Fundação Nacional de Psoríase - Estudo de Biomarcador de Proteína Transmembrana Específica de Células Dendríticas (DC-Stamp)

A Artrite Psoriática (APs), uma doença fenotipicamente heterogênea, é caracterizada por dano articular observado em mais da metade dos pacientes com doença inicial. Embora os agentes do fator de necrose tumoral (TNF) tenham melhorado muito os sinais e sintomas e diminuído o dano articular, o fato de apenas uma fração dos pacientes atingir a remissão completa ressalta a enorme necessidade não atendida dessa população. Até o momento, não foi identificado um biomarcador que possa estratificar os pacientes por gravidade e servir como um indicador importante da resposta ao tratamento.

Nosso laboratório demonstrou que os precursores de osteoclastos circulantes (OCP) estão elevados em pacientes com APs. OCP diminui rapidamente após a terapia anti-TNF e os níveis são mais elevados em indivíduos com artrite erosiva em comparação com aqueles sem alterações de raios-x. Os OCP são derivados de monócitos CD14+ e o ensaio envolve técnicas de cultura que são caras, caras e trabalhosas. Desenvolvemos um anticorpo (1A2) para Proteína Transmembrana Específica de Células Dendríticas (DC-STAMP), um potencial marcador da população de OCP, para análise por citometria de fluxo. Descobrimos que: 1) o nível de expressão de monócitos DC-STAMP correlacionou-se com a formação de osteoclastos in vitro; 2) a expressão de DC-STAMP é significativamente elevada em PBMC de indivíduos com PsA em comparação com controles; 3) o TNF aumentou dramaticamente a expressão de DC-STAMP in vitro; 4) a expressão de DC-STAMP na superfície diminuiu após a terapia anti-TNF; 5) subconjuntos de células CD3+ também expressam DC-STAMP na membrana celular. Com base nesses dados preliminares, três hipóteses são propostas:

1. As células DC-STAMP+ CD3+ T pertencem ao subconjunto Th17 que facilita a geração de OC;
2. DC-STAMP é um marcador de gravidade da doença na APs;
3. DC-STAMP é um biomarcador de resposta ao tratamento em APs.

Propomos três Objetivos Específicos para testar essas hipóteses.

Objetivo 1 Para examinar se as células DC-STAMP+CD3+ pertencem ao subconjunto de células Th17, as PBMC serão coradas com anticorpos específicos para Th17 em indivíduos PsA com expressão elevada de DC-STAMP. Também examinaremos o papel das células T na osteoclastogênese diretamente por experimentos de co-cultura e usaremos culturas de monócitos sem adição de linfócitos como controles. A expressão de DC-STAMP em células dendríticas circulantes será examinada ex vivo com citometria de fluxo de 11 cores.

Objetivo 2 Para determinar se a expressão aumentada de DC-STAMP está associada a características mais graves de PsA, a expressão de DC-STAMP em 40 indivíduos com PsA será determinada e correlacionada com variáveis ​​clínicas de artrite e doenças de pele, PCR e danos por raios-x.

Objetivo 3 Para examinar se o DC-STAMP é um marcador de resposta ao tratamento anti-TNF, recrutaremos 20 pacientes com PsA no Objetivo 2 com expressão elevada de DC-STAMP e os dividiremos em 2 grupos. Dez indivíduos receberão metotrexato e dez receberão terapia anti-TNF. A correlação entre as variáveis ​​DC-STAMP (porcentagem de 1A2+ dividida por 1A2 - células X 100) e as variáveis ​​detalhadas no Objetivo 2 serão analisadas nestes 2 grupos de tratamento em 2 momentos diferentes.