Аутофлор ​​- лиофилизированный капсулированный аутологический FMT для восстановления микробиома кишечника после лечения антибиотиками (FMT)

Использование антибиотиков также имеет краткосрочные и долгосрочные недостатки для человека. В исследованиях на взрослых людях было показано, что пероральный прием антибиотиков заметно влияет на микробиоту кишечника за счет уменьшения разнообразия и изменения состава, а также за счет распространения генов устойчивости к антибиотикам (AR).

Лиофилизированные продукты FMT обладают длительной стабильностью фекальной микробиоты, полезной для инкапсуляции. Количество капсул, необходимых для переваривания, также намного меньше по сравнению с использованием свежего или замороженного материала.

Ожидая 25% отсева, мы наймем 40 здоровых взрослых в возрасте от 18 до 40 лет. Состояние воспаления участников при наборе будет проверено путем взятия образцов крови. Берут образец фекалий участников весом 100-150 г. Фекалии будут проверены на наличие потенциальных вредных патогенов.

50 г собранного стула обрабатывают в течение 6 ч пассажа, разводят 0,85% NaCl, гомогенизируют с помощью миксера. Фекальную суспензию фильтруют через стерилизованные металлические сита под боксом биологической безопасности. Затем суспензию центрифугируют. Затем супернатант декантируют в новые центрифужные пробирки и центрифугируют. Верхний бактериальный осадок ресуспендируют в изотоническом растворе хлорида натрия с 10% трегалозы. Суспензию хранят при -80°C до двух недель перед лиофилизацией. Раствор лиофилизируют в аппарате Lyoquest plus Ae85C (Telstar, Тарраса, Испания) в течение 44 часов, полученный продукт инкапсулируют в капсулы из гипромеллозы (размер 0, Capsugel Enprotect, Кембридж, Массачусетс, США) и хранят при 4°C. Протокол применяется из предыдущих исследований с капсулированной FMT. Каждая капсула содержит примерно 0,35 г лиофилизированного экстракта стула. Порошок горячего шоколада O'boy используется в качестве плацебо.

30 участников были рандомизированы и разделены двойным слепым методом на две группы по 15 человек в каждой. Всем участникам будет назначен 5-дневный (день 1-5, рисунок 1) курс амоксициллина + клавуланата 875/125 мг × 2.

Группа А. Группа вмешательства. Участникам будут предоставлены 4 капсулы, содержащие фекалии (Капсула 1), после лечения антибиотиками на 7-й день.

Группа Б. Контрольная группа. Участникам будут предоставлены 4 капсулы плацебо (капсула 2) после лечения антибиотиками на 7-й день.

Группе B будут назначены капсулы FMT (Капсулы 1) в качестве «спасительной терапии» на 28-й день. Группе А будет назначено плацебо (капсулы 2), как описано ранее.

Капсулы (капсулы в моменты времени 1 и 2) вводятся под наблюдением исследовательской группы. Капсулы проглатывают с соком. Участников просят соблюдать прозрачную жидкую диету в течение 8 часов до вмешательства. В течение двух часов после переваривания капсул нельзя принимать твердую пищу. В противном случае никакие ограничения в рационе не считаются необходимыми. Во время визита участников опрашивают и убеждаются в отсутствии признаков инфекции и существенных изменений в функции кишечника.

Образцы фекалий будут собираться у всех участников еженедельно, начиная с 6-го дня в течение 7 недель до 48-го дня (всего 7 образцов (3 флакона на образец)). Образцы исследования хранятся в контейнерах для сбора стула в домашней морозильной камере (-18°C) до тех пор, пока их не заберет исследовательский персонал, а затем хранят там при -80°C. Образцы кальпротектина хранятся в холодильнике до тех пор, пока их не заберет исследовательский персонал.

Участники будут заполнять анкету, включающую вопросы о любых симптомах со стороны живота, частоте дефекации, консистенции стула, боли в животе, тошноте и других используемых лекарствах еженедельно до 7 недель. Использование дополнительных антибиотиков в течение периода наблюдения приводит к выбыванию из исследования. Участники проходят исследование качества жизни (HRQoL) в первый день (введение антибиотиков), в день 7, когда проводится ауто-ТФМ/плацебо (первое вмешательство), на 28 день (второе вмешательство) и в конце последующего лечения. период подъема (день 48) (http://www.15d-instrument.net/15d/).

Участники с лихорадкой, водянистой диареей (> 3 случаев жидкого стула в течение 24 часов), кровавым стулом, болью в животе и спазмами проверяются на C. difficile. При лихорадке контролируют уровень СРБ и общий анализ крови. Участники с кровавым стулом будут исключены из исследования.

Образцы крови будут взяты на 7, 9, 28 и 30 дни. Собирают 5 мл крови (С-реактивный белок, плазма).