Elävän heikennetyn rotavirusrokotteen kehittäminen ihmisen infektion haastemalliksi

Ripulitauti on johtava pienten lasten, erityisesti Etelä-Aasian ja Saharan eteläpuolisen Afrikan kehitysmaissa asuvien lasten sairastuvuuden ja kuolleisuuden syy1. Rotavirus on alle viisivuotiaiden lasten keskivaikean tai vaikean ripulin yleisin aiheuttaja, ja se aiheuttaa vuosittain arviolta 215 000 lapsen kuolemaa, joista suurin osa tapahtuu alemman ja keskitulotason maissa (LMIC)2. Kahden Maailman terveysjärjestön (WHO) hyväksymän rotavirusrokotteen, RotarixTM:n (GlaxoSmithKline Biologicals, Belgia) ja RotaTeqin (Merck and Co, New Jersey), laaja käyttöönotto on auttanut merkittävästi vähentämään rotavirukseen liittyvien sairaalahoitojen ja kuolemantapausten määrää3. -18. Näistäkin tuloksista huolimatta rotavirusrokotteet ovat toistuvasti osoittaneet alhaisemman immunogeenisyyden, tehokkuuden, tehokkuuden ja suojan keston LMIC-alueilla asuvilla lapsilla korkean tulotason maihin verrattuna19, 20, 21. Siten jopa rotavirusrokotteiden (RV) käyttöönoton jälkeen rotavirus on edelleen johtava ripulisairauksien ja -kuolleisuuden syy näissä olosuhteissa. Parannettu RV johtaisi huomattavasti suurempiin ripulisairauksien ja imeväisten kuolleisuuden vähenemiseen; Siksi on kiireellisesti ymmärrettävä tällä hetkellä saatavilla olevien elävien, heikennettyjen oraalisten rokotteiden tehon heikkeneminen LMIC-rokotteissa, jotta voidaan tiedottaa ja nopeuttaa mahdollisimman tehokkaiden hoitomuotojen kehittämistä.

Viimeaikaiset tutkimukset ovat ehdottaneet, että vaihtoehtoiset aikataulut voisivat myös parantaa immunogeenisyyttä ja mahdollista rokotteen suorituskykyä LMIC:issä22,23. Lisäksi kehitteillä on uusia RV-ehdokkaita vaihtoehtoisilla antoreitillä, ja ne lupaavat parantaa rokotteen suorituskykyä21,24,25. Perinteisistä uusien rokotteiden lisensointitavoista, jotka ovat kehitteillä kliinisten kokeiden kautta, on kuitenkin tullut haastavia, ja lumekontrolloituja tutkimuksia ei enää pidetä eettisinä, ja kenttätehokkuuskokeet vaativat yhä suurempia kohortteja vertaamaan uusia ehdokkaita olemassa oleviin rokotteisiin. Human Infection Challenge (HIC) -malleja on historiallisesti käytetty nopeuttamaan rokotteiden kehitystä ja tarjoavat mahdollisuuden tutkia sekä patogeneesiä että rokotteen immunogeenisyyden mekanismeja erityisesti ihmisrajoitteisissa patogeeneissä. HIC-malleja ei ole käytetty ja hyväksytty laajalti LMIC-malleissa, vaikka tämän metodologian tarjoaman ainutlaatuisen mahdollisuuden huomioon ottamisessa on tieteellisiä ja eettisiä ansioita.

Ehdotamme tutkia heikennetyn rokotteen metodologista kehittämistä HIC-mallina rotavirusimmunologian ja rokotteiden edistämiseksi sambian pikkulapsilla. Arvioimme myös minimaalisesti invasiivisten toimenpiteiden käyttöä, mukaan lukien syljen kerääminen vasta-ainemittaukseen ja ulostenäytteiden kerääminen rokoteviruksen leviämistä varten rokotteen aiheuttaman limakalvon immuniteetin mittarina.

Tavoite 1 Profiloida rotavirusspesifiset IgA- ja IgG-vasteet rokotukselle ja määrittää seerumin ja syljen välinen korrelaatio.

Spesifinen tavoite 1a: Profiloida rotavirusspesifiset IgA- ja IgG-vasteet lähtötilanteessa (päivä 0), ennen annosta 2 (päivä 28) ja 1 kuukausi annoksen 2 jälkeen (päivä 56) seerumissa ja syljessä seropositiivisuuden ja rokotteen serokonversion määrittämiseksi.

Tavoite 2 Profiloida sytokiinien immuunivasteita ja määrittää seerumin ja syljen välinen korrelaatio.

Erityistavoite 2a: Määritä sytokiiniprofiilit seerumissa ja syljessä lähtötasolla (päivä 0) ja seuraa niiden yhteyttä rokotteen serokonversioon (päivä 56).

Spesifinen tavoite 2b: Profiloida sytokiinivasteet välittömästi ennen annoksen 2 rokotusta (päivä 28) ja 3 päivää toisen rokoteannoksen antamisen jälkeen (päivä 31: rotavirusrokotealtistus).

Tavoite 3: Arvioida seerumin ja syljen vasta-ainetasojen suhdetta rokotushetkellä (päivä 0) ja päivinä 28, 31 ja 56, RV-kannan erittymistä ulosteeseen vastaan ​​kerättyihin ulosteisiin ja päivinä 3, 5, 7 ,14 ja 21 sekä myös päivänä 28 ja annoksen 2 jälkeen rokotuspäivinä 31, 33, 35, 42, 49 ja 56.

Tavoite 4: Profiloida ja karakterisoida välitön sytokiini-immuunivaste rokotteelle päivänä 0 ja päivänä 31 kerätyssä syljessä, jotta voidaan määrittää, voisiko sylki toimia tyydyttävänä seerumin sijaisarvona arvioitaessa rokotteen aiheuttamaa limakalvon immuniteettia.

1. Metodologia

1. Tutkimuksen suunnittelu Tutkiva ja havainnollinen kohorttitutkimus, jossa pikkulapsille annettiin kaksi standardiannosta elävää, heikennettyä, oraalista Rotarix™-valmistetta 6 ja 10 viikon kohdalla. Vauvat otetaan mukaan rutiininomaisen EPI-käynnin aikana viikon 6 rokotuksiin sen jälkeen, kun heidän äitinsä/huoltajansa on antanut heille kirjallisen tietoisen suostumuksen. Jokainen lapsi jää tutkimukseen enintään 56 päivän ajan, jonka aikana häntä seurataan intensiivisesti tutkimustoiminnalla ja/tai suunnitelluilla tutkimusklinikallakäynneillä (yhteenveto alla olevassa taulukossa 1).
2. Tutkimuspaikka ja väestö Tutkimus suoritetaan George Clinicissä Lusakassa, jossa hallituksen äidin lapsen terveyden (MCH) ja antiretroviraalisen hoidon (ART) klinikat sekä CIDRZ Georgen kliininen tutkimuskeskus sijaitsevat rinnakkain. George Clinic -klinikalla on 145 23053 asukasta, ja se sijaitsee tyypillisessä Lusakan esikaupunkiympäristössä ympäröivässä slummissa. Aiomme rekrytoida osallistujia, kun he osallistuvat satunnaisesti terveyskeskukseen. CIDRZ:llä on jo hyvä tutkimuslaitos, joka on jo olemassa tällä klinikalla, ja alla on kaavamainen kuva sijaintisuunnitelmasta.
3. Osallistujien valinta, näytteenottomenetelmät ja otoskoko Otoskoko Huomioitavaa Osallistujat valitaan satunnaisesti George Clinicin rutiininomaisessa synnytystä edeltävässä hoidossa olevista äiti-vauva-pareista. Koska kyseessä on tutkiva ja metodologinen kehitystutkimus, muodollisia otoskokolaskelmia ei ole tehty. Olemme pragmaattisesti päättäneet ottaa mukaan 20 vauvaa, mikä on yleisesti hyväksyttävää vaiheen I tyyppisiin tutkimuksiin. Jos arviolta 10 %:n poistuminen johtuu seurannan menetyksestä, olemme mukauttaneet otosta niin, että siihen on värvätty 22 vauvaa.