Autoflor - FMT autologique encapsulé lyophilisé pour restaurer le microbiome intestinal après un traitement avec des antibiotiques (FMT)

L’utilisation d’antibiotiques présente également des inconvénients à court et à long terme pour l’individu. Dans des essais menés auprès d'adultes humains, il a été démontré que la prise orale d'antibiotiques affecte de manière significative le microbiote intestinal, en réduisant la diversité et en modifiant la composition, ainsi qu'en propageant les gènes de résistance aux antibiotiques (RA).

Les produits FMT lyophilisés ont une stabilité durable du microbiote fécal utile pour l'encapsulation. La quantité de capsules nécessaires à la digestion est également bien inférieure à celle de l’utilisation de matières fraîches ou congelées.

En anticipant un abandon de 25 %, nous recruterons 40 adultes en bonne santé âgés de 18 à 40 ans. L'état d'inflammation des participants au recrutement sera testé en prélevant des échantillons de sang. Un échantillon de 100 à 150 g des matières fécales des participants est obtenu. Les matières fécales seront testées pour détecter d’éventuels agents pathogènes nocifs.

50 g de selles collectées sont traitées dans les 6 h suivant le passage, diluées dans NaCl 0,85%, homogénéisées à l'aide d'un mélangeur. La suspension fécale est filtrée sur tamis métalliques stérilisés sous enceinte de sécurité biologique. La suspension est ensuite centrifugée. Le surnageant est ensuite décanté dans de nouveaux tubes à centrifuger et centrifugé. Le culot bactérien supérieur est remis en suspension dans du chlorure de sodium isotonique additionné de tréhalose à 10 %. La suspension est conservée à -80°C jusqu'à deux semaines avant d'être lyophilisée. La solution est lyophilisée dans un Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Tarrasa, Espagne) pendant 44 h, et le produit résultant est encapsulé dans des capsules d'hypromellose (tailles 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, USA) et conservé à 4°C. Le protocole est appliqué à partir d'études antérieures avec FMT en capsulé. Chaque capsule contient environ 0,35 g d'extrait de selles lyophilisé. La poudre de chocolat chaud O'boy est utilisée comme placebo.

Les 30 participants sont randomisés et en double aveugle en deux groupes, chacun comprenant 15 sujets. Tous les participants recevront une cure de 5 jours (jours 1-5, figure 1) d'amoxicilline + clavulanate 875/125 mg × 2.

Groupe A Groupe d'intervention. Les participants recevront 4 capsules contenant des matières fécales (Capsule 1) après un traitement aux antibiotiques le jour 7.

Groupe B Groupe témoin. Les participants recevront 4 capsules placebo (Capsule 2) après un traitement antibiotique le jour 7.

Le groupe B recevra des capsules FMT (Capsules 1) comme « thérapie de secours » au jour 28. Le groupe A recevra un placebo (Capsules 2) comme décrit précédemment.

Les capsules (Capsules aux moments 1 et 2) sont administrées sous la supervision de l'équipe de recherche. Les gélules sont avalées avec du jus. Il est demandé aux participants de suivre un régime liquide clair pendant 8 heures avant l'intervention. Aucun aliment solide ne doit être pris dans les deux heures suivant la digestion des gélules. Sinon, aucune restriction alimentaire n’est considérée comme nécessaire. Au cours de la visite, les participants sont interrogés et s'assurent qu'aucun signe d'infection n'est apparu et qu'il n'y a eu aucun changement significatif dans la fonction intestinale.

Des échantillons fécaux seront collectés auprès de tous les participants chaque semaine à partir du jour 6 pendant 7 semaines jusqu'au jour 48 (total 7 échantillons (3 flacons/échantillon)). Les échantillons de l'étude sont conservés dans des conteneurs de collecte de selles dans le congélateur domestique (-18 °C) jusqu'à ce qu'ils soient collectés par le personnel de l'étude et stockés ensuite à -80 °C. Les échantillons de calprotectine sont conservés au réfrigérateur jusqu'à ce qu'ils soient collectés par le personnel de l'étude.

Les participants rempliront un questionnaire comprenant des questions sur les symptômes abdominaux, la fréquence des défécations, la consistance des selles, les douleurs abdominales, les nausées et autres médicaments utilisés chaque semaine jusqu'à 7 semaines. L'utilisation d'antibiotiques supplémentaires pendant la période de suivi entraîne un abandon. Les participants répondent à une enquête sur la qualité de vie (HRQoL) au jour 1 (introduction des antibiotiques), au jour 7 lorsque l'auto-FMT/placebo (première intervention) est effectué, au jour 28 (deuxième intervention) et à la fin du suivi Période de mise en place (jour 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Les participants présentant de la fièvre, une diarrhée aqueuse (> 3 selles molles en 24 heures), des selles sanglantes, des douleurs abdominales et des crampes) sont testés pour C. difficile. En cas de fièvre, le taux de CRP et la formule sanguine complète sont contrôlés. Les participants ayant des selles sanglantes seront exclus de l'étude.

Des échantillons de sang seront prélevés aux jours 7, 9, 28 et 30. 5 ml de sang sont collectés (protéine C-réactive, plasma).