Autoflor - 항생제 치료 후 장내 미생물군집을 복원하기 위한 동결건조 캡슐형 자가 FMT (FMT)

항생제 사용은 개인에게 단기 및 장기적 단점도 있습니다. 성인을 대상으로 한 실험에서, 항생제의 경구 섭취는 다양성을 감소시키고 구성을 변화시킬 뿐만 아니라 항생제 내성 유전자(AR)를 확산시킴으로써 장내 미생물군에 현저한 영향을 미치는 것으로 나타났습니다.

동결 건조된 FMT 제품은 캡슐화에 유용한 배설물 미생물군의 장기간 안정성을 유지합니다. 소화에 필요한 캡슐의 양도 신선하거나 냉동된 재료를 사용하는 것에 비해 훨씬 적습니다.

25%의 탈락을 예상하고 18~40세 사이의 건강한 성인 40명을 모집할 예정입니다. 모집 시 참가자의 염증 상태는 혈액 샘플을 채취하여 테스트됩니다. 참가자의 대변 샘플 100-150g을 얻습니다. 대변은 잠재적으로 유해한 병원균이 있는지 테스트됩니다.

수집된 대변 50g을 통과 후 6시간 이내에 처리하고 0.85% NaCl로 희석한 후 믹서를 사용하여 균질화합니다. 분변 현탁액은 생물학적 안전 캐비닛 아래에 있는 멸균된 금속 체를 통해 여과됩니다. 그런 다음 현탁액을 원심분리합니다. 그런 다음 상등액을 새로운 원심분리 튜브에 따라내고 원심분리합니다. 상부 박테리아 펠릿을 10% 트레할로스를 함유한 등장성 염화나트륨에 재현탁시켰습니다. 현탁액은 동결건조되기 전 최대 2주까지 -80°C에서 보관됩니다. 용액을 Lyoquest plus Ae85C(Telstar, Tarrasa, Spain)에서 44시간 동안 동결건조하고, 생성된 생성물을 하이프로멜로스 캡슐(크기 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, USA)에 캡슐화하고 4°C에서 보관합니다. 이 프로토콜은 캡슐화된 FMT를 사용한 이전 연구에서 적용됩니다. 각 캡슐에는 약 0.35g의 동결건조 대변 추출물이 함유되어 있습니다. 오보이 핫초코 파우더를 위약으로 사용했습니다.

30명의 참가자를 무작위로 배정하고 이중 맹검을 통해 각각 15명의 피험자로 구성된 두 그룹으로 나눴습니다. 모든 참가자에게는 아목시실린 + 클라불라네이트 875/125 mg × 2의 5일 과정(1~5일, 그림 1)이 제공됩니다.

그룹 A 개입 그룹. 참가자에게는 7일째 항생제 치료 후 배설물이 포함된 캡슐 4개(캡슐 1)가 제공됩니다.

그룹 B 대조군. 참가자에게는 7일차에 항생제 치료 후 위약 캡슐 4개(캡슐 2)가 제공됩니다.

그룹 B에는 28일에 "구조 요법"으로 FMT 캡슐(캡슐 1)이 제공됩니다. 그룹 A에는 앞서 설명한 대로 위약(캡슐 2)이 제공됩니다.

캡슐(시점 1 및 2의 캡슐)은 연구팀의 감독하에 투여됩니다. 캡슐은 주스와 함께 삼켜집니다. 참가자들은 개입 전 8시간 동안 투명한 유동식을 섭취하도록 요청받습니다. 캡슐을 소화한 후 2시간 이내에는 고형 음식을 섭취해서는 안 됩니다. 그렇지 않으면 다이어트에 대한 제한이 필요하지 않은 것으로 간주됩니다. 방문하는 동안 참가자들은 인터뷰를 통해 감염 징후가 발생하지 않았는지, 장 기능에 중대한 변화가 없는지 확인했습니다.

대변 ​​샘플은 6일부터 7주 동안 48일까지 매주 모든 참가자로부터 수집됩니다(총 7개 샘플(3바이알/샘플)). 연구 샘플은 연구 인력이 수집할 때까지 가정용 냉동고(-18°C)의 대변 수집 용기에 보관하고 이후에는 -80°C에 보관합니다. 칼프로텍틴 샘플은 연구 담당자가 수집할 때까지 냉장고에 보관됩니다.

참가자들은 7주까지 매주 복부 증상, 배변 빈도, 대변 일관성, 복통, 메스꺼움 및 기타 사용된 약물에 대한 질문을 포함한 설문지를 작성합니다. 추적 관찰 기간 동안 추가 항생제를 사용하면 탈락이 발생합니다. 참가자는 1일차(항생제 도입), 자동 FMT/위약(1차 개입)이 수행되는 7일차, 28일차(2차 개입) 및 후속 조치가 끝날 때 삶의 질(HRQoL) 설문조사를 완료합니다. -업 기간(48일)(http://www.15d-instrument.net/15d/).

발열, 장액성 설사(24시간 내에 3회 이상의 묽은 변), 혈변, 복통 및 경련이 있는 참가자는 C. difficile에 대한 검사를 받습니다. 발열이 있는 경우 CRP 수치와 전체 혈구수를 조절합니다. 혈변이 있는 참가자는 연구에서 제외됩니다.

혈액 샘플은 7, 9, 28, 30일에 채취됩니다. 5mL의 혈액을 채취합니다(C-반응성 단백질, 혈장).