Autoflor – Lyophilisiertes gekapseltes autologisches FMT zur Wiederherstellung des Darmmikrobioms nach der Behandlung mit Antibiotika (FMT)

Der Einsatz von Antibiotika bringt auch kurz- und langfristige Nachteile für den Einzelnen mit sich. In Versuchen mit erwachsenen Menschen hat sich gezeigt, dass die orale Einnahme von Antibiotika die Darmmikrobiota deutlich beeinflusst, indem sie die Diversität verringert und die Zusammensetzung verändert sowie Antibiotikaresistenzgene (AR) verbreitet.

Gefriergetrocknete FMT-Produkte verfügen über eine lang anhaltende Stabilität der fäkalen Mikrobiota, die für die Einkapselung nützlich ist. Auch die Menge an Kapseln, die zur Verdauung benötigt wird, ist im Vergleich zur Verwendung von frischem oder gefrorenem Material deutlich geringer.

Wir rechnen mit einer Abbrecherquote von 25 % und werden 40 gesunde Erwachsene im Alter zwischen 18 und 40 Jahren rekrutieren. Der Entzündungsstatus der Teilnehmer bei der Rekrutierung wird durch die Entnahme von Blutproben getestet. Es wird eine Probe von 100–150 g des Kots der Teilnehmer entnommen. Der Kot wird auf mögliche schädliche Krankheitserreger untersucht.

50 g des gesammelten Stuhls werden innerhalb von 6 Stunden nach der Passage verarbeitet, in 0,85 % NaCl verdünnt und mit einem Mixer homogenisiert. Die Fäkaliensuspension wird durch sterilisierte Metallsiebe unter einer biologischen Sicherheitswerkbank filtriert. Anschließend wird die Suspension zentrifugiert. Anschließend wird der Überstand in neue Zentrifugenröhrchen umgefüllt und zentrifugiert. Das obere Bakterienpellet wird in isotonischem Natriumchlorid mit 10 % Trehalose resuspendiert. Die Suspension wird bis zu zwei Wochen bei -80 °C gelagert, bevor sie lyophilisiert wird. Die Lösung wird in einem Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Tarrasa, Spanien) 44 Stunden lang lyophilisiert und das resultierende Produkt in Hypromellosekapseln (Größe 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, USA) eingekapselt und bei 4 °C gelagert. Das Protokoll wird aus früheren Studien mit gekapseltem FMT übernommen. Jede Kapsel enthält ca. 0,35 g lyophilisierten Stuhlextrakt. Als Placebo wird heißes Schokoladenpulver von O'boy verwendet.

Die 30 Teilnehmer werden randomisiert und doppelt verblindet in zwei Gruppen mit jeweils 15 Probanden eingeteilt. Alle Teilnehmer erhalten eine 5-tägige (Tag 1-5, Abbildung 1) Kur mit Amoxicillin + Clavulanat 875/125 mg × 2.

Gruppe A Interventionsgruppe. Die Teilnehmer erhalten nach der Behandlung mit Antibiotika am 7. Tag 4 Kapseln mit Fäkalien (Kapsel 1).

Gruppe B Kontrollgruppe. Die Teilnehmer erhalten nach der Behandlung mit Antibiotika am 7. Tag 4 Placebo-Kapseln (Kapsel 2).

Gruppe B erhält am 28. Tag FMT-Kapseln (Kapseln 1) als „Rettungstherapie“. Gruppe A erhält wie zuvor beschrieben ein Placebo (Kapseln 2).

Die Kapseln (Kapseln zu den Zeitpunkten 1 und 2) werden unter Aufsicht des Forschungsteams verabreicht. Die Kapseln werden mit Saft geschluckt. Die Teilnehmer werden gebeten, vor dem Eingriff acht Stunden lang eine klare, flüssige Diät zu sich zu nehmen. Innerhalb von zwei Stunden nach der Verdauung der Kapseln sollte keine feste Nahrung mehr zu sich genommen werden. Ansonsten werden keine Einschränkungen der Ernährung als notwendig erachtet. Während des Besuchs werden die Teilnehmer befragt und sichergestellt, dass keine Anzeichen einer Infektion aufgetreten sind und keine wesentlichen Veränderungen der Darmfunktion aufgetreten sind.

Von allen Teilnehmern werden wöchentlich Stuhlproben entnommen, beginnend am 6. Tag über 7 Wochen bis zum 48. Tag (insgesamt 7 Proben (3 Fläschchen/Probe)). Die Studienproben werden in Stuhlsammelbehältern im häuslichen Gefrierschrank (-18 °C) aufbewahrt, bis sie vom Studienpersonal abgeholt und dort anschließend bei -80 °C gelagert werden. Calprotectin-Proben werden im Kühlschrank aufbewahrt, bis sie vom Studienpersonal entnommen werden.

Die Teilnehmer füllen wöchentlich bis zur 7. Woche einen Fragebogen mit Fragen zu etwaigen Bauchbeschwerden, Stuhlfrequenz, Stuhlkonsistenz, Bauchschmerzen, Übelkeit und anderen verwendeten Medikamenten aus. Der Einsatz zusätzlicher Antibiotika während der Nachbeobachtungszeit führt zum Studienabbruch. Die Teilnehmer nehmen am ersten Tag (Einführung von Antibiotika), am siebten Tag, an dem Auto-FMT/Placebo (erster Eingriff) durchgeführt wird, am 28. Tag (zweiter Eingriff) und am Ende des folgenden Eingriffs an einer Lebensqualitätsumfrage (HRQoL) teil -Up-Zeitraum (Tag 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Teilnehmer mit Fieber, wässrigem Durchfall (> 3 weiche Stühle in 24 Stunden), blutigem Stuhl, Bauchschmerzen und Krämpfen) werden auf C. difficile getestet. Bei Fieber werden der CRP-Wert und das große Blutbild kontrolliert. Teilnehmer mit blutigem Stuhl werden von der Studie ausgeschlossen.

An den Tagen 7, 9, 28 und 30 werden Blutproben entnommen. Es werden 5 ml Blut gesammelt (C-reaktives Protein, Plasma).