Autoflor -Lyophilized Capsulated Autological FMT for at genoprette tarmmikrobiom efter behandling med antibiotika (FMT)

Brugen af ​​antibiotika har også kort- og langsigtede ulemper for den enkelte. I forsøg med voksne mennesker har oral indtagelse af antibiotika vist sig at påvirke tarmmikrobiotaen markant ved at reducere diversiteten og ændre sammensætningen samt ved at sprede antibiotikaresistensgener (AR).

Frysetørrede FMT-produkter har langvarig stabilitet af fækal mikrobiota, der er nyttig til indkapsling. Mængden af ​​kapsler, der skal til for at fordøje, er også meget lavere sammenlignet med at bruge frisk eller frosset materiale.

I forventning om et frafald på 25 % vil vi rekruttere 40 raske voksne mellem 18-40 år. Deltagernes betændelsesstatus ved rekruttering vil blive testet ved at tage blodprøver. Der opnås en prøve på 100-150 g af deltagernes afføring. Afføringen vil blive testet for potentielle skadelige patogener.

50 g opsamlet afføring behandles inden for 6 timer efter passage, fortyndes i 0,85% NaCl, homogeniseres ved hjælp af en mixer. Den fækale suspension filtreres gennem steriliserede metalsigter under biologisk sikkerhedsskab. Suspensionen centrifugeres derefter. Supernatanten dekanteres derefter i nye centrifugerør og centrifugeres. Den øvre bakteriepellet resuspenderes i isotonisk natriumchlorid med 10 % trehalose. Suspensionen opbevares ved -80°C i op til to uger, før den frysetørres. Opløsningen lyofiliseres i en Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Tarrasa, Spanien) i 44 timer, og det resulterende produkt indkapsles i hypromellosekapsler (størrelse 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, USA) og opbevares ved 4°C. Protokollen er anvendt fra tidligere undersøgelser med kapslet FMT. Hver kapsel indeholder ca. 0,35 g lyofiliseret afføringsekstrakt. O'boy varm chokoladepulver bruges som placebo.

De 30 deltagere er randomiseret og dobbeltblindet i to grupper, der hver har 15 forsøgspersoner. Alle deltagere vil få en 5-dages (dag 1-5, figur 1) kur med Amoxicillin + Clavulanat 875/125 mg × 2.

Gruppe A Interventionsgruppe. Deltagerne får 4 kapsler indeholdende fækalt materiale (kapsel 1) efter behandling med antibiotika på dag 7.

Gruppe B Kontrolgruppe. Deltagerne får 4 placebokapsler (kapsel 2) efter behandling med antibiotika på dag 7.

Gruppe B får FMT-kapsler (kapsler 1) som "redningsterapi" på dag 28. Gruppe A vil få placebo (kapsler 2) som beskrevet tidligere.

Kapslerne (kapsler på tidspunkt 1 og 2) administreres under opsyn af forskerholdet. Kapslerne sluges med juice. Deltagerne bliver bedt om at være på en klar flydende diæt i 8 timer før interventionen. Der bør ikke indtages fast føde inden for to timer efter fordøjelse af kapslerne. Ellers anses ingen begrænsninger for diæten for nødvendige. Under besøget interviewes deltagerne og sikres, at der ikke er opstået tegn på infektion, og at der ikke har været væsentlige ændringer i tarmfunktionen.

Fækale prøver vil blive indsamlet fra alle deltagere ugentligt startende fra dag 6 i 7 uger indtil dag 48 (i alt 7 prøver (3 hætteglas/prøve)). Undersøgelsesprøverne opbevares i afføringsbeholdere i hjemmefryseren (-18°C), indtil de indsamles af undersøgelsespersonalet og opbevares der efter ved -80°C. Calprotectin-prøver opbevares i køleskabet, indtil de indsamles af undersøgelsespersonalet.

Deltagerne vil udfylde et spørgeskema med spørgsmål om eventuelle abdominale symptomer, afføringsfrekvens, afføringskonsistens, mavesmerter, kvalme og anden brugt medicin ugentligt indtil 7 uger. Brug af yderligere antibiotika i opfølgningsperioden fører til frafald. Deltagerne gennemfører en livskvalitetsundersøgelse (HRQoL) på dag 1 (introduktionen af ​​antibiotika), på dag 7, når auto-FMT/placebo (første intervention) udføres, på dag 28 (anden intervention) og i slutningen af ​​den følgende -up periode (dag 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Deltagere med feber, vandig diarré (> 3 løs afføring på 24 timer), blodig afføring, mavesmerter og kramper) testes for C. difficile. I tilfælde af feber kontrolleres CRP-niveauet og det fuldstændige blodtal. Deltagere med blodig afføring vil blive udelukket fra undersøgelsen.

Der vil blive taget blodprøver på dag 7, 9, 28 og 30. Der opsamles 5mL blod (C-reaktivt protein, plasma).