioiden kantajista, ja se vaikuttaa vakavasti potilaiden yleiseen hyvinvointiin ja elämänlaatuun. Tällä hetkellä näille potilaille ei ole saatavilla hoitoa, vaikka lihasten regeneraation indusoimisen harjoitteluhoidolla on osoitettu lievittävän heidän myopatiansa. Tämä tarkoittaa, että nämä potilaat voivat tuottaa lihaskuituja, jotka toimivat paremmin, todennäköisesti koska mutaatiokuormitus on pienempi. Mesoangioblastit (MAB:t) ovat myogeenisiä esiasteita, jotka on tunnistettu systeemisen myogeenisen kantasoluhoidon kehittämisen lähteeksi, ja allogeenistä transplantaatiota on sovellettu menestyksekkäästi hiirille ja koirille, joilla on Duchennen lihasdystrofia. Myöhempi vaiheen I/II kliininen tutkimus DMD:tä sairastavilla pojilla osoitti, että luovuttajien MAB-hoito oli suhteellisen turvallista, mutta ei johtanut kliiniseen paranemiseen, mikä voi osittain johtua vaaditusta immunosuppressiivisten aineiden käytöstä. Autologisten MAB:ien käyttäminen kiertäisi tämän, ja ryhmämme aikaisempi tutkimus osoitti, että tämä on mahdollista puolella kuuden eri mtDNA-mutaation mtDNA-mutaatioiden kantajista, koska niiden mtDNA-mutaatiokuormitus mesoangioblasteissa oli (melkein) puuttunut (<10 %). . 16,5 kb:n mtDNA:ssa on kuitenkin paljon enemmän mtDNA-mutaatioita, ja tämän tutkimuksen tavoitteena on määrittää mtDNA-mutaatiokuormitus muiden mtDNA-mutaation kantajien mesoangioblasteissa ja tunnistaa potilaat tai mutaatiot, joille tämä on toteuttamiskelpoinen lähestymistapa.

Tavoite: Tämän projektin ensisijaisena tavoitteena on arvioida mtDNA-mutaatiokuormitusta mtDNA-mutaation kantajien mesoangioblasteissa ja tunnistaa, millä potilailla ei ole/alhainen (<10%) mtDNA-mutaatiokuormitus mesoangioblasteissa. Toissijaiset tavoitteet tähtäävät mesoangioblastien proliferaation, myogeenisen erilaistumisen ja OXPHOS-kapasiteetin määrittämiseen, niiden systeemiseen tulehdustilaan ja satelliittisolujen mtDNA-mutaatiokuormituksen arviointiin.

Tutkimuksen suunnittelu: Yksikeskinen havaintotutkimus. Tutkimuspopulaatio: 30 aikuista heteroplasmisen mtDNA-pistemutaation tai laajamittaisen mtDNA-deleetion (>2 kb) kantajaa.

Interventio: Jokaiselta osallistujalta otetaan 30 mg luurankolihasbiopsia ja 20 ml laskimoverinäyte.

Tärkeimmät tutkimusparametrit/päätepisteet: Arvioi mtDNA-mutaatiokuormitus luurankolihaksista peräisin olevissa mesoangioblasteissa.