Autoflor -Lyophilized Capsulated Autological FMT for å gjenopprette tarmmikrobiom etter behandling med antibiotika (FMT)

Bruk av antibiotika har også kort- og langsiktige ulemper for den enkelte. I forsøk med voksne mennesker har oralt inntak av antibiotika vist seg å påvirke tarmmikrobiotaen markant, ved å redusere mangfoldet og endre sammensetningen, samt ved å spre antibiotikaresistensgener (AR).

Frysetørkede FMT-produkter har langvarig stabilitet av fekal mikrobiota som er nyttig for innkapsling. Mengden kapsler som trengs for å fordøye er også mye lavere sammenlignet med å bruke ferskt eller frossent materiale.

I påvente av et frafall på 25 % vil vi rekruttere 40 friske voksne mellom 18-40 år. Betennelsesstatus hos deltakerne ved rekruttering vil bli testet ved å ta blodprøver. En 100-150 g prøve av deltakernes avføring oppnås. Avføringen vil bli testet for potensielle skadelige patogener.

50 g oppsamlet avføring behandles innen 6 timer etter passasje, fortynnet i 0,85 % NaCl, homogenisert med en mikser. Den fekale suspensjonen filtreres gjennom steriliserte metallsikter under biologisk sikkerhetsskap. Suspensjonen sentrifugeres deretter. Supernatanten dekanteres deretter over i nye sentrifugerør og sentrifugeres. Den øvre bakteriepelleten resuspenderes i isotonisk natriumklorid med 10 % trehalose. Suspensjonen lagres ved -80°C opptil to uker før den frysetørkes. Løsningen frysetørkes i en Lyoquest pluss Ae85C (Telstar, Tarrasa, Spania) i 44 timer, og det resulterende produktet er innkapslet i hypromellosekapsler (størrelse 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, USA) og lagret ved 4°C. Protokollen er brukt fra tidligere studier med innkapslet FMT. Hver kapsel inneholder ca. 0,35 g lyofilisert avføringsekstrakt. O'boy varm sjokoladepulver brukes som placebo.

De 30 deltakerne er randomisert og dobbeltblindet i to grupper, hver med 15 forsøkspersoner. Alle deltakere vil få en 5-dagers (dag 1-5, figur 1) kur med Amoxicillin + Clavulanat 875/125 mg × 2.

Gruppe A Intervensjonsgruppe. Deltakerne vil få utdelt 4 kapsler som inneholder fekalt materiale (kapsel 1) etter behandling med antibiotika på dag 7.

Gruppe B Kontrollgruppe. Deltakerne vil få 4 placebokapsler (kapsel 2) etter behandling med antibiotika på dag 7.

Gruppe B vil få FMT-kapsler (kapsler 1) som "redningsterapi" på dag 28. Gruppe A vil få placebo (kapsler 2) som beskrevet tidligere.

Kapslene (kapslene ved tidspunkt 1 og 2) administreres under tilsyn av forskerteamet. Kapslene svelges med juice. Deltakerne blir bedt om å være på en klar flytende diett i 8 timer før intervensjonen. Ingen fast føde bør tas innen to timer etter fordøyelse av kapslene. Ellers anses ingen restriksjoner på dietten som nødvendig. Under besøket blir deltakerne intervjuet og forsikret seg om at det ikke har oppstått tegn til infeksjon og at det ikke har vært vesentlige endringer i tarmfunksjonen.

Avføringsprøver vil bli samlet inn fra alle deltakere ukentlig fra dag 6 i 7 uker til dag 48 (totalt 7 prøver (3 ampuller/prøve)). Studieprøvene lagres i avføringsbeholdere i hjemmefryseren (-18°C) til de samles inn av studiepersonellet og oppbevares der ved -80°C. Calprotectin-prøver oppbevares i kjøleskap til de samles inn av studiepersonellet.

Deltakerne vil fylle ut et spørreskjema med spørsmål om eventuelle abdominale symptomer, avføringsfrekvens, avføringskonsistens, magesmerter, kvalme og annen brukt medisin ukentlig inntil 7 uker. Bruk av tilleggsantibiotika i oppfølgingsperioden fører til frafall. Deltakerne fullfører en livskvalitetsundersøkelse (HRQoL) på dag 1 (introduksjonen av antibiotika), på dag 7 når auto-FMT/placebo (første intervensjon) utføres, på dag 28 (andre intervensjon) og på slutten av følgende -up periode (dag 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Deltakere med feber, vannaktig diaré (> 3 løs avføring i løpet av 24 timer), blodig avføring, magesmerter og kramper) testes for C. difficile. Ved feber kontrolleres CRP-nivået og fullstendig blodtelling. Deltakere med blodig avføring vil bli ekskludert fra studien.

Det vil bli tatt blodprøver dag 7, 9, 28 og 30. 5mL blod samles (C-reaktivt protein, plasma).