Effetto di una dose singola di colecalciferolo sulla concentrazione sierica di 25-idrossivitamina D e macrofagi

3.4.1 Farmaco in studio (vitamina D/placebo): i pazienti verranno bloccati randomizzati in uno dei quattro gruppi utilizzando un'assegnazione bilanciata. Il numero target di pazienti è 20, con cinque pazienti che hanno completato con successo tutte le valutazioni in ciascun gruppo. I gruppi saranno chiusi all'iscrizione una volta raggiunto il loro obiettivo. Il reclutamento continuerà finché ogni gruppo non avrà raggiunto il proprio obiettivo. La farmacia investigativa preparerà ogni dosaggio in base alla randomizzazione e conserverà la chiave del dosaggio.

I partecipanti e gli investigatori saranno accecati da coloro che ricevono colecalciferolo che arriva in 50.000 UI. capsule dosatrici e quelli che ricevono un placebo. I partecipanti saranno randomizzati a 1 di 4 dosi come descritto di seguito. Tutti i partecipanti riceveranno lo stesso numero di capsule. Cinque partecipanti saranno in ciascun gruppo e verranno dosati secondo il seguente schema di dosaggio:

Tabella 1: schema di dosaggio

Gruppo di dosaggio del colecalciferolo

Controllo: 0 capsule di colecalciferolo 4 capsule di placebo

50.000 U.I.: 1 capsula di colecalciferolo 3 capsule di placebo

100.000 UI: 2 capsule di colecalciferolo 2 capsule di placebo

200.000 UI: 4 capsule di colecalciferolo 0 capsule di placebo

3.4.2. Misurazione dello spessore della pelle: tutti i siti di test saranno valutati per il rossore. Lo spessore della pelle verrà anche misurato utilizzando un micrometro prima e dopo l'esposizione ai raggi UV.

3.4.3. MED/Sunburn Test: questa procedura comporta l'esposizione di otto aree di 6 mm di pelle a dosi crescenti di radiazione solare simulata (SSR), mentre il resto del corpo è coperto. L'SSR viene fornito da una lampada ad arco allo xeno da 1.000 Watt, che emette lunghezze d'onda ultraviolette da 290 a 400 nm, molto simili alla luce solare naturale. La dose minima di eritema (MED) sarà determinata circa 24 ore dopo l'esposizione iniziale utilizzando un cromatimetro che registra i valori di arrossamento associati a ciascuna area esposta di 1 cm. Verranno valutate le differenze complessive di MED tra i soggetti.

3.4.4. Esposizione ai raggi UV: questa procedura comporta l'esposizione di quattro aree di 6 mm di pelle a dosi crescenti di radiazione solare simulata (SSR), mentre il resto del corpo è coperto. L'SSR viene fornito da una lampada ad arco allo xeno da 1.000 Watt, che emette lunghezze d'onda ultraviolette da 290 a 400 nm, molto simili alla luce solare naturale. I siti da esporre saranno dosati come segue: 1 MED, 2 MED, 3 MED, 3 MED. Due siti saranno esposti per questo studio, uno prima della somministrazione del farmaco in studio e uno dopo la somministrazione del farmaco in studio.

3.4.5. Prelievo di sangue: i campioni verranno prelevati mediante prelievo venoso per fornire campioni per l'analisi del 25OHD sierico e dei macrofagi.

• Siero 25OHD e 1,25(OH): verranno prelevati fino a 6 ml di sangue per misurare il 25OHD e inviati a Heartland Assays, LLC.
• Siero in banca: fino a 30 ml di siero di sangue verranno raccolti e conservati nel laboratorio di ricerca di dermatologia e verranno quindi analizzati con il raccolto di macrofagi.
• Raccolta dei macrofagi: la raccolta una tantum fino a 180 ml di sangue intero verrà elaborata e purificata per isolare i macrofagi del sangue periferico nel laboratorio di ricerca di dermatologia.

3.4.6. Punch biopsy (campione di tessuto): una biopsia punch è la rimozione di un piccolo cerchio di pelle (delle dimensioni di una gomma da matita) utilizzando uno strumento simile a un tagliabiscotti. Questa procedura prevede l'intorpidimento dell'area designata della pelle con lidocaina e la rimozione di un cerchio di pelle. Prima di ottenere la biopsia del punch, la pelle verrà iniettata con lidocaina, un antidolorifico simile a quello usato dai dentisti. Sebbene la lidocaina possa formicolare o ferire brevemente durante il processo di intorpidimento, i volontari non dovrebbero avvertire alcun dolore durante la biopsia del punch. Il cerchio viene quindi chiuso utilizzando da uno a cinque punti sottili per sito, che prevengono il sanguinamento, accelerano la guarigione e migliorano l'aspetto. I punti vengono rimossi dopo 10-14 giorni.

3.4.7. Fotografie: le fotografie dei siti di test verranno scattate durante questo protocollo. Nel caso in cui venga scattata una fotografia del volto del soggetto o di qualsiasi altra caratteristica identificabile, l'identità del soggetto potrebbe diventare nota.

3.5. VISITE DI STUDIO

3.5.1 Visita di screening

• Consenso informato
• Criteri di inclusione ed esclusione
• Storia medica e dermatologica
• Esame fisico e segni vitali di farmaci/procedure concomitanti
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D al basale e siero accumulato
• Fotografie dei siti di test dei test MED

3.5.2 Visita 2: UVR n. 1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Esposizione UVR del sito n. 1: 1, 2, 3 e 3 MED

3.5.3 Visita 3: 24 ore dopo UVR #1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti
• Lettura cromatica
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle

3.5.4 Visita 4: 48 ore dopo UVR #1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Punch Biopsia di un 3 MED dal sito #I

3.5.5 Visita 5: 72 ore dopo UVR #1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle

3.5.6 Visita 6:1 settimana dopo UVR #1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle

3.5.7 Visita 7: UVR #2: 2 settimane dopo UVR #1

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Revisione di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti di fotografie di siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Esposizione ai raggi UV del sito n. 2: I, 2, 3 e 3 MED
• Dose una tantum del farmaco in studio (vitamina D o placebo), 1 ora dopo UVR

3.5.8 Visita 8: 24 ore dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D e siero accumulato

3.5.9 Visita 9: 48 ore dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D e siero accumulato
• Punch Biopsia di un 3 MED dal sito n. 2

3.5.10 Visita 10: 72 ore dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti
• Lettura cromatica
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D e siero accumulato

3.5.11 Visita 11: 1 settimana dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D e siero accumulato

3.5.12 Visita 12: 2 settimane dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti della lettura del cromometro
• Fotografie dei siti di test
• Misurazioni dello spessore della pelle
• Prelievo di sangue: livelli sierici di vitamina D e siero accumulato

3.5.13 Visita 13: Un mese dopo UVR #2

• Revisione dei criteri di inclusione ed esclusione
• Rassegna di eventi avversi e farmaci/procedure concomitanti

• Fotografie dei siti di test

  4. RISCHI E DISAGI - RIDOTTI AL MINIMO

4.1. Farmaco in studio (vitamina D/placebo): la vitamina D è ben tollerata e spesso utilizzata nella pratica clinica. È liberamente disponibile come supplemento da banco. Ci sono pochi effetti collaterali alla vitamina D per via orale, il più grave dei quali è l'ipercalcemia con l'uso prolungato di una dose elevata. La tossicità della vitamina D può verificarsi quando viene somministrata la forma attiva (1,25 diidrossivitamina D) o con esposizione prolungata ad alte dosi di vitamina D3. Sia i giovani che gli anziani hanno assunto una dose elevata di vitamina D3 in modo sicuro. È possibile che si verifichi una reazione allergica al farmaco e ai partecipanti verrà chiesto di segnalare e sintomi.

4.2. Misurazione dello spessore della pelle: non ci sono rischi noti nel valutare o misurare lo spessore della pelle con un micrometro.

4.3. Dose minima di eritema (MED) ed esposizione alla luce ultravioletta (UVR): i rischi associati a questa procedura sono minimi, poiché saranno esposti solo i siti di test. Le conseguenze dell'esposizione ai raggi UV sono a breve termine e comportano principalmente un lieve arrossamento nel sito di esposizione seguito da lieve prurito e secchezza della pelle diversi giorni dopo. Il grado della scottatura solare è tipicamente da lieve a moderato e la dose di UV utilizzata non è sufficiente a causare vesciche sulla pelle.

4.4. Prelievo di sangue: i rischi derivanti da un prelievo di sangue possono includere il verificarsi di fastidio e/o lividi nel sito della puntura e, meno probabilmente, la formazione di un piccolo coagulo, gonfiore della vena o sanguinamento dal sito della puntura.

4.5. Biopsia del punzone (campione di tessuto): le biopsie del punzone rappresentano un rischio minimo e i volontari vengono istruiti sulla cura adeguata del sito di biopsia. La lidocaina può causare formicolio o sensazione di bruciore quando iniettata nella pelle. I potenziali problemi localizzati nel sito della biopsia includono sanguinamento o stillicidio, disagio o infezione. Il sito della biopsia guarirà con una piccola cicatrice piatta, che può rimanere rossa per diversi mesi. La cicatrice può anche diventare più chiara o più scura della pelle circostante dopo qualche tempo.

4.6. Fotografie: non ci sono rischi noti nello scattare fotografie. Nel caso in cui venga scattata una fotografia del volto del soggetto o di qualsiasi altra caratteristica identificativa, l'identità del paziente può essere nota.