- ICH GCP
- Yhdysvaltain kliinisten tutkimusten rekisteri
- Kliininen tutkimus NCT05261373
Ravitsemuskasvatusstrategian ja fyysisen harjoittelun teho suoliston mikrobiotaan tyypin 2 diabeetikoilla (EDUGUTION)
Ravitsemuskasvatusstrategian tehokkuus ja fyysisen harjoittelun rooli lihasaineenvaihdunnan modulaatiossa suoliston mikrobiotan kautta tyypin 2 diabeetikoilla (KOULUTUSPROJEKTI)
Oletamme, että ravitsemuskasvatusintervention ja HIIT-pohjaisen fyysisen harjoitteluohjelman yhdistäminen parantaa lihasten aineenvaihduntaa T2DM-potilaiden suoliston mikrobiotan positiivisten muutosten kautta, mikä johtaa parempaan glykemia-/insulinemiatasoon, kehon rasvamassan vähenemiseen ja elämänlaadun paranemiseen. .
Projekti on satunnaistettu, kontrolloitu kliininen tutkimus, johon osallistui 120 T2DM- ja liikalihavuutta sairastavaa osallistujaa, ja sen tavoitteena on selvittää ravitsemuskasvatusohjelman tehokkuutta ja liikuntatyypin roolia terveyteen liittyvissä muuttujissa. Osallistujat ovat molempia sukupuolia, iältään 40-55 vuotta ja kuuluvat Cádizin maakuntaan. Suunnittelussa on kaksi 12 viikon interventiota; päätekijällä on 2 tasoa: osallistujat, jotka saavat ravitsemuskoulutuksen (EDU) ja kontrollit (CG); toisella tekijällä on 3 tasoa: korkean intensiteetin intervalliharjoittelu (HIIT), kohtalaisen intensiteetin jatkuva harjoittelu (MICT) ja kontrollit (INACT). Siksi osallistujat satunnaistetaan kuuteen ryhmään (n=20), jotka on mukautettu sukupuolen mukaan (≈50 % kussakin ryhmässä): EDU+HIIT, EDU+MICT, EDU+INACT, CG+HIIT, CG+MICT, CG+INACT .
Tulosmuuttujia, jotka mitataan ennen ja jälkeen interventiota, ovat: ravinnon saannin arviointi, fyysisen aktiivisuuden arviointi, elämänlaatu, ulostenäytteet, verinäytteet, verenpaine, ruokahalun arviointi, lihaskoepalanäytteet, kehon koostumus ja nesteet, perusaineenvaihdunta, rasvan maksimaalinen hapettumistesti ja kardiorespiratorinen kunto.
Tutkimuksen yleiskatsaus
Tila
Yksityiskohtainen kuvaus
Noin 500 miljoonalla ihmisellä on tyypin 2 diabetes (T2DM) vuonna 2018, ja sen odotetaan kasvavan 20–50 prosenttia seuraavien 10 vuoden aikana. T2DM:ää kutsutaan myös ei-insuliiniriippuvaiseksi tai aikuisiän puhkeamiseksi, ja se johtuu kehon tehottomasta insuliinin käytöstä, joka johtuu liiallisesta painosta ja fyysisestä toimimattomuudesta. Diabetes on 7. yleisin kuolinsyy lisäämällä sydän- ja verisuonitautien ja muiden sairauksien riskiä, joista monet (43 %) ilmaantuvat ennenaikaisesti ja ovat suurelta osin estettävissä hyväksymällä politiikkoja, joilla luodaan terveitä elämäntapoja tukevat ympäristöt.
Terveyteen liittyvien koulutusohjelmien täytäntöönpanon parantaminen on keskeinen väline käyttäytymisen muuttamisessa. Kaikki koulutus ei kuitenkaan tue käyttäytymisen muutosta. Termejä koulutus ja tieto ajatellaan usein vaihtokelpoisina. Vaikka tieto määritellään "tosiasioiksi, tiedoiksi ja taidoiksi, jotka henkilö on hankkinut kokemuksen tai koulutuksen kautta", koulutus on kattava termi, joka voidaan määritellä "prosessiksi saada tai antaa systemaattista opetusta" tai "valaiseva kokemus". ". Siksi interventioissa tulisi pyrkiä koulutukseen, jotta voidaan parantaa terveellisiä elämäntapoja ja vähentää diabeteksen esiintyvyyttä, komplikaatioita ja kuolleisuutta. Tässä linjassa ravitsemusneuvonnan vaikutusta painonpudotukseen, glykemian hallintaan ja terveyden parantamiseen lihavilla ja diabeetikoilla on aiemmin tutkittu epäjohdonmukaisin tuloksin. Siksi koulutusstrategiat tulisi optimoida ravitsemukseen ja liikuntaan liittyvien käyttäytymismuutosten saavuttamiseksi.
Äskettäin on havaittu, että suoliston mikrobiota voi muuttaa käyttäytymistä, mukaan lukien ravitsemuskäyttäytymistä ja päätöksiä, joten suoliston mikrobiotalla voi olla vaikutusta koulutusohjelman tehokkuuteen. Suoliston mikrobiota koostuu yli 100 miljardista mikro-organismista, jotka on luokiteltu vähintään 1000 eri bakteeri-, sieni-, virus- ja hiivalajiin. Näiden näkökohtien valossa Nobel-palkittu Joshua Lederberg ehdotti, että mikrobiota, erityisesti suoliston, pidettäisiin "superorganismina". Yksi neurotieteen suurista löydöistä on suoliston mikrobiotan ja aivojen yhteys, jota kutsutaan suoli-aivo-akseliksi, joka kertoo, syödäänkö vai ei, vaikka mitä ruokaa (esimerkiksi halu syödä jotain makeaa tai suolaista). Nämä tulokset voivat olla suuri edistysaskel kasvatus- ja käyttäytymistieteillä, erityisesti niille koulutusohjelmille, jotka keskittyvät ravitsemustottumusten parantamiseen.
Lisäksi, vaikka energian saanti pysyy samana ruokavalion ja samankaltaisen fyysisen aktiivisuuden avulla, terve suoliston mikrobiotan muutos pystyy alentamaan kehon rasvaprosenttia, millä on positiivinen vaikutus T2DM:n ehkäisyyn ja hoitoon. Siksi suoliston mikrobiotan parantamiseen keskittyvät koulutusohjelmat voivat olla hyödyllinen väline ei-tarttuvien sairauksien maailmanlaajuiseen toimintasuunnitelmaan vastaamisessa, ja ne voivat vähentää joidenkin painonpudotuksen koulutusstrategioiden ja -ohjelmien epäonnistumista. Äskettäin on osoitettu, että suoliston mikrobiotalla on merkittävä rooli T2DM:n patofysiologiassa, joka moduloi insuliinin ja glukoosin eritystä. Siksi mikrobiotan vahvistavia työkaluja, kuten ravinnon palauttamisstrategioita, prebioottien ja probioottien avulla, tulisi edistää liikalihavuus- ja T2DM-populaatioissa, kuten olemme aiemmin tutkineet.
Lisäksi fyysinen harjoittelu näyttää parantavan suoliston mikrobiston koostumusta, erityisesti Firmicutes spp. / Bacteroidetes spp. Lisäksi Lactobacillus spp.:n välillä on havaittu positiivinen korrelaatio. ja Bifidobacterium spp. seerumin leptiinitasoilla koulutetuilla rotilla. Useimmat liikalihavuuden torjuntaohjelmat ovat perustuneet ensisijaisesti aerobisiin harjoituksiin. Aerobinen harjoittelu liittyy kehon rasvamassan, erityisesti sisäelinten rasvamassan, vähenemiseen, lisää insuliiniherkkyyttä, alentaa perusglukoosi- ja insuliinitasoja sekä lisää glukoosin ja rasvahappojen kuljetusproteiinien ilmentymistä lihaskuiduissa. Harjoitukset, jotka suoritetaan sillä intensiteetillä, jolla henkilö polttaa enemmän rasvaa (FatMax), näyttää vähentävän kehon rasvaa ja insuliiniresistenssiä vanhemmilla naisilla, joilla on tyypin 2 diabetes. Näihin harjoituksiin kuluu kuitenkin noin 60-90 minuuttia päivässä.
Aiempien tieteellisten tutkimusten mukaan oletamme, että ravitsemuskasvatusintervention ja HIIT-pohjaisen fyysisen harjoitteluohjelman yhdistäminen parantaa lihasten aineenvaihduntaa positiivisten muutosten kautta suolen mikrobiotassa T2DM-potilailla, mikä johtaa parempaan glykemia-/insulinemiatasoihin ja kehon rasvan vähenemiseen. massa ja elämänlaadun parantaminen.
Projekti on satunnaistettu, kontrolloitu kliininen tutkimus, johon osallistui 120 T2DM- ja liikalihavuutta sairastavaa osallistujaa, ja sen tavoitteena on selvittää ravitsemuskasvatusohjelman tehokkuutta ja liikuntatyypin roolia terveyteen liittyvissä muuttujissa. Osallistujat ovat molempia sukupuolia, iältään 40-55 vuotta ja kuuluvat Cádizin maakuntaan. Suunnittelussa on kaksi 12 viikon interventiota; päätekijällä on 2 tasoa: osallistujat, jotka saavat ravitsemuskoulutuksen (EDU) ja kontrollit (CG); toisella tekijällä on 3 tasoa: korkean intensiteetin intervalliharjoittelu (HIIT), kohtalaisen intensiteetin jatkuva harjoittelu (MICT) ja kontrollit (INACT). Siksi osallistujat satunnaistetaan kuuteen ryhmään (n=20), jotka on mukautettu sukupuolen mukaan (≈50 % kussakin ryhmässä): EDU+HIIT, EDU+MICT, EDU+INACT, CG+HIIT, CG+MICT, CG+INACT .
Tulosmuuttujia, jotka mitataan ennen ja jälkeen interventiota, ovat: ravinnon saannin arviointi, fyysisen aktiivisuuden arviointi, elämänlaatu, ulostenäytteet, verinäytteet, verenpaine, ruokahalun arviointi, lihaskoepalanäytteet, kehon koostumus ja nesteet, perusaineenvaihdunta, rasvan maksimaalinen hapettumistesti ja kardiorespiratorinen kunto.
Opintotyyppi
Ilmoittautuminen (Odotettu)
Vaihe
- Ei sovellettavissa
Yhteystiedot ja paikat
Opiskeluyhteys
- Nimi: Alberto Marín Galindo, MsC
- Puhelinnumero: 34 685847806
- Sähköposti: alberto.marin@uca.es
Tutki yhteystietojen varmuuskopiointi
- Nimi: Jesús Gustavo Ponce González, PhD
- Puhelinnumero: 34 658874134
- Sähköposti: jesusgustavo.ponce@uca.es
Opiskelupaikat
-
-
Cadiz
-
Puerto Real, Cadiz, Espanja, 11519
- Rekrytointi
- Facultad de Ciencias de la Educación
-
Ottaa yhteyttä:
- Jesus Ponce, PhD
- Puhelinnumero: +34 956 016209
- Sähköposti: jesusgustavo.ponce@uca.es
-
Alatutkija:
- Edgardo Opazo, MSc
-
Päätutkija:
- Jesus Ponce, PhD
-
Päätutkija:
- Cristina Casals, PhD
-
-
Osallistumiskriteerit
Kelpoisuusvaatimukset
Opintokelpoiset iät
Hyväksyy terveitä vapaaehtoisia
Sukupuolet, jotka voivat opiskella
Kuvaus
Sisällyttämiskriteerit:
- Savuttomia
- Alkoholiton (<3 vakiojuomaa päivässä)
- Painoindeksi > 25 kg/m tavanomaisten ruokailutottumusten säilyttäminen ilman painonpudotusta yli 2 % viimeisen 6 kuukauden aikana
- Ei ole insuliiniriippuvainen
- Vamman, sairauden tai vamman tai muun tunnetun lääketieteellisen sairauden puuttuminen, joka voisi vaikuttaa kykyyn osallistua menestyksekkäästi fyysisiin harjoituksiin
- Sydän- ja verisuonitautien puuttuminen (angina, perifeerinen tai aivoverisuonisairaus jne.).
- Neurologisten ja psykiatristen sairauksien puuttuminen.
- Hengitystiesairauksien puuttuminen (keuhkoverenpainetauti, krooninen obstruktiivinen keuhkosairaus jne.).
- Muiden aineenvaihduntasairauksien puuttuminen (hyper/hypo lisäkilpirauhasen vajaatoiminta, hyper/hypotyreoosi, Cushingin tauti, tyypin 1 diabetes jne.)
- Aktiivisen tulehduksellisen suolistosairauden puuttuminen
- Munuaissairauden puuttuminen
- Kasvaimien puuttuminen
- Hyytymishäiriön puuttuminen
- Ei hoideta lääkkeillä, joiden tiedetään vaikuttavan glukoosiaineenvaihduntaan, äskettäin steroidihoidolla (6 kuukauden sisällä) tai hormonikorvaushoidolla
- Pystyy ymmärtämään espanjan- tai englanninkielistä viestintää.
Poissulkemiskriteerit:
- He eivät osallistu enempää kuin 2 tai 4 peräkkäiseen ravitsemusneuvontaan tai fyysiseen harjoitteluun.
- He menettävät yhteensä yli 4 tai 6 harjoituskertaa ravitsemusneuvonnasta tai fyysisestä harjoittelusta.
Opintosuunnitelma
Miten tutkimus on suunniteltu?
Suunnittelun yksityiskohdat
- Ensisijainen käyttötarkoitus: Hoito
- Jako: Satunnaistettu
- Inventiomalli: Rinnakkaistehtävä
- Naamiointi: Yksittäinen
Aseet ja interventiot
Osallistujaryhmä / Arm |
Interventio / Hoito |
---|---|
Ei väliintuloa: Kontrolli (CG+INACT)
Osallistujat, jotka eivät saa ravitsemuskoulutusta tai harjoitusohjelmaa.
Heitä opastetaan säilyttämään normaalit elämäntavat fyysisen aktiivisuuden ja ruokavalion suhteen.
|
|
Active Comparator: Kohtalaisen intensiteetin jatkuva harjoittelu (CG+MICT)
Osallistujat, jotka eivät saa ravitsemuskoulutusta, mutta ovat ilmoittautuneet kohtalaisen intensiteetin jatkuvaan harjoitteluohjelmaan.
|
3 harjoitusta viikossa pyöräergometrillä, 1-2 vapaapäivää harjoitusten välissä, yhteensä 12 viikon ajan personal trainerin valvonnassa.
MICT-ohjelma koostuu noin ˜45 minuutin mittaisista kohtalaisesta aerobisesta harjoittelusta (sillä intensiteetillä, jolla maksimaalinen rasvan hapettuminen saavutettiin laboratoriokokeessa) sykliergometrillä.
|
Active Comparator: Korkean intensiteetin intervalliharjoittelu (CG+HIIT)
Osallistujat, jotka eivät saa ravitsemuskoulutusta, mutta ovat ilmoittautuneet korkean intensiteetin intervalliharjoitusohjelmaan.
|
3 harjoitusta viikossa pyöräergometrillä, 1-2 vapaapäivää harjoitusten välissä, yhteensä 12 viikon ajan personal trainerin valvonnassa.
HIIT-ohjelma koostuu 3-5 sarjasta, joiden kesto on 1 min ja 90-130 % sen maksimitehosta (määritetty ensimmäisessä harjoituskerrassa), ja sarjojen välillä on 90 sekuntia lepoa (harjoituksen arvioitu kokonaisaika: 10 minuuttia).
Harjoittelukertojen määrästä riippuen kuormitus ja sarja kasvavat jopa 40 % enimmäiskuormitusta enemmän.
|
Active Comparator: Ravitsemuskasvatus (EDU+INACT)
Osallistujat, jotka saavat ravitsemuskoulutusta, mutta eivät harjoitusohjelmaa.
|
Koulutusinterventio koostuu yksilöllisestä ravitsemusneuvonnasta.
Ravitsemuskoulutusohjelma toteutetaan 2 viikon välein 12 peräkkäisen viikon ajan, ja kokeneen ravitsemusterapeutin antaa 20 minuutin neuvontaa.
Osallistujille tarjotaan johdatus (helposti ymmärrettävällä tavalla) T2DM:n, suoliston mikrobiomin ja ruokailutottumusten välisestä yhteydestä.
Ensinnäkin potilaan ruokavalio tulee analysoida, jotta voidaan määrittää, mitä näkökohtia voidaan parantaa, kuten kokonaiskalorien saanti, hiilihydraattien määrä ja tyypit (korostamalla kuidun merkitystä) jne.
Lisäksi annetaan joitain ehdotuksia elintarvikkeiden ja kulinaarisen teknisen yhdistelmästä elintarvikkeiden glykeemisen indeksin hallitsemiseksi.
Lopuksi potilaille opetetaan Välimeren ruokavalion malli ja joitain laadullisia näkökohtia ja apuvälineitä (kuten lautasen koko tai välttää ruokalautasen käyttöä pöydällä).
|
Kokeellinen: Ravitsemuskasvatus Keskinkertainen jatkuva koulutus (EDU+MICT)
Osallistujat, jotka saavat ravitsemuskoulutusta ja ovat ilmoittautuneet kohtalaisen intensiteetin jatkuvaan harjoitteluohjelmaan.
|
3 harjoitusta viikossa pyöräergometrillä, 1-2 vapaapäivää harjoitusten välissä, yhteensä 12 viikon ajan personal trainerin valvonnassa.
MICT-ohjelma koostuu noin ˜45 minuutin mittaisista kohtalaisesta aerobisesta harjoittelusta (sillä intensiteetillä, jolla maksimaalinen rasvan hapettuminen saavutettiin laboratoriokokeessa) sykliergometrillä.
Koulutusinterventio koostuu yksilöllisestä ravitsemusneuvonnasta.
Ravitsemuskoulutusohjelma toteutetaan 2 viikon välein 12 peräkkäisen viikon ajan, ja kokeneen ravitsemusterapeutin antaa 20 minuutin neuvontaa.
Osallistujille tarjotaan johdatus (helposti ymmärrettävällä tavalla) T2DM:n, suoliston mikrobiomin ja ruokailutottumusten välisestä yhteydestä.
Ensinnäkin potilaan ruokavalio tulee analysoida, jotta voidaan määrittää, mitä näkökohtia voidaan parantaa, kuten kokonaiskalorien saanti, hiilihydraattien määrä ja tyypit (korostamalla kuidun merkitystä) jne.
Lisäksi annetaan joitain ehdotuksia elintarvikkeiden ja kulinaarisen teknisen yhdistelmästä elintarvikkeiden glykeemisen indeksin hallitsemiseksi.
Lopuksi potilaille opetetaan Välimeren ruokavalion malli ja joitain laadullisia näkökohtia ja apuvälineitä (kuten lautasen koko tai välttää ruokalautasen käyttöä pöydällä).
|
Kokeellinen: Ravitsemuskasvatus Korkean intensiteetin intervalliharjoittelu (EDU+HIIT)
Osallistujat, jotka saavat ravitsemuskoulutusta ja ovat ilmoittautuneet korkean intensiteetin intervalliharjoitusohjelmaan.
|
3 harjoitusta viikossa pyöräergometrillä, 1-2 vapaapäivää harjoitusten välissä, yhteensä 12 viikon ajan personal trainerin valvonnassa.
HIIT-ohjelma koostuu 3-5 sarjasta, joiden kesto on 1 min ja 90-130 % sen maksimitehosta (määritetty ensimmäisessä harjoituskerrassa), ja sarjojen välillä on 90 sekuntia lepoa (harjoituksen arvioitu kokonaisaika: 10 minuuttia).
Harjoittelukertojen määrästä riippuen kuormitus ja sarja kasvavat jopa 40 % enimmäiskuormitusta enemmän.
Koulutusinterventio koostuu yksilöllisestä ravitsemusneuvonnasta.
Ravitsemuskoulutusohjelma toteutetaan 2 viikon välein 12 peräkkäisen viikon ajan, ja kokeneen ravitsemusterapeutin antaa 20 minuutin neuvontaa.
Osallistujille tarjotaan johdatus (helposti ymmärrettävällä tavalla) T2DM:n, suoliston mikrobiomin ja ruokailutottumusten välisestä yhteydestä.
Ensinnäkin potilaan ruokavalio tulee analysoida, jotta voidaan määrittää, mitä näkökohtia voidaan parantaa, kuten kokonaiskalorien saanti, hiilihydraattien määrä ja tyypit (korostamalla kuidun merkitystä) jne.
Lisäksi annetaan joitain ehdotuksia elintarvikkeiden ja kulinaarisen teknisen yhdistelmästä elintarvikkeiden glykeemisen indeksin hallitsemiseksi.
Lopuksi potilaille opetetaan Välimeren ruokavalion malli ja joitain laadullisia näkökohtia ja apuvälineitä (kuten lautasen koko tai välttää ruokalautasen käyttöä pöydällä).
|
Mitä tutkimuksessa mitataan?
Ensisijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
---|---|---|
Arvioidut muutokset kehon koostumuksesta: rasvamassa ja rasvaton massa.
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Kehon koostumus arvioidaan käyttämällä 8 aiemmin validoidun elektrodin (TANITAMC780MA) monitaajuista bioimpedanssia.
Impedanssin laskennalla voidaan arvioida rasvamassa ja rasvaton massa kilogrammoina.
Potilaat käyttävät kevyitä vaatteita ja ottavat valmistajan ohjeiden mukaisen asennon.
Muita aikaisempia huomioita noudatetaan 24 tuntia ennen toimenpidettä: (i) pidättäytyä voimakkaasta liikunnasta, (ii) juoda alkoholijuomia, (iii) juoda energiajuomia ja (iv) olla paastotilassa vähintään 8 tuntia.
Nesteytystilaa valvotaan virtsan väriasteikolla kirkkaasta tummaan 7 päivän aikana ennen muutosten arviointia.
|
12 viikkoa
|
Arvioitu suoliston mikrobiotapopulaatio
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
DNA-uuttoa varten ulostenäytteet homogenoidaan Stomacher-400-sekoittimessa.
DNA uutetaan käyttämällä mini QIAamp DNA -jakkarasarjaa (QIAGEN, Barcelona, Espanja) valmistajan ohjeiden mukaisesti.
Kvantifiointi suoritetaan NanoDrop ND-1000 spektrofotometrillä (Thermo Fisher Scientific, DE, USA).
Sekvensointianalyysiä varten uutettu DNA monistetaan polymeraasiketjureaktiolla (PCR).
Kaikki PCR:t suoritetaan 25 μl:ssa reaktiotilavuuksia, jotka sisältävät 12,5 μl KAPA HiFi Hotstart 2X -valmistettua seosta (KAPA Biosystems, Woburn, MA), 5 μl kutakin suoraa ja käänteistä aluketta (1 μM) ja 2,5 μl uutettua DNA:ta ( 10 ng) standardoiduissa pyöräilyolosuhteissa.
PCR-puhdistus suoritetaan helmillä ja PCR-tuotteilla yhdistettynä AMPure XP -helmiin (Beckman Coulter, USA).
Määritä suoliston mikrobiotan koostumus ja karakterisointi bakteerien suvun, suvun ja lajien luokittelua varten.
Erityisesti Firmicutes/Bacteroidetes -suhde.
|
12 viikkoa
|
Arvioitu insuliiniresistenssin muutoksia
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Ne määritetään insuliinipitoisuuden ELISA-tekniikalla.
Homeostatic Model Assessment for Insulin Resistance insuliiniherkkyysindeksi (HOMA-IR) lasketaan.
|
12 viikkoa
|
Lihasbiopsianäytteet: mRNA:n ilmentyminen kvantitatiivisella reaaliaikaisella PCR:llä (Transcriptomic)
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Glukoosinkuljettajan GLUT4, IRS1, PI 3-kinaasi, PGC1-alfa, SIRT1, mitofusiini 1, mitofusiini 2, mitokondrioiden kompleksi I, III, IV, V mRNA-tasot (Nd1, Cyb, Co1, Atp6), CPT1B ja OPA1 analysoidaan, sitä varten eristetään kokonais-RNA kudoksista (jäädytetyt lihaskoepalat) Illustra MiniRNA Spin kit (GE Healthcare).
Sitten cDNA saadaan käyttämällä PrimeScript™ RT Master Mixiä (Perfect Real Time) (Takara) valmistajan ohjeiden mukaisesti.
mRNA:n suhteellinen kvantifiointi suoritetaan käyttämällä Corbett RotorGene -laitetta käyttämällä 6,5 ng cDNA:ta, eteenpäin ja käänteisiä alukkeita 100 nM kutakin ja SYBR Green PCR Master Mix Reagent -pakkausta (Life Technologies) 10 µl:ssa reaktiota.
mRNA-tasot normalisoidaan taloudenhoitogeenien (b-aktiini, a-tubuliini) tasoiksi ja ilmaistaan kertamuutoksina.
|
12 viikkoa
|
Lihasbiopsianäytteet: Western blot -analyysi (Proteomic)
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Jäädytetty lihaskudos homogenisoidaan proteiinin uuttopuskurissa (RIPA-puskuri fosfataasin estäjiä ja proteaasi-inhibiittoreita sisältävässä).
Proteiinipitoisuus määritetään käyttämällä BCA-proteiinimäärityssarjaa (Thermoscientific).
Sitten näytteet erotetaan SDS-PAGE-geeleillä ja siirretään sitten PVDF-kalvoille (Millipore).
Seuraavia primaarisia vasta-aineita käytetään: Kanin polyklonaalinen PGC1-alphalle, Kanin monoklonaalinen [EPR19274] DRP1:lle, Kanin monoklonaalinen [E104] SIRT1:lle, Kanin monoklonaalinen [EP2109Y] AKT1:lle (fosfo S473, Rabbit-polycolonal Rabbit-polycolonal) Kuljettaja GLUT4, Kanin polyklonaalinen IRS1:lle, Kanin polyklonaalinen AKT1:lle, Kanin monoklonaalinen [EPR5683] AMPK alfa 2:lle (phospho T172), Kanin polyklonaalinen CPT1B:lle, Total OXPHOS Human WB -vasta-ainecocktail, Rabbit O-polyc-1, Rabbit polyc-1, Rabbit polyc-1 Hiiri monoklonaalinen [12C4F12] MTCO2:lle, Kani polyklonaalinen IRS1:lle (phospho S312), Kani polyklonaalinen AMPK alfa 2:lle, Hiiri monoklonaalinen [6A
|
12 viikkoa
|
Lihasbiopsianäytteet: Sitraattisyntaasin (CS) aktiivisuusmääritys (mitokondrioiden sisältömarkkeri)
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Siksi luurankolihas (5 mg) homogenoidaan 100 μl:ssa kylmää CelLytic MT:tä (Sigma) pH 7,4:ssä ja proteaasi-inhibiittoricocktailissa.
Homogenisoitua näytettä sentrifugoidaan 12 000 x g 10 minuutin ajan ja proteiinin sisältävä supernatantti kerätään.
Sen jälkeen 8 μg proteiinia BCA-proteiinimäärityksellä määritettynä.
Proteiinin lisäksi reaktioseos sisälsi 1X määrityspuskuria, 300 µM asetyyli-CoA:ta ja 100 µM 5,5'-ditiobis-(2-nitrobentsoehappoa).
Reaktio alkaa lisäämällä 500 µM oksaloasetaattia.
CS-aktiivisuus mitataan jatkuvalla spektrofotometrisellä nopeuden määrityksellä 412 nm:ssä valmistajan ohjeiden mukaisesti.
Jokainen näyte ajetaan kolmena kappaleena.
|
12 viikkoa
|
Arvioituja muutoksia ruokahalun arvioinnista
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Koska ruokahalun tunne muokkaa ravitsemuskäyttäytymistä, ruokahalun arviointi interventioryhmien kesken voi parantaa tutkimuksen laatua kokonaisvaltaisesti.
8-10 tunnin paaston jälkeen suoritetaan analoginen visuaalinen asteikko (AVS) varmistaakseen osallistujan aamulla tunteman ruokahalun.
AVS-arvo on 1-10, mikä on alhaisin arvo ilman ruokahalua ja suurin täysi ruokahalu.
|
12 viikkoa
|
Toissijaiset tulostoimenpiteet
Tulosmittaus |
Toimenpiteen kuvaus |
Aikaikkuna |
---|---|---|
Arvioidut muutokset leporasvan hapettumisesta
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Perusaineenvaihdunta arvioidaan kunkin osallistujan leporasvan hapettumisen määrittämiseksi ennen ja jälkeen 12 viikon toimenpiteen, koska se on tärkeä terveysindikaattori ja suhde liikalihavuuteen.
Siksi hapenotto (VO2) ja hiilidioksidin tuotanto (VCO2) rekisteröidään lepoolosuhteissa makuuasennossa 30 minuutin ajan.
Lepotilan epäsuora kalorimetria mitataan käyttämällä avoimen piirin kaasuanalysaattoria, Jaeger MasterScreen CPX® (CareFusion, San Diego, USA).
Sykettä mitataan jatkuvasti Polar Team 2:n (Polar Electro Inc., Lake Success, NY) testin aikana.
Leporasvan hapettuminen grammoina minuutissa lasketaan Fraynin ehdottaman epäsuoran yhtälön avulla.
|
12 viikkoa
|
Arvioidut muutokset ruokavaliosta: Kulutustiheys
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Ruokavalion saannin arviointi koulutetuilta katsastajilta henkilökohtaisessa haastattelussa käyttäen Food Frequency Questionnaire (FFQ) -kyselyä.
FFQ on aiemmin validoitu Espanjan Välimeren väestössä, ja se tarjoaa laadullisen kulutustiheyden viimeisen vuoden aikana.
Lisäksi tehdään puolikvantitatiivinen kokonaisenergia-, makro- ja mikroravinteiden analyysi.
Tulokset analysoidaan DIAL®-ohjelmistolla Windowsille, versio 3.7.1.0,
arvioimalla kunkin osallistujan kokonaisenergian keskiarvo kilokaloreina, makro- ja mikroravinteet grammoina.
|
12 viikkoa
|
Arvioidut muutokset ruokavaliosta: 24 tunnin ruokavalion palautus
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Koulutettujen katsastajien tekemä ravinnonsaannin arviointi henkilökohtaisessa haastattelussa käyttäen kolmea 24 tunnin ruokavalion palautusta (24 HR).
Tulokset analysoidaan DIAL®-ohjelmistolla Windowsille, versio 3.7.1.0,
arvioimalla kunkin osallistujan kokonaisenergian keskiarvo kcal, makro- ja mikroravinteet grammoina.
|
12 viikkoa
|
Arvioidut muutokset kiihtyvyysmittauksesta: Fyysisen aktiivisuuden aika
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Fyysisen aktiivisuuden arviointi suoritetaan kiihtyvyysantureilla (suora menetelmä) ranteessa 7 peräkkäisenä päivänä.
Kiihtyvyysantureiden tuottamat tiedot analysoidaan käyttämällä ActiLife 6.6.2 -ohjelmistoa (ActiGraph, Florida, USA), käyttämällä Freedsonin (1998) aikuisille tarkoitettuja rajapisteitä ja Choin validointia.
Ohjelmisto laskee pohjaan kiihtyvyysmittarin kevyen, kohtalaisen ja voimakkaan fyysisen toiminnan ajan liikkeet minuuteissa.
|
12 viikkoa
|
Arvioi muutokset fyysisestä aktiivisuudesta
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Fyysisen aktiivisuuden arviointi arvioidaan osallistujan itsensä ilmoittamalla kansainvälisen fyysisen aktiivisuuden kyselylomakkeen lyhyellä versiolla (IPAQ-SF), joka on aiemmin validoitu Espanjassa.
IPAQ-SF laskee kohtalaisen ja voimakkaan aktiivisuuden minuutteina viikossa.
|
12 viikkoa
|
Arvioitu muutoksia sydän- ja hengityselimistön kuntoon verrattuna
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Maksimi VO2 -testi: Maksimaalisen hapenkulutuksen (VO2max) määrittämiseksi harjoituksen aikana litroina minuutissa suoritetaan asteittainen testi sykloergometrillä (Lode Excalibur, Alankomaat).
Kaasunvaihdon mittaa Jaeger MasterScreen CPX® (CareFusion, San Diego, USA). Testi jatkaa MFO:ta kuormituksesta, kun hengitysosamäärä saavuttaa vakaan arvon 1 tai korkeampi.
Kun tämä piste on saavutettu, 15 watin lisäyksiä tapahtuu joka minuutti, kunnes saavutetaan uupumus, kunnes saavutetaan VO2max.
Koko testin poljinnopeus on 80 rpm. säilytetään.
Syke tallennetaan lyönteinä minuutissa.
|
12 viikkoa
|
Arvioidut muutokset rasvan maksimaalisesta hapetuksesta
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Rasvojen maksimaalinen hapettumistesti (MFO) rasvan maksimaalisen hapettumisen määrittämiseksi harjoituksen aikana (MFO) ja asteittainen testi sykloergometrillä (Lode Excalibur, Alankomaat).
Testi alkaa 15 watin kuormituksella, nostamalla 15 wattia 3 minuutin välein, kunnes hengitysosamäärä saavuttaa vakaan arvon 1 tai korkeampi.
Koko testin poljinnopeus on 80 rpm. säilytetään.
Laskelma uloshengitettyjen kaasujen pohjalta tehdään rasvan hapettumisen arvioimiseksi grammoina minuutissa.
|
12 viikkoa
|
Arvioituja muutoksia itse ilmoittamaan elämänlaatuun
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Itseraportoitu elämänlaatu rekisteröidään käyttämällä lyhyttä lomake 36-terveyskyselyä (SF-36), joka on aiemmin validoitu Espanjassa.
SF-36 on yleinen elämänlaadun mitta, ja sitä on arvioitu useiden sairauksien, mukaan lukien diabeteksen, varalta.
SF-36 sisältää 36 kysymystä, jotka arvioivat 8 ala-asteikkoa. Jokaisen asteikon pisteet vaihtelevat 0-100, korkeammat pisteet osoittavat korkeampaa toiminta- tai hyvinvointitasoa.
Fyysisten komponenttien yhteenveto on johdettu neljästä ala-asteikosta: fyysinen toiminta, fyysinen rooli, kehon kipu ja yleinen terveys; kun taas henkisen komponentin yhteenveto on johdettu elinvoiman, sosiaalisen toiminnan, roolin emotionaalisen ja mielenterveyden ala-asteikoista.
|
12 viikkoa
|
Arvioitu verenpaineen muutokset
Aikaikkuna: 12 viikkoa
|
Systolinen ja diastolinen verenpaine rekisteröidään kolme kertaa käyttämällä validoitua Omron HEM 742 -verenpaineen seurantalaitetta osallistujan istuessa, selkänojan ollessa tuolissa ja jalkojen ollessa lattialla ilman jalkoja ristissä, kun hän on levännyt 5 minuuttia.
Hypertension and Cardiology European Societiesin ja espanjalaisen ohjeistuksen perusteella luokitellaan osallistujien verenpainevaiheet.
|
12 viikkoa
|
Yhteistyökumppanit ja tutkijat
Sponsori
Yhteistyökumppanit
Tutkijat
- Päätutkija: Cristina Casals, PhD, University of Cádiz
- Päätutkija: Jesús Gustavo Ponce González, PhD, University of Cádiz
Opintojen ennätyspäivät
Opi tärkeimmät päivämäärät
Opiskelun aloitus (Todellinen)
Ensisijainen valmistuminen (Odotettu)
Opintojen valmistuminen (Odotettu)
Opintoihin ilmoittautumispäivät
Ensimmäinen lähetetty
Ensimmäinen toimitettu, joka täytti QC-kriteerit
Ensimmäinen Lähetetty (Todellinen)
Tutkimustietojen päivitykset
Viimeisin päivitys julkaistu (Todellinen)
Viimeisin lähetetty päivitys, joka täytti QC-kriteerit
Viimeksi vahvistettu
Lisää tietoa
Tähän tutkimukseen liittyvät termit
Avainsanat
Muita asiaankuuluvia MeSH-ehtoja
Muut tutkimustunnusnumerot
- The EDUGUTION project
Yksittäisten osallistujien tietojen suunnitelma (IPD)
Aiotko jakaa yksittäisten osallistujien tietoja (IPD)?
Lääke- ja laitetiedot, tutkimusasiakirjat
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää lääkevalmistetta
Tutkii yhdysvaltalaista FDA sääntelemää laitetuotetta
Nämä tiedot haettiin suoraan verkkosivustolta clinicaltrials.gov ilman muutoksia. Jos sinulla on pyyntöjä muuttaa, poistaa tai päivittää tutkimustietojasi, ota yhteyttä register@clinicaltrials.gov. Heti kun muutos on otettu käyttöön osoitteessa clinicaltrials.gov, se päivitetään automaattisesti myös verkkosivustollemme .
Kliiniset tutkimukset Sydän-ja verisuonitaudit
-
University of Texas at AustinValmisCardiovascular FitnessYhdysvallat
-
University of Wisconsin, MadisonWisconsin Department of Public InstructionValmisLihavuus | Cardiovascular Fitness
-
San Diego State UniversityArizona State UniversityValmisLiikunta | Cardiovascular FitnessYhdysvallat
-
Ottawa Hospital Research InstituteValmisStressi | Crisis Resource Management (CRM) -taidot | Advanced Cardiovascular Life Support (ACLS) -taidotKanada
Kliiniset tutkimukset Kohtalaisen intensiteetin jatkuva harjoittelu (MICT)
-
University Hospital TuebingenRekrytointi
-
University of CadizMinisterio de Ciencia e Innovación, SpainRekrytointiDiabetes mellitus, tyyppi 2Espanja