DuoStim в случаях PGT: сравнение количества и качества эмбрионов с использованием MitoScore

Классически считалось, что фолликулярное развитие происходит только во время фолликулярной фазы менструального цикла. Однако новые данные продемонстрировали несколько волн циклического развития антральных фолликулов в пределах одного и того же менструального цикла. Некоторые авторы настаивают на том, что фолликулы, формирующиеся в лютеиновую фазу, могут иметь такой же овуляционный потенциал, как и фолликулярные, что открывает новые возможности для стимуляции яичников.

Благодаря использованию техники витрификации и появлению гонадотропинов врачи получили возможность вводить новшества в протоколы контролируемой гиперстимуляции яичников и получать больше ооцитов за более короткий период для пациентов, нуждающихся в быстром вмешательстве, таких как онкологические пациенты. Благодаря накопленному опыту применения этих новых подходов некоторые исследователи недавно предложили протокол двойной стимуляции (DuoStim). Доказательства компетентности ооцитов, полученных в лютеиновой фазе, были недавно определены и опубликованы. Кроме того, это не было связано с повышенным риском врожденных аномалий.

DuoStim представляет собой протокол, состоящий из двух стимуляций в рамках одного и того же менструального цикла: одна в фолликулярную фазу, начинающаяся на 2-й день цикла, а другая в лютеиновую фазу, начинающаяся через 5 дней после первой пункции яичников. Триггер всегда выполняется с агонистом ГнРГ.

Кроме того, пациенты, нуждающиеся в лечении бесплодия, становятся все старше, а использование преимплантационного генетического тестирования (PGT) позволяет проводить более точный отбор эмбрионов наряду с лучшими репродуктивными результатами. В настоящее время большинство ПГТ проводят на стадии бластоцисты, что улучшает прогноз, но, напротив, также обязывает замораживать эти эмбрионы и выполнять отсроченный перенос, удлиняя процедуру.

Еще одним инновационным инструментом для более точного отбора эмбрионов, который был недавно описан, является MitoScore. MitoScore — это индекс митохондриальных биомаркеров, разработанный Igenomix с целью определения энергетического статуса эмбриона. Он намеревается выбрать те эмбрионы, которые имеют наилучший потенциал для имплантации и, следовательно, с большей вероятностью приведут к продолжающейся беременности после лечения ЭКО. Он рассчитывается путем деления количества копий митохондриальной ДНК на количество ядерной ДНК. Хотя это все еще остается спорным, некоторые авторы доказали, что в циклах ЭКО увеличивается количество успешных имплантаций и продолжающихся беременностей, а также уменьшается количество многоплодных беременностей.

Поскольку PGT чаще запрашивается у пациенток, поскольку женщины проходят лечение от бесплодия в пожилом возрасте с более неблагоприятным прогнозом, иногда врачи вынуждены проводить несколько циклов стимуляции, чтобы получить больше яйцеклеток и, следовательно, большее количество биопсийных эмбрионов. Отсюда идея проведения данного исследования возникает как попытка максимально оптимизировать каждый менструальный цикл.

Считается, что протокол DuoStim может стать альтернативой для этой группы пациенток, позволяя получить большее количество ооцитов за более короткий срок, тем самым увеличив количество биопсийных эмбрионов и, возможно, сократив интервал до наступления успешной беременности.

Исследователи стремятся оценить потенциальную полезность протокола DuoStim для пациентов, желающих как можно скорее получить ооциты. Кроме того, с помощью PGT исследователи будут сравнивать количество эуплоидных эмбрионов за цикл у пациенток, проходящих протокол DuoStim, по сравнению с пациентами, прошедшими две обычные контролируемые гиперстимуляции яичников в последовательных циклах. Среди пациентов будут женщины пожилого возраста с плохим ответом.

Это одноцентровое, проспективное, рандомизированное, неслепое, контролируемое клиническое исследование фазы IV в параллельных группах. Исследователи предполагают, что количество эуплоидных эмбрионов за цикл аналогично в группе DuoStim по сравнению с группой, подвергающейся двум обычным контролируемым гиперстимуляциям яичников в последовательных циклах.

Кроме того, исследователи оценят, существуют ли различия в отношении общего количества полученных ооцитов, количества зрелых ооцитов, количества биопсийных бластоцист и индекса MitoScore доступных эуплоидных эмбрионов. Эти переменные будут оцениваться и сравниваться в зависимости от того, были ли ооциты получены в фолликулярной или лютеиновой фазе для группы DuoStim. Полученные данные будут сравниваться с данными, полученными в группе обычной стимуляции. Период, прошедший с начала стимуляции яичников до переноса эмбриона, также будет рассматриваться.

Пациенты звонят в клинику в отдел программирования цикла, чтобы договориться о лечении. После непродолжительного приема противозачаточных таблеток пациенты будут направлены на прием к врачу. Во время первой консультации лечащий врач рандомизирует пациентов, желающих участвовать и отвечающих критериям включения, используя программное обеспечение случайного распределения, заказанное отделом информатики. Не будет ослепления, так как это исследование является открытым испытанием.

Участники имеют право выйти из исследования в любое время и по любой причине без каких-либо неудобств для их будущего медицинского обслуживания. Выход означает, что субъект не хочет получать какое-либо дальнейшее лечение, а также пациент не желает продолжать участие в исследовании. Причины выхода из исследования: желание пациента, отказ от сотрудничества, токсичность или нежелательное явление, влияющее на безопасность пациента, решение главного исследователя всякий раз, когда прерывание проводится в пользу интересов пациента, смерть и нарушение или нарушение протокола исследования.

Испытание будет прекращено, когда все участники завершат адекватный период наблюдения. Он также может быть прерван до даты завершения из-за соображений безопасности, несоблюдения ожидаемых сроков найма или даже в случае наличия каких-либо рисков, касающихся безопасности или здоровья пациента. Все участники, исключенные из исследования, останутся на этапе последующего наблюдения, за исключением тех, кто отозвал свое информированное согласие или умер.

Записи, сделанные в профиле сбора данных клинических исследований (CRD), должны соответствовать тем, которые содержатся в исходных документах. Данные будут экспортированы из программной платформы институционального репозитория, в которой хранятся медицинские записи пациентов. Целостность и точность будут проверяться по крайней мере одним следователем, гарантирующим, что как извлеченная информация, так и все необходимые нормативные документы соответствуют требованиям. Учебные файлы и все исходные документы будут храниться в течение необходимого времени.

Принимая во внимание частоту эуплоидных эмбрионов на цикл в 20 % для обычной стимуляции и разницу между средними значениями в 10 % (группа с традиционной стимуляцией X DuoStim), размер выборки из 136 пациентов (68 на группу) был рассчитан для получения мощности 80 % с альфа-ошибка 5%. При расчете размера выборки также учитывался уровень потерь в размере 5%.

Категориальные переменные будут оцениваться по количеству субъектов, а также по абсолютной и относительной частоте. Непрерывные переменные будут оцениваться с помощью средних значений, медиан, стандартных отклонений, 25-го и 75-го процентилей, минимума и максимума. Как для категориальных, так и для непрерывных переменных будет рассматриваться доверительный интервал 95%. Исследовательский анализ данных позволит определить качество данных и обнаружить любую аномалию.

Средние значения и пропорции описательных переменных будут сравниваться для проверки правильности выполнения рандомизации. Всякий раз, когда переменные нормально распределены, будет применяться параметрический тест, такой как тест хи-квадрат для категориальных переменных и тест Т-Стьюдента или ANOVA для непрерывных переменных. Если распределение не является нормальным, в соответствии с характеристиками переменной будет применяться непараметрический критерий, такой как U-критерий Манна-Уитни или критерий Уилкоксона.

Если исследователи обнаружат статически значимые различия описательных переменных между двумя группами, эти переменные будут включены в регрессионную модель, чтобы контролировать их интерференцию.

Кроме того, будут определены модели линейной или логистической регрессии, в зависимости от того, является ли переменная результата количественной или категориальной соответственно. Это позволит скорректировать возможные искажающие факторы, которые потенциально могут повлиять на результаты.