Analiza obciążenia mutacją mtDNA w mezoangioblastach (MABS05)

Uzasadnienie: Choroby mitochondrialne wywołane defektami fosforylacji oksydacyjnej (OXPHOS) z powodu mutacji heteroplazmatycznego mitochondrialnego DNA (mtDNA) są rzadkie (częstość 1/5000), ale ciężkie zaburzenia wieloukładowe. Objawy kliniczne są bardzo zmienne, ale dotyczą głównie tkanek wymagających energii, takich jak mózg i mięśnie. Miopatia jest częstą cechą zaburzeń mtDNA, występuje u ponad 50% nosicieli mutacji mtDNA i poważnie wpływa na ogólne samopoczucie i jakość życia pacjentów. Obecnie dla tych pacjentów nie jest dostępne żadne leczenie, chociaż wykazano, że indukcja regeneracji mięśni przez ćwiczenia fizyczne łagodzi ich miopatię. Oznacza to, że ci pacjenci mogą wytwarzać włókna mięśniowe, które działają lepiej, najprawdopodobniej dlatego, że obciążenie mutacją jest mniejsze. Mezoangioblasty (MAB) są prekursorami miogennymi, które uznano za źródło do opracowania ogólnoustrojowej terapii miogennymi komórkami macierzystymi, a przeszczepy allogeniczne zostały z powodzeniem zastosowane u myszy i psów z dystrofią mięśniową Duchenne'a. Kolejne badanie kliniczne fazy I/II u chłopców z DMD wykazało, że leczenie dawców MAB było względnie bezpieczne, ale nie skutkowało poprawą kliniczną, co częściowo można przypisać wymaganemu stosowaniu środków immunosupresyjnych. Zastosowanie autologicznych MAB pozwoliłoby to obejść, a poprzednie badanie naszej grupy wykazało, że jest to wykonalne dla połowy nosicieli mutacji mtDNA 6 różnych mutacji mtDNA, ponieważ ich obciążenie mutacją mtDNA w mezoangioblastach było (prawie) nieobecne (<10%) . Istnieje jednak znacznie więcej mutacji mtDNA w mtDNA 16,5 kb, a celem tego badania jest określenie ładunku mutacji mtDNA w mezoangioblastach innych nosicieli mutacji mtDNA i zidentyfikowanie pacjentów lub mutacji, dla których jest to możliwe.

Cel: Głównym celem tego projektu jest ocena ładunku mutacji mtDNA w mezoangioblastach nosicieli mutacji mtDNA i identyfikacja pacjentów wykazujących brak lub niski (<10%) ładunek mutacji mtDNA w mezoangioblastach. Cele drugorzędne mają na celu określenie proliferacji, różnicowania miogennego i zdolności OXPHOS mezoangioblastów, stanu ich ogólnoustrojowego stanu zapalnego oraz ocenę obciążenia mutacją mtDNA w komórkach satelitarnych.

Projekt badania: Jednoośrodkowe badanie obserwacyjne. Badana populacja: 30 dorosłych nosicieli heteroplazmatycznej mutacji punktowej mtDNA lub delecji mtDNA na dużą skalę (>2kb).

Interwencja: Od każdego uczestnika zostanie pobrana 30 mg biopsji mięśnia szkieletowego i 20 ml próbki krwi żylnej.

Główne parametry badania/punkty końcowe: Ocena ładunku mutacji mtDNA w mezoangioblastach pochodzących z mięśni szkieletowych.