Autoflor: FMT autológico encapsulado liofilizado para restaurar el microbioma intestinal después del tratamiento con antibióticos (FMT)

El uso de antibióticos también tiene desventajas para el individuo a corto y largo plazo. En ensayos con humanos adultos, se ha demostrado que la ingesta oral de antibióticos afecta notablemente a la microbiota intestinal, al reducir la diversidad y alterar la composición, así como al propagar genes de resistencia a los antibióticos (RA).

Los productos FMT liofilizados tienen una estabilidad duradera de la microbiota fecal útil para la encapsulación. La cantidad de cápsulas necesarias para digerir también es mucho menor en comparación con el uso de material fresco o congelado.

Anticipando un abandono del 25%, reclutaremos a 40 adultos sanos de entre 18 y 40 años. El estado de inflamación de los participantes en el momento del reclutamiento se evaluará tomando muestras de sangre. Se obtiene una muestra de 100 a 150 g de las heces de los participantes. Las heces se analizarán en busca de posibles patógenos dañinos.

Se procesan 50 g de heces recolectadas dentro de las 6 h posteriores al paso, se diluyen en NaCl al 0,85 % y se homogeneizan utilizando un mezclador. La suspensión fecal se filtra a través de tamices metálicos esterilizados bajo una cabina de seguridad biológica. Luego se centrifuga la suspensión. Luego se decanta el sobrenadante en tubos de centrífuga nuevos y se centrifuga. El sedimento bacteriano superior se resuspende en cloruro de sodio isotónico con trehalosa al 10%. La suspensión se almacena a -80°C hasta dos semanas antes de liofilizarse. La solución se liofiliza en un Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Tarrasa, España) durante 44 h, y el producto resultante se encapsula en cápsulas de hipromelosa (tamaños 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, EE. UU.) y se almacena a 4°C. El protocolo se aplica a partir de estudios previos con FMT capsulado. Cada cápsula contiene aproximadamente 0,35 g de extracto de heces liofilizado. El chocolate caliente en polvo O'boy se utiliza como placebo.

Los 30 participantes son asignados al azar y doble ciego en dos grupos, cada uno con 15 sujetos. Todos los participantes recibirán un ciclo de 5 días (días 1 a 5, Figura 1) de amoxicilina + clavulanato 875/125 mg × 2.

Grupo A Grupo de intervención. Los participantes recibirán 4 cápsulas que contienen materia fecal (Cápsula 1) después del tratamiento con antibióticos el día 7.

Grupo B Grupo de control. Los participantes recibirán 4 cápsulas de placebo (cápsula 2) después del tratamiento con antibióticos el día 7.

El grupo B recibirá cápsulas de FMT (cápsulas 1) como "terapia de rescate" el día 28. Al grupo A se le administrará placebo (cápsulas 2) como se describió anteriormente.

Las cápsulas (cápsulas en los momentos 1 y 2) se administran bajo la supervisión del equipo de investigación. Las cápsulas se tragan con jugo. Se pide a los participantes que sigan una dieta de líquidos claros durante 8 h antes de la intervención. No se debe ingerir ningún alimento sólido dentro de las dos horas posteriores a la digestión de las cápsulas. Por lo demás, no se consideran necesarias restricciones en la dieta. Durante la visita se entrevista a los participantes y se les asegura que no se han producido signos de infección y que no ha habido cambios significativos en la función intestinal.

Se recolectarán muestras fecales de todos los participantes semanalmente a partir del día 6 durante 7 semanas hasta el día 48 (un total de 7 muestras (3 viales/muestra)). Las muestras del estudio se almacenan en recipientes de recolección de heces en el congelador doméstico (-18 °C) hasta que las recoja el personal del estudio y luego se almacenen allí a -80 °C. Las muestras de calprotectina se almacenan en el refrigerador hasta que las recoja el personal del estudio.

Los participantes completarán un cuestionario que incluirá preguntas sobre cualquier síntoma abdominal, frecuencia de defecación, consistencia de las heces, dolor abdominal, náuseas y otros medicamentos utilizados semanalmente hasta las 7 semanas. El uso de antibióticos adicionales durante el período de seguimiento provoca el abandono. Los participantes completan una encuesta de calidad de vida (CVRS) el día 1 (la introducción de antibióticos), el día 7 cuando se realiza auto-FMT/placebo (primera intervención), el día 28 (segunda intervención) y al final de la siguiente. período de preparación (día 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

A los participantes con fiebre, diarrea acuosa (> 3 deposiciones blandas en 24 horas), heces con sangre, dolor abdominal y calambres) se les realiza una prueba de detección de C. difficile. En caso de fiebre se controla el nivel de PCR y el hemograma. Los participantes con heces con sangre serán excluidos del estudio.

Se tomarán muestras de sangre los días 7, 9, 28 y 30. Se recogen 5 ml de sangre (proteína C reactiva, plasma).