Etsi menetelmiä sydämen vajaatoiminnan ennustamiseksi sydäninfarktin jälkeen (PHFMI)

Potilaat rekrytoitiin Novosibirskin alueen valtion budjettilaitoksen "City Clinical Hospital" (SBUZ NSO GKB) Novosibirskin 1. sydäninfarktipotilaiden sydäninfarktipotilaiden osaston alueellisen verisuonikeskuksen (RVC) perusteella. Suunnitelman mukaan tutkimuksessa oli kolme pistettä: nollapiste - potilaan ensimmäinen sairaalahoitopäivä sairaalassa; ensimmäinen piste - MI-kehityksen päivä 30; toinen kohta - 12 kuukautta AMI:n kehittämisestä. Tutkimuksen kaikissa vaiheissa suoritimme akuutin sydäninfarktipotilaiden hoitostandardin, kliinisen ohjeistuksen ja väitöskirjan tutkimusprotokollan edellyttämät tutkimukset: potilaan kliininen tila (valitusten arviointi, objektiivinen tutkimus), laboratoriotutkimukset (kokonaisverenkuva (TBC), kokonaisvirtsan analyysi (UPE), biokemiallinen verianalyysi (BX), instrumentaalitutkimukset (EKG, rintakehän röntgenkuvaus (RGCT)). Koronarografia, jota seurasi perkutaaninen sepelvaltimon interventio (PCI), EchoCG ja molekyyligeneettisten markkerien määritys suoritettiin myös vaiheessa 0. Missä tahansa vaiheessa sydämen rytmi- ja johtumishäiriöiden esiintyessä suoritettiin Holter-sähkökardiografia (HM-EKG); ja 1. ja 2. pisteessä tehtiin 6 minuutin kävelytesti.

AMI-diagnoosin varmistus suoritettiin sydäninfarktin neljännen yleismaailmallisen määritelmän kriteerien mukaan, joka tiivistää Maailman sydänliiton (WHF), American Heart Associationin (AHA), American College of Cardiology (ACC) asiantuntijoiden mielipiteet. ja European Society of Cardiology (EOC, ESC) (2018). Väitöstyössä oli potilaita, jotka täyttivät akuutin tyypin 1 sydäninfarktin kriteerit, joihin sisältyivät kohonneet sydämen troponiinitasot yli ylemmän viitearvon 99. persentiilin, yhdistettynä ainakin yhteen lisäominaisuuteen: 1) tyypillinen kliininen kuva akuutista sydänlihasiskemiasta. ; 2) uudet EKG-muutokset, jotka viittaavat iskemiaan; 3) patologinen Q-aalto EKG:ssä; 4) kuvantamislöydökset, jotka vahvistavat uusia sydänlihasiskemian alueita; ja 5) infarktiin liittyvän valtimotromboosin (ICA) esiintyminen CAG:ssa. Akuutin ja kroonisen sydämen vajaatoiminnan (OSF, CHF) diagnoosin varmistus suoritettiin European Society of Cardiology (EOC, ESC) kliinisten suositusten (2016, 2021) ja yhdistyksen Sydämen vajaatoiminnan asiantuntijayhdistyksen ( Society of Heart Failure Specialists) ( SHF), Russian Society of Cardiology (RSC) ja Russian Scientific Medical Society of Physicians (RSMOT) (2018). CHF:n luokittelua sairauden vaiheiden (Strazhesko-Vasilenko, 1935) ja vasemman kammion ejektiofraktion (LVEF) mukaan, myös New York Heart Associationin (NYHA, 1964) sydämen vajaatoimintaluokitusta käytettiin arvioitaessa. oireiden vakavuus. Käytimme akuutin sydämen vajaatoiminnan Killip-luokitusta.

Instrumentaaliset tutkimusmenetelmät EKG tallennettiin 12 kytkentään (6 vakio- ja 6 rintakehäkytkentää) käyttämällä "Megacart-400" (Siemens) sairaalahoidon ensimmäisten minuuttien aikana, sitten kerran päivässä, kunnes STEMI-subakuutti jakso muodostui, ja sitten kerran jokaisessa kolme päivää. Ekokardiografia tehtiin sairaalaan tullessa, 30. päivänä sydäninfarktin kehittymisestä ja 1 vuotta myöhemmin Phillips ie33 -laitteella (Philips Ultrasound, USA) vakioasennosta potilaan vasemmalla puolella käyttäen 2 -4 MHz ultraäänimatriisimuunnin. Tekniikka suoritettiin M- ja B-moodissa, pulssiaalto-, jatkuva-aalto-Doppler-, väri-Doppler-kartoitus, kudos-Doppler ja väri-Doppler M-moodi (Color M-mode). Seuraavat parametrit määritettiin: PV - poistofraktio (Simpson, 1989. ), FV - loppudiastolinen tilavuus, CSV - loppusystolinen tilavuus, ESR - loppusystolinen koko, CDD - loppudiastolinen koko, FDi - loppudiastolinen indeksi, CSI - loppusystolinen indeksi, DLA - keskimääräinen keuhkovaltimon paine, FDD - loppudiastolinen paine , SW - iskutilavuus, MM - sydänlihaksen massa, IMM - sydänlihaksen massaindeksi, LP - vasen eteinen, RAP - oikea eteinen, RV - oikea kammio, VIR - isovoluminen rentoutumisaika, E - LV varhainen diastolinen täyttymisnopeus, A - vasen kammio myöhäinen diastolinen täyttönopeus, E/A - aikaisen ja myöhäisen välitysvirtauksen suhde, DT - aikaisen diastolisen täytön hidastumisen aika, AT - aikaisen diastolisen täytön kiihtymisen aika, ET - ejektiojakso, Em - sydänlihaksen varhainen diastolinen liikenopeus, Am - myöhäisen diastolisen sydänlihaksen liikkeen nopeus, Em/Am - varhaisen ja myöhäisen diastolisen sydänlihaksen liikkeen nopeuksien suhde, E/e' - mitraaliläpän E-aallon verenvirtauksen suhde E'-aaltoon (varhaisen mitraaliläpän renkaan liikkeen suhde ), keuhkolaskimon S-verenkierto, keuhkolaskimon D-verenvirtaus, dE ja dA -parame varhaisen diastolisen täytön kestoajat, IVCT - RV-supistuksen isovoluminen aika, Sfcmc - mitraaliläpän kuiturenkaan nopeus, VpvA - suurin diastolinen retrogradinen virtausnopeus, SRMP - varhainen mitraalisen virtausnopeus, diastolinen jäykkyys, Tei-indeksi - isovolumettisen supistumisen summa ja Isovolumetriset rentoutumisajat jaettuna kammion ejektioajalla, Em/SRMP - varhaisen diastolisen transcuspidaalisen virtausnopeuden suhde sen leviämisnopeuteen. Vasemman kammion ejektiofraktio (LVEF) laskettiin käyttämällä kaavaa: LVEF = (QDO - QSO/QDO) 100 % (Simpsonin menetelmän mukaan). Nekroosivyöhykkeen ja arpimuutosten, aneurysman, papillaaristen lihasvaurioiden ja sydänlihaksen repeämäalueiden dyskinesian esiintyminen ja aste määritettiin myös standarditekniikalla, kaksiulotteisessa ja yksiulotteisessa tilassa sekä pulssi- ​​ja jatkuvan aallon Doppler Echo-CG -moodissa. . Selektiivinen CAG suoritettiin ensimmäisten 24 tunnin sisällä potilaan sairaalaan saapumisesta INNOVA 3100 -angiografisella laitteella (USA), johon päästiin radiaalisen valtimon kautta käyttäen tavallisia Judkinsin vasenta (Jl 4,0) ja Judkins oikeaa (Jl 4,0) katetria X:n avulla. -ray-varjoaineet (ultravist, Gadovist). Transilluminaalinen palloangioplastia oireisen valtimon stentauksella suoritettiin, kun hemodynaamisesti merkittävä, yli 65 % ahtauma diagnosoitiin suoran stentoinnin tekniikalla.

DNA-valmisteiden valmistus DNA-uutto verestä suoritettiin fenoli-kloroformiuutolla. Viidestä kuuteen tilavuutta puskuria A (10 mMTris-HCl, pH = 7,5; 10 mM NaCl; 3 mM MgCl2) lisättiin 1 tilavuuteen verinäytettä ja hyytymiä hierottiin homogenisaattorissa. Kun oli sentrifugoitu 2 500 g:ssä 15 minuutin ajan, sakat pestiin kolme kertaa puskurilla A ja suspendoitiin uudelleen 1 ml:aan puskuria B (10 mM EDTA; 100 mM NaCl; 50 mM Tris HCl, pH = 8,5). Kun SDS:ää oli lisätty 0,5 %:iin ja proteinaasi E:tä 200 µg/ml:aan, seosta inkuboitiin 12 tuntia 56 °C:ssa. Proteiinin poisto suoritettiin peräkkäin fenoli-kloroformiseoksella (1:1), vedellä kyllästetyllä fenolilla, fenoli-kloroformiseoksella (1:1) ja kloroformilla. DNA saostettiin lisäämällä NaCl-liuosta 1 M ja 1 V isopropyylialkoholiin. Sen jälkeen liuosta jäähdytettiin 1 tunti -20 °C:ssa. Sakka, joka saatiin sentrifugoimalla Eppendorf-mikrosentrifugilla 12 000 g:ssä 15 minuutin ajan, pestiin kolme kertaa 75-prosenttisella etanolilla, mitä seurasi sentrifugointi 5 minuutin ajan. 12 000 g ja 56 °C:ssa kuivaamisen jälkeen liuotettiin deinalisoituun veteen DNA-pitoisuuteen 0,5 µg/μl. Polymorfismien genotyypitys suoritettiin käyttäen reaaliaikaista PCR:ää valmistajan ohjeiden mukaisesti (TaqMan-koettimet, Thermo Fisher Scientific, USA) StepOnePlus-instrumentti. Ne valittiin kansainvälisten täyden genomin laajuisten assosiaatiotutkimusten (GWAS) tulosten perusteella, jotka vahvistivat näiden SNP:iden yhteyden sepelvaltimotautiin (CHD), sydämen vajaatoiminnan kehittymiseen.

Tilastolliset materiaalinkäsittelymenetelmät Kliinisten, demografisten, toiminnallisten, biokemiallisten, markkerien ja hoitomenetelmien vaikutusta akuutin, sairaalan ja kaukaisen infarktin jälkeisen kroonisen sydämen vajaatoiminnan kehittymiseen arvioitiin todennäköisyyssuhteella.

Molekyyligeneettisten tietojen tilastollinen analyysi suoritettiin käyttämällä SPSS 22.0 -ohjelmistopakettia. ensimmäinen askel oli määrittää tutkitun CHF:n genotyyppien ja alleelien esiintymistiheydet ACS-potilailla, joilla on kohonneet kardiospesifiset markkerit, sekä vertailuryhmässä, jossa kardiospesifiset markkerit olivat normaalirajoissa; sitten arvioimme genotyyppifrekvenssien yhteensopivuutta Hardy-Weinberg-tasapainon kanssa kontrolliryhmässä (Ki-neliökriteeri). Kvantitatiivisten indeksien tason vertailu eri genotyyppien kantajilla suoritettiin sen jälkeen, kun näiden ominaisuuksien jakauman normaalisuus oli tarkistettu Kolmogorov-Smirnov-testillä. Jos ominaisuudet täyttivät normaalijakauman kriteerit, käytettiin yksitekijävarianssianalyysiä. Kahden genotyyppiluokan erojen merkitys tarkistettiin lisäksi käyttämällä t-testiä kahdelle riippumattomalle näytteelle. Kahden genotyyppiluokan erojen merkitystä testattiin lisäksi Mann-Whitney-testillä kahdelle riippumattomalle näytteelle, jos tutkittu ominaisuus ei täyttänyt normaalijakauman kriteerejä, suoritettiin tämän ominaisuuden tason vertailu eri genotyyppien kantajilla. käyttämällä Kruskal-Wallis-testiä. SNP:iden yhteyttä kategorisiin muuttujiin liittyviin riskitekijöihin testattiin konjugaatiotaulukoilla käyttäen Pearsonin khin neliötestiä. Nelikenttätaulukoiden tapauksessa vertailimme näytteitä genotyypin ja alleelifrekvenssien mukaan käyttäen Fisherin tarkkaa kaksipuolista kriteeriä. Sairauden lopputuloksen riski/riskitekijä tietylle alleelille tai genotyypille laskettiin todennäköisyyssuhteena.

Korrelaatio-, tekijä- ja regressioanalyysimenetelmillä kehitettiin matemaattisia malleja infarktin jälkeisen CVD:n riskin ennustamiseen. Kahta ensimmäistä menetelmäryhmää käytettiin tunnistamaan merkittäviä riippumattomia muuttujia (attribuutteja), jotka korreloivat hyvin haitallisen lopputuloksen todennäköisyyden kanssa, mutta korreloivat heikosti keskenään (mallin multikollineaarisuuden poissulkemiseksi). Regressiomallin rakenteen valinnassa ja kertoimien arvioinnissa käytettiin regressioanalyysimenetelmiä. Rakennetun mallin riittävyyden testaamiseen käytettiin kahta kerrointa, joilla on yksinkertainen tulkinta:

• herkkyyskerroin;
• spesifisyyskerroin;
• tarkkuuskerroin.