Autoflor - FMT autológico capsulado liofilizado para restaurar o microbioma intestinal após tratamento com antibióticos (FMT)

O uso de antibióticos também traz desvantagens para o indivíduo a curto e longo prazo. Em ensaios com adultos humanos, foi demonstrado que a ingestão oral de antibióticos afeta significativamente a microbiota intestinal, reduzindo a diversidade e alterando a composição, bem como espalhando genes de resistência a antibióticos (AR).

Os produtos FMT liofilizados têm estabilidade duradoura da microbiota fecal, útil para encapsulamento. A quantidade de cápsulas necessárias para digerir também é muito menor em comparação com o uso de material fresco ou congelado.

Antecipando uma desistência de 25%, recrutaremos 40 adultos saudáveis ​​entre 18 e 40 anos de idade. O estado de inflamação dos participantes no recrutamento será testado através da coleta de sangue. É obtida uma amostra de 100-150g das fezes dos participantes. As fezes serão testadas para possíveis patógenos nocivos.

50g de fezes coletadas são processadas em até 6 horas após a passagem, diluídas em NaCl 0,85% e homogeneizadas em misturador. A suspensão fecal é filtrada através de peneiras metálicas esterilizadas sob cabine de segurança biológica. A suspensão é então centrifugada. O sobrenadante é então decantado para novos tubos de centrífuga e centrifugado. O pellet bacteriano superior é ressuspenso em cloreto de sódio isotônico com trealose a 10%. A suspensão é armazenada a -80°C até duas semanas antes de ser liofilizada. A solução é liofilizada em Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Tarrasa, Espanha) por 44 horas, e o produto resultante é encapsulado em cápsulas de hipromelose (tamanhos 0, Capsugel Enprotect, Cambridge, MA, EUA) e armazenado a 4°C. O protocolo é aplicado a partir de estudos anteriores com FMT encapsulado. Cada cápsula contém aproximadamente 0,35g de extrato de fezes liofilizado. O chocolate quente em pó O'boy é usado como placebo.

Os 30 participantes são randomizados e duplo-cegos em dois grupos, cada um com 15 sujeitos. Todos os participantes receberão um curso de 5 dias (Dias 1-5, Figura 1) de Amoxicilina + Clavulanato 875/125 mg × 2.

Grupo A Grupo de intervenção. Os participantes receberão 4 cápsulas contendo matéria fecal (Cápsula 1) após tratamento com antibióticos no dia 7.

Grupo B Grupo controle. Os participantes receberão 4 cápsulas de placebo (Cápsula 2) após o tratamento com antibióticos no dia 7.

O Grupo B receberá cápsulas de FMT (Cápsulas 1) como "terapia de resgate" no dia 28. O Grupo A receberá placebo (Cápsulas 2) conforme descrito anteriormente.

As cápsulas (cápsulas nos momentos 1 e 2) são administradas sob a supervisão da equipe de pesquisa. As cápsulas são engolidas com suco. Os participantes são solicitados a seguir uma dieta líquida clara por 8 horas antes da intervenção. Nenhum alimento sólido deve ser ingerido dentro de duas horas após a digestão das cápsulas. Caso contrário, nenhuma restrição à dieta será considerada necessária. Durante a visita, os participantes são entrevistados e assegurados de que não ocorreram sinais de infecção e que não houve alterações significativas na função intestinal.

Amostras fecais serão coletadas de todos os participantes semanalmente, começando no dia 6 por 7 semanas até o dia 48 (total de 7 amostras (3 frascos/amostra)). As amostras do estudo são armazenadas em recipientes para coleta de fezes no freezer doméstico (-18°C) até serem coletadas pela equipe do estudo e depois armazenadas a -80°C. As amostras de calprotectina são armazenadas na geladeira até serem coletadas pela equipe do estudo.

Os participantes preencherão um questionário incluindo perguntas sobre quaisquer sintomas abdominais, frequência de defecação, consistência das fezes, dor abdominal, náuseas e outros medicamentos usados ​​semanalmente até 7 semanas. O uso de antibióticos adicionais durante o período de acompanhamento leva ao abandono. Os participantes completam uma pesquisa de qualidade de vida (QVRS) no dia 1 (introdução de antibióticos), no dia 7, quando o auto-FMT/placebo (primeira intervenção) é realizado, no dia 28 (segunda intervenção) e no final do acompanhamento. período de atualização (dia 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Participantes com febre, diarreia aquosa (> 3 fezes moles em 24 horas), fezes com sangue, dor abdominal e cólicas) são testados para C. difficile. Em caso de febre, o nível de PCR e o hemograma completo são controlados. Os participantes com fezes com sangue serão excluídos do estudo.

Amostras de sangue serão coletadas nos dias 7, 9, 28 e 30. São coletados 5mL de sangue (proteína C reativa, plasma).