Suche nach Methoden zur Vorhersage der Entwicklung einer Herzinsuffizienz nach Myokardinfarkt (PHFMI)

Die Patienten wurden auf der Grundlage des regionalen Gefäßzentrums (RVC) der 1. kardiologischen Abteilung für Myokardinfarktpatienten der staatlichen Haushaltsanstalt für Gesundheit des Gebiets Nowosibirsk "City Clinical Hospital" (SBUZ NSO GKB) № 1 von Nowosibirsk rekrutiert. Gemäß dem Design gab es drei Punkte in der Studie: Nullpunkt - der erste Tag des Krankenhausaufenthalts des Patienten im Krankenhaus; der erste Punkt – Tag 30 der MI-Entwicklung; der zweite Punkt - 12 Monate ab dem Zeitpunkt der AMI-Entwicklung. In allen Phasen der Studie führten wir die Untersuchungen durch, die der Versorgungsstandard für Patienten mit akutem Myokardinfarkt, die klinischen Leitlinien und das Dissertationsforschungsprotokoll vorschreiben: klinischer Zustand des Patienten (Beurteilung der Beschwerden, objektive Untersuchung), Laboruntersuchungen (Gesamtblutbild (TBC), Gesamturinanalyse (UPE), biochemische Blutanalyse (BX), instrumentelle Untersuchungen (EKG, Röntgen-Thorax (RGCT)). Koronarographie gefolgt von perkutaner Koronarintervention (PCI), EchoCG und Bestimmung molekulargenetischer Marker wurden ebenfalls im Stadium 0 durchgeführt. In jedem Stadium wurde bei Vorliegen von Herzrhythmus- und Leitungsstörungen eine Holter-Elektrokardiographie-Überwachung (HM-EKG) durchgeführt; und am 1. und 2. Punkt wurde ein 6-Minuten-Gehtest durchgeführt.

Die Überprüfung der Diagnose von AMI wurde gemäß den Kriterien der vierten universellen Definition des Myokardinfarkts durchgeführt, die die Meinung von Experten der World Heart Federation (WHF), der American Heart Association (AHA), des American College of Cardiology (ACC) zusammenfasst. und Europäische Gesellschaft für Kardiologie (EOC, ESC) (2018). Die Dissertationsarbeit umfasste Patienten, die die Kriterien für einen akuten Typ-1-MI erfüllten, was erhöhte kardiale Troponinspiegel über dem 99. Perzentil des oberen Referenzwerts umfasste, in Kombination mit mindestens einem zusätzlichen Merkmal: 1) ein charakteristisches klinisches Bild einer akuten myokardialen Ischämie ; 2) neue EKG-Veränderungen, die auf Ischämie hindeuten; 3) eine pathologische Q-Zacke im EKG; 4) bildgebende Befunde, die neue Bereiche myokardialer Ischämie bestätigen; und 5) Vorhandensein von infarktbedingter Arterienthrombose (ICA) auf CAG. Die Verifizierung der Diagnose einer akuten und chronischen Herzinsuffizienz (OSF, CHF) erfolgte auf Basis klinischer Empfehlungen der European Society of Cardiology (EOC, ESC) (2016, 2021), kombinierter Empfehlungen der Society of Heart Failure Specialists ( SHF), Russische Gesellschaft für Kardiologie (RSC) und Russische Wissenschaftliche Medizinische Gesellschaft der Ärzte (RSMOT) (2018). Die Klassifikation der CHF nach Krankheitsstadien (Strazhesko-Vasilenko, 1935) und linksventrikulärer Ejektionsfraktion (LVEF) wurde verwendet, außerdem wurde die Herzinsuffizienzklassifikation der New York Heart Association (NYHA, 1964) zur Beurteilung verwendet Schwere der Symptome. Wir verwendeten die Killip-Klassifikation der akuten Herzinsuffizienz.

Instrumentelle Untersuchungsmethoden Das EKG wurde in 12 Ableitungen (6 Standard- und 6 Thoraxableitungen) unter Verwendung von "Megacart-400" (Siemens) in den ersten Minuten der Krankenhausaufnahme, dann einmal täglich bis zur Bildung einer subakuten STEMI-Periode und dann einmal alle aufgezeichnet 3 Tage. Die Echokardiographie wurde bei der Aufnahme ins Krankenhaus am 30. Tag nach der Entwicklung des MI und 1 Jahr später auf einem Phillips ie33-Gerät (Philips Ultrasound, USA) aus der Standardposition auf der linken Seite des Patienten mit einem 2 -4 MHz Ultraschall-Matrix-Schallkopf. Die Technik wurde im M- und B-Modus, Pulswellen-, Dauerstrich-Doppler, Farb-Doppler-Mapping, Gewebe-Doppler und Farb-Doppler-M-Modus (Farb-M-Modus) durchgeführt. Folgende Parameter wurden bestimmt: PV - Auswurffraktion (Simpson, 1989. ), FV – enddiastolisches Volumen, CSV – endsystolisches Volumen, ESR – endsystolische Größe, CDD – enddiastolische Größe, FDi – enddiastolischer Index, CSI – endsystolischer Index, DLA – mittlerer Lungenarteriendruck, FDD – enddiastolischer Druck , SW – Schlagvolumen, MM – myokardiale Masse, IMM – myokardialer Massenindex, LP – linker Vorhof, RAP – rechter Vorhof, RV – rechter Ventrikel, VIR – isovolumische Relaxationszeit, E – LV frühdiastolische Füllrate, A – linker Ventrikel spätdiastolische Füllungsrate, E/A – Verhältnis von frühem und spätem Transmissionsfluss, DT – Zeit der Verlangsamung der frühdiastolischen Füllung, AT – Zeit der Beschleunigung der frühdiastolischen Füllung, ET – Ejektionsperiode, Em – myokardiale frühdiastolische Bewegungsrate, Am – Geschwindigkeit der spätdiastolischen Myokardbewegung, Em/Am - Verhältnis der Geschwindigkeiten der früh- und spätdiastolischen Myokardbewegung, E/e' - Verhältnis des E-Wellen-Blutflusses auf der Mitralklappe zur E'-Welle (Verhältnis der frühen Mitralklappenringbewegung ), Lungenvenen-S-Blutfluss, Lungenvenen-D-Blutfluss, dE und dA – Param ter der Dauer der frühen diastolischen Füllung, IVCT – isovolumische Zeit der RV-Kontraktion, Sfcmc – Mitralklappen-Faserringgeschwindigkeit, VpvA – maximale diastolische retrograde Flussgeschwindigkeit, SRMP – frühe Mitralflussgeschwindigkeit, diastolische Steifigkeit, Tei-Index – Summe der isovolumetrischen Kontraktion und isovolumetrische Relaxationszeiten dividiert durch ventrikuläre Ejektionszeit, Em/SRMP – Verhältnis der frühdiastolischen transkuspidalen Strömungsgeschwindigkeit zu ihrer Ausbreitungsrate. Die linksventrikuläre Ejektionsfraktion (LVEF) wurde unter Verwendung der Formel berechnet: LVEF = (QDO – QSO/QDO) 100 % (gemäß der Methode von Simpson). Das Vorhandensein und der Grad der Dyskinesie von Nekrosezonen und Narbenveränderungen, Aneurysmen, Papillarmuskelläsionen und myokardialen Rupturzonen wurden ebenfalls durch Standardtechniken in zweidimensionalen und eindimensionalen Modi und in Puls- und Dauerstrich-Doppler-Echo-CG-Modi bestimmt . Eine selektive CAG wurde innerhalb der ersten 24 Stunden nach der Aufnahme des Patienten in das Krankenhaus auf einem INNOVA 3100 Angiographiegerät (USA) mit Zugang durch die Radialarterie unter Verwendung von Standard-Judkins-Links- (Jl 4,0) und Judkins-Rechtskathetern (Jl 4,0) unter Verwendung von X -Strahlenkontrastmittel (Ultravist, Gadovist). Eine transilluminale Ballonangioplastie mit Stenting der symptomatischen Arterie wurde durchgeführt, wenn eine hämodynamisch signifikante Stenose von über 65 % unter Verwendung der Technik des direkten Stentings diagnostiziert wurde.

Herstellung von DNA-Präparationen Die DNA-Extraktion aus Blut wurde durch Phenol-Chloroform-Extraktion durchgeführt. Fünf bis sechs Volumina Puffer A (10 mM Tris-HCl, pH = 7,5; 10 mM NaCl; 3 mM MgCl 2 ) wurden zu 1 Volumen Blutprobe gegeben und Gerinnsel wurden in einem Homogenisator gerieben. Nach 15-minütiger Zentrifugation bei 2500 g wurden die Präzipitate dreimal mit Puffer A gewaschen und in 1 ml Puffer B (10 mM EDTA; 100 mM NaCl; 50 mM Tris-HCl, pH = 8,5) resuspendiert. Nach Zugabe von SDS auf 0,5 % und Proteinase E auf 200 &mgr;g/ml wurde die Mischung für 12 Stunden bei 56°C inkubiert. Die Deproteinisierung wurde nacheinander mit Phenol-Chloroform-Mischung (1:1), wassergesättigtem Phenol, Phenol-Chloroform-Mischung (1:1) und Chloroform durchgeführt. Die DNA wurde durch Zugabe von NaCl-Lösung zu 1 M und 1 V Isopropylalkohol ausgefällt. Danach wurde die Lösung für 1 h bei –20°C gekühlt. Der durch 15-minütiges Zentrifugieren auf einer Eppendorf-Mikrozentrifuge bei 12000 g erhaltene Niederschlag wurde dreimal mit 75 % Ethanol gewaschen, gefolgt von 5-minütigem Zentrifugieren. 12000 g und nach dem Trocknen bei 56 °C in deinanilisiertem Wasser auf eine DNA-Konzentration von 0,5 µg/µl gelöst. Die Genotypisierung der Polymorphismen wurde mittels Real-Time-PCR gemäß dem Protokoll des Herstellers (TaqMan-Sonden, Thermo Fisher Scientific, USA) durchgeführt ein StepOnePlus-Instrument. Sie wurden gemäß den Ergebnissen internationaler vollständiger genomweiter Assoziationsstudien (GWAS) ausgewählt, die die Assoziation dieser SNPs mit der koronaren Herzkrankheit (KHK), der Entwicklung einer Herzinsuffizienz bestätigten.

Statistische Methoden der Materialverarbeitung Der Einfluss von klinischen, demographischen, funktionellen, biochemischen Markern und Behandlungsmethoden auf die Entwicklung von akuter, stationärer und entfernter postinfarktchronischer Herzinsuffizienz wurde durch Odds Ratio bewertet.

Die statistische Analyse der molekulargenetischen Daten wurde unter Verwendung des Softwarepakets SPSS 22.0 durchgeführt. der erste Schritt bestand darin, die Häufigkeiten von Genotypen und Allelen der untersuchten CHF bei ACS-Patienten mit erhöhten kardiospezifischen Markern und in der Vergleichsgruppe zu bestimmen, wo kardiospezifische Marker innerhalb normaler Grenzen lagen; dann bewerteten wir die Übereinstimmung der Genotyphäufigkeiten mit dem Hardy-Weinberg-Gleichgewicht in der Kontrollgruppe (Chi-Quadrat-Kriterium). Der Vergleich des Niveaus quantitativer Indizes bei Trägern verschiedener Genotypen wurde durchgeführt, nachdem die Normalität der Verteilung dieser Merkmale durch den Kolmogorov-Smirnov-Test überprüft worden war. Wenn die Merkmale die Kriterien der Normalverteilung erfüllten, wurde eine Einzelfaktor-Varianzanalyse verwendet. Die Signifikanz der Unterschiede zwischen den beiden genotypischen Klassen wurde zusätzlich unter Verwendung des t-Tests für zwei unabhängige Stichproben überprüft. Die Signifikanz der Unterschiede zwischen den beiden genotypischen Klassen wurde zusätzlich mit dem Mann-Whitney-Test für zwei unabhängige Stichproben getestet. Wenn das untersuchte Merkmal die Kriterien der Normalverteilung nicht erfüllte, wurde ein Vergleich des Niveaus dieses Merkmals zwischen den Trägern verschiedener Genotypen durchgeführt mit dem Kruskal-Wallis-Test. Die Assoziation von SNPs mit Risikofaktoren im Zusammenhang mit kategorialen Variablen wurde mit Konjugationstabellen unter Verwendung des Chi-Quadrat-Tests von Pearson getestet. Im Fall von Vier-Felder-Tabellen verglichen wir Proben nach Genotyp und Allelhäufigkeiten unter Verwendung des exakten zweiseitigen Kriteriums von Fisher. Das Risiko eines Krankheitsausgangs/Risikofaktors für ein bestimmtes Allel oder einen bestimmten Genotyp wurde als Odds Ratio berechnet.

Methoden der Korrelations-, Faktor- und Regressionsanalyse wurden verwendet, um mathematische Modelle zur Vorhersage des Risikos einer Postinfarkt-CVD zu entwickeln. Die ersten beiden Gruppen von Methoden wurden verwendet, um signifikante unabhängige Variablen (Attribute) zu identifizieren, die gut mit der Wahrscheinlichkeit eines unerwünschten Ergebnisses korrelieren, aber schwach miteinander korrelieren (um Multikollinearität des Modells auszuschließen). Regressionsanalysemethoden wurden verwendet, um die Struktur des Regressionsmodells auszuwählen und seine Koeffizienten zu schätzen. Zwei Koeffizienten, die eine einfache Interpretation haben, wurden verwendet, um die Angemessenheit des konstruierten Modells zu testen:

• Empfindlichkeitskoeffizient;
• Spezifitätskoeffizient;
• Koeffizient der Genauigkeit.