Análisis de carga de mutación de mtDNA en mesoangioblastos (MABS05)

Justificación: Las enfermedades mitocondriales causadas por defectos en la fosforilación oxidativa (OXPHOS) debido a mutaciones del ADN mitocondrial heteroplásmico (ADNmt) son raras (frecuencia 1/5000), pero son trastornos multisistémicos graves. Las manifestaciones clínicas son muy variables, pero afectan predominantemente a los tejidos que demandan energía, como el cerebro y los músculos. La miopatía es una característica común de los trastornos del mtDNA, está presente en más del 50 % de los portadores de mutaciones en el mtDNA y afecta gravemente el bienestar general y la calidad de vida de los pacientes. Actualmente, no hay tratamiento disponible para estos pacientes, aunque se ha demostrado que la inducción de la regeneración muscular mediante el tratamiento con ejercicios alivia su miopatía. Esto implica que estos pacientes pueden producir fibras musculares que funcionan mejor, muy probablemente porque la carga de mutación es menor. Los mesoangioblastos (MAB) son precursores miogénicos que han sido reconocidos como una fuente para el desarrollo de una terapia de células madre miogénicas sistémicas, y el trasplante alogénico se ha aplicado con éxito a ratones y perros con distrofia muscular de Duchenne. Un estudio clínico posterior de fase I/II en niños con DMD demostró que el tratamiento con MAB de donantes era relativamente seguro, pero no dio como resultado una mejoría clínica, lo que puede atribuirse en parte al uso requerido de agentes inmunosupresores. El uso de MAB autólogos evitaría esto y un estudio previo de nuestro grupo demostró que esto es factible para la mitad de los portadores de mutaciones de mtDNA de 6 mutaciones diferentes de mtDNA, ya que su carga de mutaciones de mtDNA en mesoangioblastos estaba (casi) ausente (<10%) . Sin embargo, hay muchas más mutaciones de mtDNA en el mtDNA de 16,5 kb y el objetivo de este estudio es determinar la carga de mutaciones de mtDNA en mesoangioblastos de otros portadores de mutaciones de mtDNA e identificar a los pacientes o mutaciones para los que este es un enfoque factible.

Objetivo: Los objetivos principales de este proyecto son evaluar la carga de mutación de mtDNA en mesoangioblastos de portadores de mutaciones de mtDNA e identificar qué pacientes muestran una carga de mutación de mtDNA nula o baja (<10 %) en mesoangioblastos. Los objetivos secundarios tienen como objetivo determinar la proliferación, la diferenciación miogénica y la capacidad de OXPHOS de los mesoangioblastos, su estado de inflamación sistémica y la evaluación de la carga de mutaciones del ADNmt en células satélite.

Diseño del estudio: Estudio observacional monocéntrico. Población de estudio: 30 adultos portadores de una mutación puntual de ADNmt heteroplásmico o deleción de ADNmt a gran escala (>2 kb).

Intervención: De cada participante se tomará una biopsia de músculo esquelético de 30 mg y una muestra de sangre venosa de 20 ml.

Principales parámetros/criterios de valoración del estudio: Evaluar la carga de mutación del mtDNA en mesoangioblastos derivados del músculo esquelético.