Hypertension ja parodontiitin välinen vuorovaikutus

Tutkimukseen osallistui 42 osallistujaa. Tutkimusryhmät koostuivat 20 terveestä yksilöstä, joilla ei ollut aiemmin diagnosoitua systeemistä sairautta (10 parodontiittista tervettä ja 10 parodontiittia) ja 22 potilasta, joilla oli hypertensio (13 parodontaalista tervettä ja 9 parodontiittia). Potilaspopulaatio valittiin satunnaisesti parodontologian klinikalle lähetettyjen potilaiden joukosta. Hypertensiiviset potilaat, joita on seurattu vähintään 5 vuotta, sisällytettiin hypertensioryhmään. Hypertensiopotilaat, joita hoidettiin verenpainelääkkeillä, joiden tiedettiin aiheuttavan ienten liikakasvua, suljettiin pois tutkimuksesta.

Muita poissulkemiskriteereitä olivat diabetes mellitus, korkeat kolesterolitasot, sydän- ja verisuonitauti ja muiden lääkkeiden kuin verenpainelääkkeiden käyttö. Kalibroitu tutkija suoritti kattavan parodontaalitutkimuksen, joka sisälsi plakkiindeksin (Silness & Loe, 1964) (PI), ienindeksin (Loe & Silness, 1963) (GI), koetussyvyyden (PD), kliinisen kiinnittymistason (CAL) ja verenvuodon luotaus (BOP). Mittaukset tehtiin kuudesta kohdasta hammasta kohden (mesio-bukkaalinen, mid-buccal, disto-buccal, mesio-lingual, mid-lingual ja disto-lingual) käyttäen parodontaalianturia (Williams periodontal probe, Nordent Manufacturing, Elk Grove Village, IL., USA) Tutkijan sisäisen kalibroinnin suorittamiseksi PD ja CAL mitattiin kahdesti kuudesta kohdasta kustakin hampaasta 24 tunnin sisällä. Tutkijan sisäinen sopimus oli vähintään 90 % sekä PD:n että CAL:n osalta 1 mm:n sisällä. Kliiniset indeksit kirjannut tutkija oli sokeutunut potilaiden systeemisestä tilasta, ja potilaiden parodontaalihoidosta vastuussa olevat parodontologit eivät olleet sokeutuneet verenpainepotilaille sovelletun anestesian ja tarvittavien varotoimien vuoksi.

Tutkimusjakson aikana potilaita ohjeistettiin olemaan käyttämättä paikallisia/systeemisiä antibiootteja ja mikrobilääkkeitä. Potilailla, joilla oli diagnosoitu parodontiitti, oli II-vaiheen parodontiitti yleistyneenä 3-4 mm:n mittaussyvyydellä. Diagnoosi tehtiin kriteerien perusteella, jonka mukaan suurin mittaussyvyys ≤5 mm, enimmäkseen vaakasuora häviö ja >30 % hampaista. Terve parodontiumin todettiin olevan BOP≤10 % ja PD≤3 mm. GCF-näytteenottoa varten valittiin neljä syvintä ei-viereisten yksijuuristen hampaiden taskua. Osallistujat jaettiin neljään ryhmään; terveet koehenkilöt, joilla on terve parodontaalinen tila (kontrolli), terveet koehenkilöt, joilla on parodontiitti (CP), hypertensiopotilaat, joilla on parodontiitti (CP + HP) ja hypertensiopotilaat, joilla on terve parodontaalinen tila (HP). Paikallinen eettinen komitea hyväksyi tutkimuksen (291208/11), ja kaikki potilaat allekirjoittivat tietoisen suostumuslomakkeen. Poissulkemiskriteereinä olivat tupakointi, raskaus, todettu sekundaarinen hypertensiodiagnoosi, muut systeemiset sairaudet ja aikaisempi parodontaali- ja/tai antibioottihoito viimeisen kuuden kuukauden aikana. Kaikki parodontiittipotilaat saivat vaiheen I parodontaalihoitoa, mukaan lukien suun hygieniaohjeet (OHI) ja skaalaus/juurisuunnittelu (SRP) ilman antimikrobista hoitoa. GCF- ja sylkinäytteet otettiin ja kliiniset mittaukset suoritettiin lähtötilanteessa (ennen hoitoa (BT) ja neljä viikkoa faasin I parodontaalihoidon (AT) jälkeen). Vaiheen I hoidon aikajana (2 viikon sisällä perustutkimuksesta 4 päivää). Ensisijaiset biokemialliset tulosmittaukset sisälsivät syljen ja GCF IL-6:n ja CRP:n, ja primaariset periodontaaliset tulosmittaukset olivat PI, GI, PD, CAL ja BOP. Toissijainen tulosmitta oli GCF:n tilavuus.

GCF- ja sylkinäytteenotto ja käsittely GCF-näytteenottopaikka ilmakuivattiin varovasti ja supragingivaalinen plakki poistettiin.

Alue eristettiin huolellisesti puuvillarullilla kontaminoitumisen estämiseksi.

Standardoituja paperiliuskoja (Periopaper, Pro Flow, Amityville, NY, USA) työnnettiin uurteeseen, kunnes tunsi pientä vastusta, ja jätettiin paikoilleen 30 sekunniksi. Verenvuodon tai eritteiden saastuttamat liuskat heitettiin pois. GCF-tilavuudet määritettiin aiemmin kuvatulla tavalla. GCF:n määrän määrittämiseksi käytettiin elektronista vaakaa paperiliuskojen punnitsemiseen ennen keräämistä ja välittömästi keräyksen jälkeen. Jokaisen liuskan nesteen massa (mg) muunnettiin tilavuudeksi millimetreinä olettaen, että GCF:n tiheys oli 1. Liuskat asetettiin koodattuihin mikrosentrifugiputkiin ja säilytettiin -800 °C:ssa käsittelyyn asti. Ennen biokemiallista analyysiä paperiliuskat asetettiin 0,1 % naudan seerumin albumiini/fosfaattipuskuroituun suolaliuokseen Eppendorf-putkiin ja paperiliuskasta saatu neste eluoitiin sentrifugoimalla 6 minuuttia 5000 · g 4 C:ssa. Sentrifugoinnin jälkeen nauhat poistettiin. Osallistujia pyydettiin lopettamaan syöminen ja juominen 2 tuntia ennen jokaista näytteenottoa. Heitä neuvottiin huuhtelemaan suunsa 30 sekunnin ajan 10 ml:lla vettä ja lepäämään 2 minuuttia ennen kuin stimuloimaton sylki kerättiin sylkemällä. Noin 1 ml stimuloimatonta kokonaista sylkeä kerättiin Eppendorf-putkiin. Näytteitä sentrifugoitiin 10 minuuttia nopeudella 15 000 x g 4 °C:ssa kaikkien hiukkasten poistamiseksi. Supernatantit säilytettiin -20 °C:ssa analysointiin asti.

GCF- ja sylkientsyymi-immunosorbenttimääritys (ELISA) -analyysi IL-6:lle ja CRP:lle IL-6:n ja CRP:n tasot GCF:ssä ja syljessä mitattiin käyttämällä sandwich-ELISA-sarjaa (Biosource, Invitrogen Corporation, Carlsbad, California 92008). ELISA-menettelyt suoritettiin valmistajan ohjeiden mukaisesti. Tulokset ilmaistiin pg/ml:na. Kokonaismäärät laskettiin myös kertomalla pitoisuudet ja CRP-tilavuudet.