DuoStim i tilfælde af PGT: Sammenligning af embryokvantitet og embryonal kvalitet ved hjælp af MitoScore

Klassisk mente man, at den follikulære udvikling kun fandt sted i den follikulære fase af menstruationscyklussen. Nye data viste imidlertid flere bølger af cyklisk udvikling af antralfolliklerne inden for den samme menstruationscyklus. Nogle forfattere insisterer på, at follikler dannet under lutealfasen kan have et lignende ægløsningspotentiale som dem, der dannes i follikulærfasen, og dermed tilbyde nye muligheder for ovariestimulering.

På grund af brugen af ​​forglasningsteknik og udseendet af gonadotropinerne har læger fået lov til at innovere de protokoller, der anvendes til kontrolleret ovariehyperstimulering og har været i stand til at opnå flere oocytter i en kortere periode til patienter, der kræver hurtig intervention, såsom onkologiske patienter. På grund af den akkumulerede erfaring med disse nye tilgange har nogle efterforskere for nylig foreslået en dobbeltstimulering (DuoStim) protokol. Beviser for kompetencen af ​​oocytter opnået fra lutealfasen er for nylig blevet defineret og offentliggjort. Det har heller ikke været forbundet med en øget risiko for medfødte anomalier.

DuoStim er en protokol, der består af to stimuleringer inden for samme menstruationscyklus, den ene i follikelfasen, der starter på dag 2 af cyklussen, og den anden i lutealfasen, der starter 5 dage efter den første ovariepunktur. Trigger udføres altid med GnRH-agonist.

Derudover er patienter, der kræver infertilitetsbehandling, stadig ældre, og brugen af ​​præimplantations genetisk testning (PGT) giver mulighed for en finere embryoudvælgelse sammen med bedre reproduktive resultater. I øjeblikket udføres de fleste PGT'er på blastocyststadiet, hvilket forbedrer prognosen, men tværtimod også forpligter til at nedfryse disse embryoner og udføre en udskudt overførsel, hvilket forlænger proceduren.

Et andet innovativt værktøj til en mere præcis embryoselektion, som for nylig er blevet beskrevet, er MitoScore. MitoScore er et mitokondrielt biomarkørindeks udviklet af Igenomix med det formål at indikere embryoets energetiske status. Den har til hensigt at udvælge de embryoner med det bedste implantationspotentiale og derfor mere tilbøjelige til at resultere i en igangværende graviditet efter en IVF-behandling. Det beregnes ved at dividere antallet af mitokondrielle DNA-kopier med mængden af ​​nuklear DNA. Selvom det stadig er kontroversielt, er det af nogle forfattere blevet bevist, at det øger succesraten for implantation og igangværende graviditeter i IVF-cyklusser og reducerer antallet af flere graviditeter.

Da PGT oftere bliver bedt om fra patienter, da kvinder forfølger infertilitetsbehandlinger i en fremskreden alder med en dårligere prognose, er læger nogle gange tvunget til at udføre flere stimuleringscyklusser for at få flere æg og følgelig et større antal biopsierede embryoner. Derfor opstår ideen om at udføre denne undersøgelse som et forsøg på at optimere hver menstruationscyklus til det maksimale.

Det menes, at DuoStim-protokollen kunne være et alternativ for denne gruppe af patienter, der gør det muligt at opnå et større antal oocytter i en kortere periode, og dermed øge antallet af biopsiede embryoner og muligvis reducere intervallet for at opnå en vellykket graviditet.

Efterforskerne sigter mod at evaluere den potentielle anvendelighed af DuoStim-protokollen for patienter, der ønsker at få oocytter så hurtigt som muligt. Ved hjælp af PGT vil efterforskerne også sammenligne frekvensen af ​​euploide embryoner pr. cyklus hos patienter, der gennemgår DuoStim-protokollen, versus patienter, der gennemgår to konventionelle kontrollerede ovariehyperstimulering i på hinanden følgende cyklusser. Patienterne vil omfatte kvinder med høj alder og dårlig respons.

Dette er et unicentrisk, prospektivt, randomiseret, ikke-blindt, parallelgruppekontrolleret fase IV klinisk studie. Forskerne antager, at frekvensen af ​​euploide embryoner pr. cyklus er ens i DuoStim-gruppen sammenlignet med gruppen, der gennemgår to konventionelle kontrollerede ovariehyperstimulering i på hinanden følgende cyklusser.

Endvidere vil efterforskerne vurdere, om der er forskelle med hensyn til antallet af samlede opnåede oocytter, antallet af modne oocytter, antallet af biopsierede blastocyster og MitoScore-indekset for de tilgængelige euploide embryoner. Disse variabler vil blive vurderet og sammenlignet afhængigt af om oocytterne blev opnået i follikulær fase eller luteal fase for DuoStim gruppen. Resulterende data vil blive sammenlignet med dem opnået fra den konventionelle stimuleringsgruppe. Den periode, der er forløbet fra begyndelsen af ​​ovariestimuleringen, indtil embryooverførslen vil også blive behandlet.

Patienter vil ringe til klinikken på Cyklusprogrammeringsafdelingen for at arrangere en behandling. Efter en kort periode med p-piller vil patienter blive henvist til en lægesamtale. På tidspunktet for den første konsultation vil den behandlende læge randomisere patienter, der ønsker at deltage og opfylder inklusionskriterier, ved hjælp af en tilfældig tildelingssoftware bestilt af Informatikafdelingen. Der vil ikke være nogen blinding, da denne undersøgelse er et åbent forsøg.

Deltagerne har ret til at trække sig fra undersøgelsen til enhver tid og af enhver grund uden nogen gener for deres fremtidige lægebehandling. Tilbagetrækning betyder, at forsøgspersonen ikke ønsker at modtage yderligere behandling, ligesom patienten heller ikke ønsker at fortsætte med at deltage i undersøgelsen. Årsager til at trække sig ud af undersøgelsen: patientens ønske, manglende samarbejde, toksicitet eller uønskede hændelser, der påvirker patientens sikkerhed, beslutning truffet af den primære investigator, når afbrydelsen er til fordel for patientens interesser, død og overtrædelse eller brud på undersøgelsesprotokollen.

Forsøget vil blive afsluttet, når alle deltagere har gennemført en passende opfølgningsperiode. Den kan også blive afbrudt før færdiggørelsesdatoen på grund af sikkerhedsmæssige årsager, manglende overholdelse af forventede rekrutteringsfrister eller endda hvis der er nogen risici vedrørende patientens sikkerhed eller sundhed. Alle deltagere, der er afbrudt fra forsøget, forbliver i opfølgningsfasen, undtagen dem, der trækker deres informerede samtykke tilbage eller dør.

Indtastninger foretaget i Clinical Research Data Capture Profile (CRD) skal være i overensstemmelse med dem, der er indeholdt i kildedokumenterne. Data vil blive eksporteret fra den institutionelle depotsoftwareplatform, som tilbageholder patientens journaler. Integritet og nøjagtighed vil blive kontrolleret af mindst én efterforsker, der sikrer, at både udtrukne oplysninger og alle de påkrævede regulatoriske dokumenter er passende. Studiefiler og alle kildedokumenter vil blive gemt i den nødvendige tid.

I betragtning af en euploid embryorate pr. cyklus på 20 % for konventionel stimulering og en forskel mellem middelværdier på 10 % (konventionel X DuoStim-gruppe), blev en prøvestørrelse på 136 patienter (68 pr. arm) estimeret til at opnå en styrke på 80 % med en alfa fejl på 5%. En tabsrate på 5 % blev også anset for at beregne stikprøvestørrelsen.

Kategoriske variabler vil blive vurderet ud fra antallet af emner samt absolutte og relative frekvenser. Kontinuerlige variable vil blive vurderet ved middel, medianer, standardafvigelser, 25. og 75. percentiler, minimum og maksimum. For både kategoriske og kontinuerte variable vil et konfidensinterval på 95 % blive taget i betragtning. Den eksplorative analyse af data vil gøre det muligt at bestemme kvaliteten af ​​dataene og at opdage enhver abnormitet.

Middel og proportioner af de beskrivende variable vil blive sammenlignet for at verificere, om randomiseringen blev korrekt udført. Når variablerne er normalfordelte, vil det blive anvendt en parametrisk test såsom chi-kvadrattest for kategoriske variable og en T-elev test eller ANOVA for kontinuerte variable. Hvis fordelingen ikke er normal, vil en ikke-parametrisk test, såsom en Mann-Whitney U eller Wilcoxon test, blive anvendt i henhold til variablens karakteristika.

Hvis efterforskerne finder statisk signifikante forskelle for beskrivende variable mellem de to grupper, vil disse variable blive inkluderet i en regressionsmodel for at kontrollere deres interferens.

Derudover vil lineære eller logistiske regressionsmodeller blive defineret, afhængig af om udfaldsvariablen er henholdsvis kvantitativ eller kategorisk. Det vil gøre det muligt at justere mulige forvirrende faktorer, der potentielt kan påvirke resultaterne.