Ezt az oldalt automatikusan lefordították, és a fordítás pontossága nem garantált. Kérjük, olvassa el a angol verzió forrásszöveghez.

Farmakodinámiás vizsgálat a neutrofilek eloszlási kinetikájának és funkciójának értékelésére egyetlen dózisú RoActemra/Actemra (Tocilizumab) után egészséges önkénteseknél

2015. október 14. frissítette: Hoffmann-La Roche

Egyszeri vak IV. fázisú farmakodinámiás vizsgálat a neutrofilek eloszlási kinetikájának és funkciójának értékelésére az egyszeri tocilizumab-kezelést követően egészséges alanyoknál

Ez a IV. fázisú, egy-vak, randomizált, kétkarú vizsgálat a RoActemra/Actemra (tocilizumab) farmakodinamikai hatásait vizsgálja a neutrofilek újraeloszlására, funkciójára és túlélésére egészséges alanyokban. Az alanyok vagy egyszeri adag intravénás (IV) RoActemra/Actemra-t kapnak 8 mg/ttkg dózisban egy óra alatt a vizsgálat 0. napján, vagy placebót. A neutrofil kinetikai adatokat minden alanyról gyűjtik a vizsgálat 10. napjáig. A 10. napon az utolsó tanulmányi látogatást követően minden alany két további biztonsági ellenőrzésen vesz részt a 28. és az 56. napon.

A tanulmány áttekintése

Állapot

Befejezve

Körülmények

Beavatkozás / kezelés

Tanulmány típusa

Beavatkozó

Beiratkozás (Tényleges)

18

Fázis

  • 4. fázis

Kapcsolatok és helyek

Ez a rész a vizsgálatot végzők elérhetőségeit, valamint a vizsgálat lefolytatásának helyére vonatkozó információkat tartalmazza.

Tanulmányi helyek

Részvételi kritériumok

A kutatók olyan embereket keresnek, akik megfelelnek egy bizonyos leírásnak, az úgynevezett jogosultsági kritériumoknak. Néhány példa ezekre a kritériumokra a személy általános egészségi állapota vagy a korábbi kezelések.

Jogosultsági kritériumok

Tanulmányozható életkorok

18 év (Felnőtt, Idősebb felnőtt)

Egészséges önkénteseket fogad

Nem

Tanulmányozható nemek

Férfi

Leírás

Bevételi kritériumok:

  • 18 és 65 év közötti férfi
  • A szűrővizsgálatok alapján egészséges
  • Testtömegindex (BMI) 18-30 kg/m2, beleértve
  • Nemdohányzó
  • Hozzá kell járulnia a spermiciddel kiegészített, barrier-elvű fogamzásgátlási módszer alkalmazásához a kezelés ideje alatt és legalább 150 napig a vizsgált gyógyszer utolsó adagja után

Kizárási kritériumok:

  • Részvétel klinikai vizsgálatban egy vizsgált gyógyszerrel az adagolás előtt 3 hónapon belül vagy legalább 5 felezési időn belül (amelyik hosszabb)
  • Jelenlegi vagy múltbeli dohányzás 6 hónapon belül
  • Terápiás monoklonális antitestekkel való korábbi expozíció a szűrést megelőző elmúlt 6 hónapban
  • Bármely olyan állapot jelenlegi vagy klinikailag jelentős anamnézisében, amely a vizsgáló véleménye szerint: indokolatlan kockázatnak tenné ki az alanyt; érvényteleníteni a tájékozott beleegyezés megadását; zavarja a PK vagy PD adatokat; vagy akadályozza az alany képességét a vizsgálat befejezésére
  • Súlyos allergiás vagy anafilaxiás reakciók a kórtörténetben humanizált vagy egér monoklonális antitestekkel szemben
  • bármilyen visszatérő fertőzés; antibiotikus kezelést igénylő fertőzés az adagolást megelőző 6 hétben; mononukleózis az adagolást megelőző 6 hónapban; ismert HIV, Hepatitis B vagy Hepatitis C; vagy a szűrés idején aktív fertőzés
  • Aktív tuberkulózis (TB), amely kezelést igényel az elmúlt 3 évben.
  • Aktív rosszindulatú betegség, az elmúlt 10 évben diagnosztizált rosszindulatú daganatok (kivéve a kimetszett és gyógyított bazálissejtes bőrrák) vagy az elmúlt 20 évben diagnosztizált mellrák
  • Primer vagy másodlagos immunhiány
  • Autoimmun betegség
  • Használat vagy függőség a visszaélés anyagától
  • Alkohollal való visszaélés vagy napi 2 egységnél nagyobb átlagos heti bevitel
  • Szűrés vagy kiindulási nyugalmi pulzusszám < 45 vagy >90 ütés percenként
  • Nagy műtét a szűrést megelőző 8 héten belül
  • Súlyos betegség az adagolást megelőző 3 hónapban
  • Epeúti elzáródás
  • Divertikulitisz jelenlegi vagy korábbi anamnézisében

Tanulási terv

Ez a rész a vizsgálati terv részleteit tartalmazza, beleértve a vizsgálat megtervezését és a vizsgálat mérését.

Hogyan készül a tanulmány?

Tervezési részletek

  • Kiosztás: Véletlenszerűsített
  • Beavatkozó modell: Párhuzamos hozzárendelés
  • Maszkolás: Egyetlen

Fegyverek és beavatkozások

Résztvevő csoport / kar
Beavatkozás / kezelés
Placebo Comparator: Placebo
Drog: placebo
Egyetlen i.v. infúzió
Kísérleti: RoActemra/Actemra
Drog: tocilizumab [RoActemra/Actemra]
Egyszeri 8 mg/kg i.v. infúzió

Mit mér a tanulmány?

Elsődleges eredményintézkedések

Eredménymérő
Intézkedés leírása
Időkeret
Neutrophil újraeloszlási elemzés a 4. napon (Neutrophil Nadir)
Időkeret: 4. nap
A 4. napon a résztvevőknél 100 milliliter (ml) sav-citrát dextróz (ACD) antikoagulált autológ vénás vérből neutrofileket izoláltak, és autológ plazmában legfeljebb 2,5 megabecquerel (MBq) 111-indium (111In)-tropolonáttal jelöltek meg, mielőtt lennének. újrainjekciózva. A résztvevők 45 percig (perc) pihentek az injekció beadása után, hogy lehetővé tegyék a neutrofil egyensúlyt a keringő és a marginális neutrofil pool között. A teljes test profilozását egy erősen árnyékolt, dedikált teljes test számlálóban végezték el 2 rendkívül érzékeny szcintillációs detektorral, a rögzített számokat a 111In fizikai bomlásával korrigálva, hogy lehetővé tegyék a TCZ hatásának mérését a neutrofilek normál újraeloszlási mintázatára és a a neutrofilek határvonala TCZ jelenlétében. A radioaktívan jelölt neutrofilek megoszlása ​​a 4. napon (45 perccel az újrainjekció után) a vérben, a májban/lépben és a medence csontvelőjében, a teljes testszám (TBC) százalékában kifejezve.
4. nap
Neutrophil újraeloszlási elemzés az 5. napon
Időkeret: 5. nap
A 4. napon a résztvevők neutrofiljeit izolálták 100 ml ACD-alvadásgátló autológ vénás vérből, és legfeljebb 2,5 MBq 111In-tropolonáttal jelölték őket, mielőtt újrainjekciózták őket. A résztvevők az injekció beadása után 45 percig pihentek, hogy biztosítsák a neutrofil egyensúlyt a keringő és a marginális neutrofil pool között. A teljes test profilozását egy erősen árnyékolt, dedikált teljes test számlálóban végezték el 2 rendkívül érzékeny szcintillációs detektorral, a rögzített számokat a 111In fizikai bomlásával korrigálva, hogy lehetővé tegyék a TCZ hatásának mérését a neutrofilek normál újraeloszlási mintázatára és a a neutrofilek határvonala TCZ jelenlétében. A radioaktívan jelölt neutrofilek megoszlását és a csúcsszámokat az 5. napon (24 órával az újrainjekció után) a májban/lépben és a medencecsontvelőben korrigáltuk, és a 4. nap százalékában fejeztük ki (45 perccel az újrainjekció után).
5. nap
Neutrophil újraeloszlási elemzés a 10. napon
Időkeret: 10. nap
A 4. napon a résztvevők neutrofiljeit izolálták 100 ml ACD-alvadásgátló autológ vénás vérből, és legfeljebb 2,5 MBq 111In-tropolonáttal jelölték őket, mielőtt újrainjekciózták őket. A résztvevők az injekció beadása után 45 percig pihentek, hogy biztosítsák a neutrofil egyensúlyt a keringő és a marginális neutrofil pool között. A teljes test profilozását egy erősen árnyékolt, dedikált teljes test számlálóban végezték el 2 rendkívül érzékeny szcintillációs detektorral, a rögzített számokat a 111In fizikai bomlásával korrigálva, hogy lehetővé tegyék a TCZ hatásának mérését a neutrofilek normál újraeloszlási mintázatára és a a neutrofilek határvonala TCZ jelenlétében. A radioaktívan jelölt neutrofilek megoszlását és a csúcsértékeket a 10. napon (6 nappal az újrainjekció után) a májban/lépben és a medence csontvelőjében korrigáltuk, és a 4. napon (45 perccel az újrainjekció után) százalékos arányban fejeztük ki.
10. nap
Neutrophil fagocitózis: az eFluor670-pozitív (eFluoro670+) neutrofilek százalékos arányának változása az alapvonalról Nadirra (4. nap)
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofil fagocitózist áramlási citometriával értékeltük eFluor670-gyel jelölt, hővel elölt Staphylococcus pneumonia (S.pneumonia) baktériumok felhasználásával. A fagocitózist a fagocitált baktériumokat tartalmazó neutrofilek eFluor670 fluoreszcenciájának mérésével határoztuk meg. A kísérleteket csak neutrofilekkel (PMN), PMN plusz S. pneumonia 4°C-on (C) (a PMN sejtfelszínhez való nem specifikus bakteriális tapadásának ellenőrzésére), valamint PMN plusz S. pneumonia 37°C-on végezték. . Az eFluor670+ neutrofilek százalékos változását a kiindulási értékhez képest a 4. napon számítottuk ki.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil fagocitózis: Az eFluor670+ neutrofilek medián fluoreszcencia intenzitása (MFI) változása a kiindulási értékről a Nadirra (4. nap)
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofil fagocitózist áramlási citometriával értékeltük, hővel elölt, eFluor670-nel jelölt Staphylococcus pneumonia baktériumokat alkalmazva. A fagocitózist a fagocitált baktériumokat tartalmazó neutrofilek eFluor670 fluoreszcenciájának mérésével határoztuk meg. A kísérleteket csak neutrofilek (PMN) alkalmazásával végeztük, PMN plusz S. pneumonia 4 ˚C-on (a nem specifikus baktériumok PMN sejtfelszínhez való tapadásának szabályozására), és PMN plusz S. pneumonia 37 ˚C-on. Az eFluor670+ MFI alapvonalhoz viszonyított változását a 4. napon számítottuk ki.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil légúti robbanás: Változás az alapvonalról Nadirra (4. nap) a reaktív oxigénfajták termelésében, kemilumineszcenciával mérve (relatív fényegységek – abszolút érték)
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofilek reaktív oxigénfajták (ROS) segítségével légúti robbanást hoznak létre, hogy megöljék a behatoló kórokozókat. Amikor luminolt használnak a ROS szubsztrátumaként, kémiai reakció lép fel, ami foton-emissziót (kemilumineszcenciát) eredményez az aktivált és nem aktivált neutrofilekben a formil-metionil-leucil-fenilalanin (fMLP) stimulációját követően, amely mennyiségileg meghatározható. A légúti robbanás fMLP-stimulációja a nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát (NADPH) oxidáz aktiválásán keresztül valósul meg a feltöltött neutrofilekben. A maximális fMLP-választ beindított neutrofilekben figyelték meg, és a neutrofilek patogén ingerekre adott válaszképességének ex vivo mértéke. A jelenlegi kísérletekben a neutrofileket tumor nekrózis faktor alfa-val (TNFα) alapoztuk meg. A fénykibocsátást luminométerrel rögzítettük. A 4. napon a ROS-termelésben az alapvonalhoz képest abszolút változást jelentettek.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil túlélés: Az apoptotikus neutrofilek százalékos arányának változása az alapvonalról a nadirra (4. nap) a mikroszkópos morfológiával mérve
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofil apoptózist mikroszkópos módszerrel mértük Diff-Quik-kal (módosított Wright Giemsa festéssel) festett tárgylemezekkel, a morfológiát pedig olajimmerziós fénymikroszkóppal, 100-szoros nagyítással. A neutrofilek konstitutíven apoptózison mennek keresztül ex vivo tenyésztéskor, és ez késleltethető olyan szerek hozzáadásával, mint a granulocita-makrofág kolóniastimuláló faktor (GM-CSF) vagy a TNFα. Az apoptotikus neutrofileket az életképes neutrofilekhez képest sötét és piknotikus sejtmagokkal jellemeztük. Az apoptotikus neutrofilek százalékos arányában a 4. napon mikroszkóppal mért változást jelentenek az alapvonalhoz képest.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil túlélés: Az áramlási citometriával mért apoptotikus neutrofilek százalékos változása az alapvonalról a nadirra
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
Az öregedő neutrofilek az apoptózis korai szakaszában a foszfatidil-szerint a plazmamembrán belső szórólapjáról a külső levélbe helyezik át. Ez a transzlokáció az Annexin V (AV) affinitása miatt mérhető a kitett foszfatidil-szerinhez. A propidium-jodid (PI) általában membránt át nem eresztő, de késői apoptózisban jut be a sejtekbe, amikor a plazmamembránjuk szivárog. A neutrofilek konstitutíven apoptózison mennek keresztül ex vivo tenyésztéskor, és ez késleltethető olyan szerek hozzáadásával, mint a granulocita-makrofág kolóniastimuláló faktor (GM-CSF) vagy a TNFα. Az apoptózist áramlási citometriával, fluoreszcein-izocianáttal jelölt rekombináns humán AV (AV-FITC) és PI festéssel értékeltük, és közölték az áramlási citometriával mért apoptotikus neutrofilek százalékos változását az alapvonalhoz képest a 4. napon.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil morfológia: Az áramlási citometriával mért alakváltozással mért neutrofilek számának változása az alapvonalról Nadirra
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofilek alakváltozása a neutrofilek kemotaktikus képességét jelzi, hogy reagáljanak a gyulladásos helyekre és vándoroljanak oda. A neutrofilek alakváltozásának meghatározásához friss (0 perc kontroll), foszfáttal pufferolt sóoldat (PBS) kontroll (30 perces kontroll) és formil-metionil-leucil-fenilalanin (fMLP) stimulált (30 perc fMLP) PMN-ek (5×-nél) 10^6 PMN/milliliter [ml]) CellFIX-szel fixáltuk (szerves oldószert használtak fixálószerként a tapadó sejtekhez), 90 mikrolitert (μL) vittünk át minden mintacsőbe, és hideg PBS-t adtunk hozzá a további reakció leállítására. Az alakváltozást az áramlási citometrián az előre szóródás (FSC) mérésével értékeltük. A neutrofilek számában a kiindulási értékhez képest változást jelentettek alakváltozással a 4. napon.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil morfológia: Változás az alapvonaltól a nadirig (4. nap) a neutrofilek százalékos arányában áramlási citometriával (FSC-High Cells) mért alakváltozással
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofilek alakváltozása a neutrofilek kemotaktikus képességét jelzi, hogy reagáljanak a gyulladásos helyekre és vándoroljanak oda. A neutrofil alakváltozás meghatározásához friss (0 perces kontroll), PBS-kontroll (30 perces kontroll) és fMLP-stimulált (30 perces fMLP) PMN-eket (5 × 10^6 PMN/ml-nél) CellFIX-szel rögzítettünk, 90 μL-t vittünk át. minden mintacsőbe, és hideg PBS-t adunk a további reakció leállítására. Az alakváltozást az FSC áramlási citometriás mérésével értékeltük. A neutrofilek százalékos arányában a kiindulási értékhez képest változást jelentettek alakváltozással a 4. napon.
Alaphelyzet, 4. nap
Neutrophil morfológia: Változás az alapvonaltól a nadirig (4. nap) a neutrofilek százalékos arányában alakváltozással, mikroszkópos morfológiával mérve
Időkeret: Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofilek alakváltozása a neutrofilek kemotaktikus képességét jelzi, hogy reagáljanak a gyulladásos helyekre és vándoroljanak oda. A neutrofil alakváltozás meghatározásához friss (0 perces kontroll), PBS-kontroll (30 perces kontroll) és fMLP-stimulált (30 perces fMLP) PMN-eket (5 × 10^6 PMN/ml-nél) CellFIX-szel rögzítettünk, 90 μL-t vittünk át. minden mintacsőbe, és hideg PBS-t adunk a további reakció leállítására. Az alakváltozást mikroszkóppal határoztuk meg a megváltozott alaknak minősített neutrofilekkel, ha több mint 1 sejtfelszíni foltot vagy szabálytalanságot tartalmaztak, és a neutrofilek százalékos arányában a kiindulási értékhez képest változást jelentettek alakváltozással a 4. napon.
Alaphelyzet, 4. nap
A neutrofil adhéziós molekulák abszolút medián fluoreszcencia intenzitása
Időkeret: 4. nap
A neutrofilek felszíni receptor expressziója felhasználható a neutrofilek aktivációs állapotának jellemzésére. Friss (0 perc), PBS-kontroll (30 perc) és fMLP-stimulált (30 perc) PMN-eket (5 × 10^6 PMN/ml) fixáltunk CellFIX-szel, és 90 μL-t vittünk át minden antitestkeveréket tartalmazó csőbe (2 μL-es klaszter). differenciálódás [CD] 11b-brilliáns ibolya (BV) 421, 2 μL CD16-FITC, 5 μL CD62L-allophycocyanin (APC) és 5 μL CD162-fikoeritrin [PE]) vagy egyenértékű térfogatú izotípus kontroll keverék. 30 perces jégen és sötétben végzett inkubálás után hideg PBS-t adtunk hozzá a további reakció leállítására. A felszíni markerek expresszióját áramlási citometriával határoztuk meg.
4. nap

Együttműködők és nyomozók

Itt találhatja meg a tanulmányban érintett személyeket és szervezeteket.

Szponzor

Hoffmann-La Roche

Tanulmányi rekorddátumok

Ezek a dátumok nyomon követik a ClinicalTrials.gov webhelyre benyújtott vizsgálati rekordok és összefoglaló eredmények benyújtásának folyamatát. A vizsgálati feljegyzéseket és a jelentett eredményeket a Nemzeti Orvostudományi Könyvtár (NLM) felülvizsgálja, hogy megbizonyosodjon arról, hogy megfelelnek-e az adott minőség-ellenőrzési szabványoknak, mielőtt közzéteszik őket a nyilvános weboldalon.

Tanulmány főbb dátumok

Tanulmány kezdete

2014. május 1.

Elsődleges befejezés (Tényleges)

2014. december 1.

A tanulmány befejezése (Tényleges)

2014. december 1.

Tanulmányi regisztráció dátumai

Először benyújtva

2013. november 18.

Először nyújtották be, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2013. november 18.

Első közzététel (Becslés)

2013. november 25.

Tanulmányi rekordok frissítései

Utolsó frissítés közzétéve (Becslés)

2015. november 11.

Az utolsó frissítés elküldve, amely megfelel a minőségbiztosítási kritériumoknak

2015. október 14.

Utolsó ellenőrzés

2015. október 1.

Több információ

A tanulmányhoz kapcsolódó kifejezések

Egyéb vizsgálati azonosító számok

  • WA29049

Ezt az információt közvetlenül a clinicaltrials.gov webhelyről szereztük be, változtatás nélkül. Ha bármilyen kérése van vizsgálati adatainak módosítására, eltávolítására vagy frissítésére, kérjük, írjon a következő címre: register@clinicaltrials.gov. Amint a változás bevezetésre kerül a clinicaltrials.gov oldalon, ez a webhelyünkön is automatikusan frissül. .

Klinikai vizsgálatok a Egészséges önkéntes

Keressen hasonló próbaverziókban

Szponzorok és közreműködők

Egészségi állapot

Kábítószer-beavatkozások

CROs by country

CROs in Kuwait

Körülmények

Ritka betegségek

Kábítószer-beavatkozások

Táplálék-kiegészítők

Szponzor / közreműködők

Helyek

3
Iratkozz fel