Estudio del Efecto del Innato sobre la Respuesta Inflamatoria a la Endotoxina

Este estudio de investigación examinará el papel de la inmunidad innata en la respuesta inflamatoria de los monocitos y macrófagos a la endotoxina. Aproximadamente 1450 participantes sanos mayores de 18 años serán identificados y reclutados del Registro de Polimorfismo Ambiental (EPR). El EPR es un proyecto a largo plazo para recolectar y almacenar hasta 15,000 muestras de ADN para su uso en estudios de investigación de individuos en la Región del Triángulo de Carolina del Norte. Se anticipa que aproximadamente el 50% de los participantes contactados se inscribirán y alrededor del 15% de los participantes inscritos se retirarán.

Este estudio observacional de asociación de genes controlado reclutará participantes sobre la base del genotipo y luego observará el fenotipo de cada participante. Hay varios SNP de interés en los genes TIRAP, MyD88, ABCA1, CD14, CD44, ITIH3, ITIH4, TLR4, TNFa, TLR5, IRGM y APOL1. Además existen alelos de interés en el gen ApoE. Estos alelos en conjunto se consideran un polimorfismo. Para cada polimorfismo de interés, se reclutará un grupo separado de participantes (incluidos heterocigotos y homocigotos para los alelos mayor y menor de cada SNP). Se obtendrá un máximo de 200 ml de sangre de cada participante durante una visita que dura aproximadamente de 1 a 1,5 horas. Los monocitos sanguíneos se aislarán de las muestras de sangre donadas y se cultivarán para obtener macrófagos. Los macrófagos se expondrán ex vivo a una endotoxina (LPS) ya PAM3CSK4 para determinar la respuesta celular en función del genotipo. En los estudios de APOL1, también se recolectará una muestra de orina para evaluar la filtración de proteínas.

El objetivo principal es determinar asociaciones entre polimorfismos seleccionados en genes [TIRAP (Proteína asociada a TIR), MyD88 (Proteína de respuesta primaria de diferenciación mieloide 88), ApoE (Apolipoproteína E), ABCA1 (ATP Binding Cassette Transporter A1), CD14, CD44, ITIH3 , ITIH4, TLR4, TNFa, TLR5, IRGM y APOL1] y funciones inflamatorias cuantitativas in vitro de dos tipos de células, los macrófagos y los neutrófilos. Los criterios de valoración principales de este estudio para ambos tipos de células serán los niveles de 6 citocinas TNF alfa, IL-6, MIP-2, IL-8, MCP-1 e IFN-beta (ELISA) inducidas por LPS y por PAM3CSK4 más la línea base niveles de citoquinas (sin exposición a LPS o PAM3CSK4). Los niveles urinarios de proteína se cuantificarán en algunos estudios como una medida de la disfunción renal temprana.

Esperamos que los resultados de este estudio puedan conducir al descubrimiento de información importante sobre el papel de MDC1 (mediador de la proteína 1 del punto de control de daños en el ADN) en enfermedades humanas, identificando potencialmente nuevos objetivos para futuros estudios.