Vevsstudie hos pasienter som gjennomgår CAR-T-celleterapi (CAR_21_01) (CAR_21_01)

"CAR-T" immunterapi ("Kimeriske antigenreseptor-T-celleterapier") er en terapi basert på T-celler som uttrykker en kjemisk reseptor for et spesifikt antigen indisert for pasienter med noen typer onkohematologiske patologier som ikke har respondert på andre former for behandling, slik som: residiverende eller refraktære non-Hodgkins lymfomer, inkludert diffust storcellet B-celle lymfom, primært B-celle mediastinalt lymfom, transformert follikulært lymfom, mantelcellelymfom, akutt lymfoblastisk leukemi, hos barn og unge voksne (<26 år) og multiple myelom. Denne terapien er en helt nyskapende tilnærming som består av en personlig tilpasset levende celle immunterapi som modifiserer mottakerpasientens immunsystem for å gjøre det i stand til å gjenkjenne og utrydde neoplastiske celler som uttrykker antigenet som cellene er konstruert mot. CAR-T-terapi bruker spesifikke immunceller (T-lymfocytter) fra pasienten, isolert fra hans perifere blod, konstruert gjennom integrering av genetisk materiale som koder for den kimære reseptoren, utvidet in vitro og deretter re-infundert for å aktivere immunsystemets respons mot sykdom.

Denne tilnærmingen har flere biologiske fordeler:

1. å forsyne pasienten med «omprogrammerte T-celler» med en ny og spesifikk aktiveringsmekanisme;
2. overvinne immuntoleranse mot kreftceller;
3. omgå HLA-mediert antigengjenkjenningsbegrensningsmekanismer; CAR-T-terapiene som har oppnådd markedsføringstillatelsen (AIC) i EU og i Italia er: stoffet Kymriah, stoffet Yescarta.

De terapeutiske indikasjonene de er godkjent for er:

• Kymriah (tisagenlecleucel): pediatriske og unge voksne pasienter opptil 25 år med B-celle akutt lymfoblastisk leukemi som aldri har respondert på kjemoterapi, eller som har fått tilbakefall etter allogen hematopoetisk stamcelletransplantasjon eller etter minst 2 linjers kjemoterapi; pasienter med diffust stort B-celle lymfom eller DLBCL som allerede har gjennomgått minst 2 linjer med systemisk terapi;
• Yescarta (axicabtagene ciloleucel): pasienter med diffust stort B-celle lymfom eller DLBCL, primært mediastinalt B-celle lymfom eller PMBCL som allerede har fått minst 2 linjer med systemisk terapi. CAR-T-terapier representerer et viktig terapeutisk alternativ for de lymfoproliferative sykdommene som er oppført ovenfor og har blitt studert hos pasienter hvor tidligere standardstrategier (kjemoterapi og hematopoetisk stamcelletransplantasjon) ikke har vist seg effektive.

Selv om de representerer et effektivt siste terapeutiske alternativ hos pasienter med avansert sykdom og motstandsdyktige mot tradisjonelle kjemoterapilinjer, er ikke bruken av CAR-T-terapier uten alvorlige komplikasjoner, snarere tvert imot. Spesielt er det:

• Cytokinfrigjøringssyndrom (CRS);
• Reduksjon av B-lymfocytter (hypogammaglobulinemi);
• Nevrologiske bivirkninger;

Forståelsen av determinantene for den massive inflammatoriske responsen som ligger til grunn for toksisiteten til CAR-T-terapi er fortsatt stort sett uklar. Det er en delt oppfatning i det medisinsk-vitenskapelige miljøet at det som defineres som "måleffekten" av CAR-celler på måltumorceller, og den påfølgende immunresponsen, er en av faktorene som utløser en massiv pro-inflammatorisk cytokinreaksjon, men mekanismene som er grunnlaget og at de kan forutsi og personalisere behandlingen, eller til og med forhindre den, er ennå ikke definert. Det er antatt, og flere studier begynner å være tilgjengelige i denne forbindelse, at sammensetningen og forholdet mellom leukocyttpopulasjoner (CD4 og CD8 blant andre) brukt for produksjon av CAR T kan påvirke det kliniske resultatet hos pasienten. Spesielt spredning og persistens av CAR-celler i pasienten er nøkkelfaktorer for å bestemme effektiviteten av selve behandlingen. Derav behovet for å karakterisere de ulike celleundergruppene både i CD3+CAR+-populasjonen og i CD3+CAR-populasjonen i pasientens kliniske forløp. Det er også grunnleggende å studere den epigenetiske statusen til selve lymfocyttpopulasjonene, samt den biologiske alderen til pasienten knyttet til den. Det er faktisk et element som antas å spille en grunnleggende rolle i den kliniske responsen. Faktisk er vurderingen av den biologiske alderen til et individ en indeks sammensatt av molekylære markører (som den epigenetiske statusen til kjerneholdige celler), sterkt korrelert med den kronologiske alderen, men som er i stand til å uttrykke aldringshastigheten til enkeltindividet, så vel som av cellene i immunsystemet hans, og er følgelig i stand til å fremheve med større vekt enn den kronologiske alderen helserisikoen forbundet med terapien og hans inflammatoriske tilstand. Et ytterligere element å vurdere i det overordnede bildet vi vurderer er rollen som mikroRNA (miRNA) spiller som avgjørende regulatorer for T-celleoverlevelse, differensiering og funksjon, som alle er nøkkelfaktorer som påvirker resultatet av immunterapi. adoptiv basert på CAR-celler. MikroRNA er korte RNA-tråder med en regulerende funksjon av cellulært genuttrykk, spesielt ved modulering av betennelse. Av denne grunn er studiet av dem i konteksten vi vurderer av primær betydning.

Gitt disse premissene er hovedmålene med studien følgende:

1. Studie av epigenetikk i perifere blodprøver tatt fra pasienter som gjennomgår CAR-T-behandling. Spesielt vil den epigenetiske analysen utføres i den sirkulerende leukocytten og den ekstracellulære fraksjonen som finnes i plasma nanovesiklene for å bestemme epigenomet og dets korrelasjon med det kliniske resultatet til pasientene;
2. Studie av mikroRNA ekstrahert fra ekstracellulære vesikler og leukocytter fra pasienter som gjennomgår CAR-T-terapi for å korrelere nivåene med det kliniske resultatet til pasienter;
3. Studie av lymfocytt- og myeloidpopulasjoner i den hematologiske pasienten PRE og POST CAR-T celleinfusjon for å korrelere nivåene med det kliniske resultatet til pasientene; For å forfølge disse målene vil en monosentrisk og utforskende studie bli lansert, som involverer bruk av humant vev in vitro, i dette tilfellet blod, hos pasienter som er utsatt for infusjon av CAR-T-celler. Studien vil bli tilbudt alle pasienter som gjennomgår CAR-T-celleinfusjon ved Advanced Cell Therapy Program ved IRCCS University Hospital of Bologna. Studien forventes å vare i 5 år med en innrullering av 35 pasienter per år. Analysen av prøvene vil bli utført i laboratoriene til prof Massimiliano Bonafè, medforfatter av studien, gratis.

Perifere blodprøver vil bli brukt til å utføre studien og vil bli tatt på følgende tidspunkter:

• til aferese;
• ved innreise i avdelingen;
• på dag -1;
• på dag 0 (2 timer etter infusjon);
• per dag +1, +3, +5, +7, +9, +11, +13, +30, +90, +180, +365;

Prøvetakingen av vev faller sammen med prøvetakingen som representerer gjeldende standard i rutinemessig klinisk praksis hos den transplanterte pasienten; Derfor vil prøvene innhentes med forsiktighet for ikke å ugyldiggjøre de normale prosedyrene for diagnostikkhjelp. Resultatene av denne studien vil ha en klinisk behandlingseffekt av primær betydning rettet mot å håndtere komplikasjoner av CAR-T-terapi og på å forstå de biologiske mekanismene som ligger til grunn for dem.