Vævsundersøgelse hos patienter, der gennemgår CAR-T-celleterapi (CAR_21_01) (CAR_21_01)

"CAR-T"-immunterapien ("Kimeriske antigenreceptor-T-celleterapier") er en terapi baseret på T-celler, der udtrykker en kemisk receptor for et specifikt antigen, indiceret til patienter med nogle typer onkohæmatologiske patologier, som ikke har reageret på andre former for behandling. såsom: recidiverende eller refraktære non-Hodgkins lymfomer, inklusive diffust storcellet B-celle lymfom, primært B-celle mediastinalt lymfom, transformeret follikulært lymfom, kappecellelymfom, akut lymfoblastisk leukæmi, hos børn og unge voksne (<26 år) og multiple myelom. Denne terapi er en absolut innovativ tilgang, som består af en personlig levende celle immunterapi, der modificerer modtagerpatientens immunsystem for at gøre det i stand til at genkende og udrydde de neoplastiske celler, der udtrykker antigenet, som cellerne er blevet konstrueret mod. CAR-T-terapi bruger specifikke immunceller (T-lymfocytter) fra patienten, isoleret fra hans perifere blod, konstrueret gennem integration af genetisk materiale, der koder for den kimære receptor, udvidet in vitro og derefter geninfunderet for at aktivere immunsystemets respons mod sygdom.

Denne tilgang har flere biologiske fordele:

1. at forsyne patienten med "omprogrammerede T-celler" med en ny og specifik aktiveringsmekanisme;
2. overvinde immuntolerance over for cancerceller;
3. omgåelse af HLA-medierede antigengenkendelsesrestriktionsmekanismer; De CAR-T-behandlinger, der har opnået markedsføringstilladelsen (AIC) i EU og i Italien er: lægemidlet Kymriah, lægemidlet Yescarta.

De terapeutiske indikationer, som de er godkendt til, er:

• Kymriah (tisagenlecleucel): pædiatriske og unge voksne patienter op til 25 år med B-celle akut lymfoblastisk leukæmi, som aldrig har reageret på kemoterapi, eller som har fået tilbagefald efter allogen hæmatopoietisk stamcelletransplantation eller efter mindst 2 linier kemoterapi; patienter med diffust storcellet B-celle lymfom eller DLBCL, som allerede har gennemgået mindst 2 linjer med systemisk terapi;
• Yescarta (axicabtagene ciloleucel): patienter med diffust storcellet B-celle lymfom eller DLBCL, primært mediastinalt B-celle lymfom eller PMBCL, som allerede har modtaget mindst 2 linjer med systemisk behandling. CAR-T-terapier repræsenterer en vigtig terapeutisk mulighed for de ovenfor anførte lymfoproliferative sygdomme og er blevet undersøgt hos patienter, hvor tidligere standardstrategier (kemoterapi og hæmatopoietisk stamcelletransplantation) ikke har vist sig effektive.

Selvom de repræsenterer en effektiv sidste terapeutiske mulighed hos patienter med fremskreden sygdom og resistente over for traditionelle kemoterapilinjer, er brugen af ​​CAR-T-terapier ikke uden alvorlige komplikationer, tværtimod. Der er især:

• Cytokinfrigivelsessyndrom (CRS);
• Reduktion af B-lymfocytter (hypogammaglobulinæmi);
• Neurologiske bivirkninger;

Forståelse af determinanterne for den massive inflammatoriske respons, der ligger til grund for toksiciteten af ​​CAR-T-terapi, er fortsat stort set uklar. Det er en fælles opfattelse i det medicinsk-videnskabelige samfund, at det, der defineres som "måleffekten" af CAR-celler på måltumorceller, og det deraf følgende immunrespons, er en af ​​de faktorer, der udløser en massiv pro-inflammatorisk cytokinreaktion, men de mekanismer, der er grundlaget, og at de kan forudsige og personalisere behandlingen, eller endda forhindre den, er endnu ikke defineret. Det antages, og flere undersøgelser er begyndt at være tilgængelige i denne henseende, at sammensætningen og forholdet mellem leukocytpopulationer (CD4 og CD8 blandt andre), der anvendes til produktion af CAR T, kan påvirke det kliniske resultat hos patienten. Især spredningen og persistensen af ​​CAR-celler i patienten er nøglefaktorer for at bestemme effektiviteten af ​​selve behandlingen. Derfor er det nødvendigt at karakterisere de forskellige celleundergrupper både i CD3+CAR+-populationen og i CD3+CAR-populationen i patientens kliniske forløb. Det er også fundamentalt at studere den epigenetiske status af selve lymfocytpopulationerne, såvel som den biologiske alder af den patient, der er forbundet med den. Det er faktisk et element, der menes at spille en grundlæggende rolle i den kliniske respons. Faktisk er vurderingen af ​​den biologiske alder af et individ et indeks sammensat af molekylære markører (såsom den epigenetiske status af kerneholdige celler), stærkt korreleret med den kronologiske alder, men i stand til at udtrykke ældningshastigheden for det enkelte individ, såvel som af cellerne i hans immunsystem, og er følgelig i stand til med større vægt end den kronologiske alder at fremhæve sundhedsrisiciene forbundet med terapien og hans betændelsestilstand. Et yderligere element at overveje i det overordnede billede, vi overvejer, er den rolle, som mikroRNA'er (miRNA'er) spiller som afgørende regulatorer af T-cellernes overlevelse, differentiering og funktion, som alle er nøglefaktorer, der påvirker resultatet af immunterapi. adoptiv baseret på CAR-celler. MikroRNA'er er korte RNA-strenge med en regulerende funktion af cellulær genekspression, især ved modulering af inflammation. Af denne grund er studiet af dem i den sammenhæng, vi overvejer, af primær betydning.

På baggrund af disse præmisser er de primære mål for undersøgelsen følgende:

1. Undersøgelse af epigenetik i perifere blodprøver taget fra patienter, der gennemgår CAR-T-behandling. Især vil den epigenetiske analyse blive udført i den cirkulerende leukocyt og den ekstracellulære fraktion indeholdt i plasma nanovesiklerne for at bestemme epigenomet og dets korrelation med det kliniske resultat af patienterne;
2. Undersøgelse af mikroRNA'er ekstraheret fra ekstracellulære vesikler og leukocytter fra patienter, der gennemgår CAR-T-terapi for at korrelere niveauerne med det kliniske resultat af patienter;
3. Undersøgelse af lymfocyt- og myeloidpopulationer i den hæmatologiske patient PRE og POST CAR-T celleinfusion for at korrelere niveauerne med patienternes kliniske resultat; For at forfølge disse mål vil der blive lanceret en monocentrisk og eksplorativ undersøgelse, som involverer brugen af ​​humant væv in vitro, i dette tilfælde blod, hos patienter, der er udsat for infusion af CAR-T-celler. Undersøgelsen vil blive tilbudt alle patienter, der gennemgår CAR-T-celleinfusion ved Advanced Cell Therapy Program på IRCCS Universitetshospital i Bologna. Studiet forventes at vare 5 år med en indskrivning på 35 patienter om året. Analysen af ​​prøverne vil blive udført i laboratorierne af Prof Massimiliano Bonafè, medforfatter af undersøgelsen, gratis.

Perifere blodprøver vil blive brugt til at udføre undersøgelsen og vil blive taget på følgende tidspunkter:

• til aferese;
• ved indtræden i afdelingen;
• på dag -1;
• på dag 0 (2 timer efter infusion);
• pr. dag +1, +3, +5, +7, +9, +11, +13, +30, +90, +180, +365;

Prøveudtagningen af ​​væv falder sammen med prøveudtagningen, der repræsenterer den nuværende standard i rutinemæssig klinisk praksis hos den transplanterede patient; derfor vil prøverne blive indhentet under hensyntagen til ikke at ugyldiggøre de normale procedurer for diagnosticering. Resultaterne af denne undersøgelse vil have en klinisk plejepåvirkning af primær betydning rettet mod at håndtere komplikationerne ved CAR-T-terapi og på at forstå de biologiske mekanismer, der ligger til grund for dem.