National Psoriasis Foundation - Studio sui biomarcatori della proteina transmembrana specifica per cellule dendritiche (timbro DC)

L'artrite psoriasica (PsA), una malattia fenotipicamente eterogenea, è caratterizzata da un danno articolare osservato in oltre la metà dei pazienti con malattia precoce. Mentre gli agenti del fattore di necrosi antitumorale (TNF) hanno notevolmente migliorato segni e sintomi e ridotto il danno articolare, il fatto che solo una frazione dei pazienti raggiunga la remissione completa sottolinea l'enorme bisogno insoddisfatto di questa popolazione. Ad oggi, non è stato identificato un biomarcatore che possa stratificare i pazienti per gravità e che possa fungere da indicatore principale della risposta al trattamento.

Il nostro laboratorio ha dimostrato che i precursori degli osteoclasti circolanti (OCP) sono elevati nei pazienti con PsA. L'OCP diminuisce rapidamente dopo la terapia anti-TNF e i livelli sono più alti nei soggetti con artrite erosiva rispetto a quelli senza alterazioni radiografiche. Gli OCP derivano da monociti CD14+ e il dosaggio richiede tecniche di coltura costose, costose e ad alta intensità di manodopera. Abbiamo sviluppato un anticorpo (1A2) contro la proteina transmembrana specifica delle cellule dendritiche (DC-STAMP), un potenziale marcatore della popolazione OCP, per l'analisi mediante citometria a flusso. Abbiamo scoperto che: 1) il livello di espressione di monociti DC-STAMP era correlato alla formazione di osteoclasti in vitro; 2) l'espressione di DC-STAMP è significativamente elevata in PBMC da soggetti PsA rispetto ai controlli; 3) il TNF ha notevolmente sovraregolato l'espressione di DC-STAMP in vitro; 4) l'espressione superficiale di DC-STAMP è diminuita dopo la terapia anti-TNF; 5) sottoinsiemi di cellule CD3+ esprimono anche DC-STAMP sulla membrana cellulare. Sulla base di questi dati preliminari, vengono proposte tre ipotesi:

1. Le cellule DC-STAMP+ CD3+ T appartengono al sottoinsieme Th17 che facilita la generazione di OC;
2. DC-STAMP è un marker della gravità della malattia nella PsA;
3. DC-STAMP è un biomarcatore della risposta al trattamento nella PsA.

Proponiamo tre Obiettivi Specifici per testare queste ipotesi.

Obiettivo 1 Per verificare se le cellule DC-STAMP+CD3+ appartengano al sottogruppo di cellule Th17, le PBMC saranno colorate con anticorpi specifici per Th17 in soggetti affetti da PsA con elevata espressione di DC-STAMP. Esamineremo anche il ruolo delle cellule T nell'osteoclastogenesi direttamente mediante esperimenti di co-coltura e utilizzeremo colture di monociti senza aggiunta di linfociti come controlli. L'espressione di DC-STAMP sulle cellule dendritiche circolanti sarà esaminata ex vivo mediante citometria a flusso a 11 colori.

Obiettivo 2 Determinare se l'aumentata espressione di DC-STAMP è associata a caratteristiche più gravi di PsA, l'espressione di DC-STAMP in 40 soggetti affetti da PsA sarà determinata e correlata con variabili cliniche di artrite e malattie della pelle, CRP e danni da raggi x.

Obiettivo 3 Per esaminare se DC-STAMP è un marcatore di risposta al trattamento anti-TNF, recluteremo 20 pazienti con PsA nell'obiettivo 2 con elevata espressione di DC-STAMP e li divideremo in 2 gruppi. Dieci soggetti riceveranno metotrexato e dieci riceveranno terapia anti-TNF. La correlazione tra le variabili DC-STAMP (percentuale di 1A2+ divisa per 1A2 - cellule X 100) e le variabili dettagliate nell'Obiettivo 2 saranno analizzate in questi 2 gruppi di trattamento in 2 diversi punti temporali.