Gewebestudie bei Patienten, die sich einer CAR-T-Zelltherapie unterziehen (CAR_21_01) (CAR_21_01)

Die „CAR-T“-Immuntherapie („Chimeric Antigen Receptor T cell therapys“) ist eine Therapie, die auf T-Zellen basiert, die einen chemischen Rezeptor für ein spezifisches Antigen exprimieren, das für Patienten mit einigen Arten von onkohämatologischen Pathologien indiziert ist, die auf andere Behandlungsformen nicht angesprochen haben. wie: rezidivierende oder refraktäre Non-Hodgkin-Lymphome, einschließlich diffuses großzelliges B-Zell-Lymphom, primäres B-Zell-Mediastinal-Lymphom, transformiertes follikuläres Lymphom, Mantelzell-Lymphom, akute lymphoblastische Leukämie, bei Kindern und jungen Erwachsenen (< 26 Jahre) und multiple Myelom. Diese Therapie ist ein absolut innovativer Ansatz, der aus einer personalisierten Immuntherapie mit lebenden Zellen besteht, die das Immunsystem des Empfängerpatienten modifiziert, um es in die Lage zu versetzen, die neoplastischen Zellen zu erkennen und auszurotten, die das Antigen exprimieren, für das die Zellen manipuliert wurden. Die CAR-T-Therapie verwendet spezifische Immunzellen (T-Lymphozyten) des Patienten, die aus seinem peripheren Blut isoliert, durch die Integration von genetischem Material, das den chimären Rezeptor kodiert, verändert, in vitro expandiert und dann wieder infundiert werden, um die Reaktion des Immunsystems gegen die zu aktivieren Krankheit.

Dieser Ansatz hat mehrere biologische Vorteile:

1. um den Patienten mit "umprogrammierten T-Zellen" mit einem neuen und spezifischen Aktivierungsmechanismus zu versorgen;
2. Überwindung der Immuntoleranz gegenüber Krebszellen;
3. Umgehung von HLA-vermittelten Antigenerkennungs-Restriktionsmechanismen; Die CAR-T-Therapien, die in der Europäischen Union und in Italien die Marktzulassung (AIC) erhalten haben, sind: das Medikament Kymriah, das Medikament Yescarta.

Die therapeutischen Indikationen, für die sie zugelassen sind, sind:

• Kymriah (Tisagenlecleucel): pädiatrische und junge erwachsene Patienten bis 25 Jahre mit akuter lymphoblastischer B-Zell-Leukämie, die nie auf eine Chemotherapie angesprochen haben oder die nach einer allogenen hämatopoetischen Stammzelltransplantation oder nach mindestens 2-Linien-Chemotherapie einen Rückfall erlitten haben; Patienten mit diffusem großzelligem B-Zell-Lymphom oder DLBCL, die sich bereits mindestens 2 systemischen Therapielinien unterzogen haben;
• Yescarta (Axicabtagen-Ciloleucel): Patienten mit diffusem großzelligem B-Zell-Lymphom oder DLBCL, primär mediastinalem B-Zell-Lymphom oder PMBCL, die bereits mindestens 2 Linien einer systemischen Therapie erhalten haben. CAR-T-Therapien stellen eine wichtige therapeutische Option für die oben aufgeführten lymphoproliferativen Erkrankungen dar und wurden bei Patienten untersucht, bei denen sich bisherige Standardstrategien (Chemotherapie und hämatopoetische Stammzelltransplantation) nicht bewährt haben.

Obwohl sie eine effektive letzte Therapieoption bei Patienten mit fortgeschrittener Erkrankung und Resistenz gegen herkömmliche Chemotherapielinien darstellen, ist der Einsatz von CAR-T-Therapien nicht ohne schwerwiegende Komplikationen, ganz im Gegenteil. Insbesondere gibt es:

• Zytokinfreisetzungssyndrom (CRS);
• Reduktion von B-Lymphozyten (Hypogammaglobulinämie);
• Neurologische Nebenwirkungen;

Das Verständnis der Determinanten der massiven Entzündungsreaktion, die der Toxizität der CAR-T-Therapie zugrunde liegen, bleibt weitgehend unklar. Es ist eine gemeinsame Meinung in der medizinisch-wissenschaftlichen Gemeinschaft, dass das, was als „Zielwirkung“ von CAR-Zellen auf Ziel-Tumorzellen und die daraus resultierende Immunantwort definiert wird, einer der Faktoren ist, die eine massive entzündungsfördernde Zytokinreaktion auslösen, aber die zugrunde liegenden Mechanismen, die die Behandlung vorhersagen und personalisieren oder sogar verhindern können, sind noch nicht definiert. Es wird die Hypothese aufgestellt, und in dieser Hinsicht stehen bereits mehrere Studien zur Verfügung, dass die Zusammensetzung und das Verhältnis der Leukozytenpopulationen (unter anderem CD4 und CD8), die für die Produktion von CAR-T verwendet werden, das klinische Ergebnis des Patienten beeinflussen können. Insbesondere die Proliferation und Persistenz von CAR-Zellen im Patienten sind Schlüsselfaktoren für die Wirksamkeit der Therapie selbst. Daher die Notwendigkeit, die verschiedenen Zelluntergruppen sowohl in der CD3 + CAR + -Population als auch in der CD3 + CAR-Population im klinischen Verlauf des Patienten zu charakterisieren. Es ist auch von grundlegender Bedeutung, den epigenetischen Status der Lymphozytenpopulationen selbst sowie das damit verbundene biologische Alter des Patienten zu untersuchen. Es ist in der Tat ein Element, von dem angenommen wird, dass es eine grundlegende Rolle bei der klinischen Reaktion spielt. Tatsächlich ist die Bewertung des biologischen Alters eines Subjekts ein Index, der sich aus molekularen Markern (wie dem epigenetischen Status kernhaltiger Zellen) zusammensetzt, die stark mit dem chronologischen Alter korrelieren, aber in der Lage sind, die Alterungsgeschwindigkeit des einzelnen Individuums auszudrücken. sowie der Zellen seines Immunsystems und somit in der Lage, stärker als das chronologische Alter die mit der Therapie verbundenen gesundheitlichen Risiken und seinen Entzündungszustand aufzuzeigen. Ein weiteres zu berücksichtigendes Element im Gesamtbild, das wir betrachten, ist die Rolle, die microRNAs (miRNAs) als entscheidende Regulatoren des Überlebens, der Differenzierung und der Funktion von T-Zellen spielen, die alle Schlüsselfaktoren sind, die das Ergebnis der Immuntherapie beeinflussen. adoptiv basierend auf CAR-Zellen. MicroRNAs sind kurze RNA-Stränge mit einer regulatorischen Funktion der zellulären Genexpression, insbesondere bei der Modulation von Entzündungen. Aus diesem Grund ist ihre Untersuchung in dem von uns betrachteten Kontext von vorrangiger Bedeutung.

Unter diesen Prämissen sind die primären Ziele der Studie die folgenden:

1. Untersuchung der Epigenetik in peripheren Blutproben von Patienten, die sich einer CAR-T-Therapie unterziehen. Insbesondere wird die epigenetische Analyse in der zirkulierenden Leukozyten- und extrazellulären Fraktion durchgeführt, die in den Plasma-Nanovesikeln enthalten ist, um das Epigenom und seine Korrelation mit dem klinischen Ergebnis der Patienten zu bestimmen;
2. Untersuchung von microRNAs, die aus extrazellulären Vesikeln und Leukozyten von Patienten extrahiert wurden, die sich einer CAR-T-Therapie unterziehen, um die Spiegel mit dem klinischen Ergebnis der Patienten zu korrelieren;
3. Untersuchung von Lymphozyten- und myeloiden Populationen bei hämatologischen Patienten PRE- und POST-CAR-T-Zellinfusionen, um die Spiegel mit dem klinischen Ergebnis der Patienten zu korrelieren; Um diese Ziele zu verfolgen, wird eine monozentrische und explorative Studie gestartet, die die Verwendung von menschlichem Gewebe in vitro, in diesem Fall Blut, bei Patienten beinhaltet, die einer Infusion von CAR-T-Zellen unterzogen wurden. Die Studie wird allen Patienten angeboten, die sich einer CAR-T-Zellinfusion im Advanced Cell Therapy Program des IRCCS University Hospital of Bologna unterziehen. Die Studie wird voraussichtlich 5 Jahre dauern und 35 Patienten pro Jahr aufnehmen. Die Analyse der Proben wird kostenlos in den Labors von Prof. Massimiliano Bonafè, Mitautor der Studie, durchgeführt.

Periphere Blutproben werden zur Durchführung der Studie verwendet und zu folgenden Zeiten entnommen:

• zur Apherese;
• beim Betreten der Station;
• am Tag -1;
• am Tag 0 (2 Stunden nach der Infusion);
• pro Tag +1, +3, +5, +7, +9, +11, +13, +30, +90, +180, +365;

Die Entnahme von Geweben stimmt mit der Entnahme überein, die den aktuellen Standard in der klinischen Routinepraxis beim transplantierten Patienten darstellt; Daher werden die Proben so gewonnen, dass die normalen diagnostischen Hilfsverfahren nicht außer Kraft gesetzt werden. Die Ergebnisse dieser Studie werden sich auf die klinische Versorgung von vorrangiger Bedeutung auswirken und darauf abzielen, die Komplikationen der CAR-T-Therapie zu bewältigen und die ihnen zugrunde liegenden biologischen Mechanismen zu verstehen.