Efecto de una dosis única de colecalciferol sobre la concentración sérica de 25-hidroxivitamina D y macrófagos

3.4.1 Medicamento del estudio (vitamina D/placebo): los pacientes se bloquearán aleatoriamente en uno de cuatro grupos mediante una asignación equilibrada. El número objetivo de pacientes es 20, con cinco pacientes que hayan completado con éxito todas las evaluaciones en cada grupo. Los grupos se cerrarán a la inscripción una vez que se alcance su objetivo. El reclutamiento continuará hasta que cada grupo haya alcanzado su objetivo. La farmacia de investigación preparará cada dosificación de acuerdo con la aleatorización y tendrá la clave de la dosificación.

Los participantes y los investigadores estarán cegados a los que reciben colecalciferol, que viene en 50 000 UI. cápsulas de dosis y los que recibieron un placebo. Los participantes serán asignados al azar a 1 de 4 dosis como se describe a continuación. Todos los participantes recibirán el mismo número de cápsulas. Cinco participantes estarán en cada grupo y serán dosificados de acuerdo con el siguiente esquema de dosificación:

Tabla 1: Esquema de dosificación

Grupo de dosificación de colecalciferol

Control: 0 Cápsulas de colecalciferol 4 Cápsulas de placebo

50.000 UI: 1 Cápsulas de colecalciferol 3 Cápsulas de placebo

100.000 U.I.: 2 Cápsulas de colecalciferol 2 Cápsulas de placebo

200.000 UI: 4 Cápsulas de colecalciferol 0 Cápsulas de placebo

3.4.2. Medición del grosor de la piel: se evaluará el enrojecimiento de todos los sitios de prueba. El grosor de la piel también se medirá con un micrómetro antes y después de la exposición a los rayos UV.

3.4.3. MED/Prueba de quemaduras solares: este procedimiento consiste en exponer ocho áreas de piel de 6 mm sobre dosis crecientes de radiación solar simulada (SSR), mientras se cubre el resto del cuerpo. SSR es entregado por una lámpara de arco de xenón de 1000 vatios, que emite longitudes de onda ultravioleta de 290-400 nm, muy parecidas a la luz solar natural. La dosis mínima de eritema (MED) se determinará aproximadamente 24 horas después de la exposición inicial utilizando un cromámetro que registra los valores de enrojecimiento asociados con cada área expuesta de 1 cm. Se evaluarán las diferencias generales en MED entre los sujetos.

3.4.4. Exposición UVR: este procedimiento consiste en exponer cuatro áreas de piel de 6 mm sobre dosis crecientes de radiación solar simulada (SSR), mientras se cubre el resto del cuerpo. SSR es entregado por una lámpara de arco de xenón de 1000 vatios, que emite longitudes de onda ultravioleta de 290-400 nm, muy parecidas a la luz solar natural. Los sitios a exponer se dosificarán de la siguiente manera: 1 MED, 2 MED, 3 MED, 3 MED. Se expondrán dos sitios para este estudio, uno antes de la dosificación del medicamento del estudio y otro después de la dosificación del medicamento del estudio.

3.4.5. Extracción de sangre: las muestras se tomarán por punción venosa para proporcionar muestras para el análisis de suero 25OHD y macrófagos.

• 25OHD y 1,25(OH) en suero: se extraerán hasta 6 ml de sangre para medir 25OHD y se enviarán a Heartland Assays, LLC.
• Suero almacenado: hasta 30 ml de suero sanguíneo se recolectarán y almacenarán en el laboratorio de investigación de Dermatología y luego se analizarán con la cosecha de macrófagos.
• Recolección de macrófagos: la recolección única de hasta 180 ml de sangre completa se procesará y purificará para aislar los macrófagos de sangre periférica en el laboratorio de investigación de Dermatología.

3.4.6. Biopsia con sacabocados (muestra de tejido): una biopsia con sacabocados es la extracción de un pequeño círculo de piel (del tamaño de un borrador de lápiz) con un instrumento similar a un cortador de galletas. Este procedimiento consiste en adormecer el área de piel designada con lidocaína y extraer un círculo de piel. Antes de obtener la biopsia con sacabocados, se inyectará lidocaína en la piel, un analgésico similar al que usan los dentistas. Aunque la lidocaína puede causar un hormigueo o doler brevemente durante el proceso de adormecimiento, los voluntarios no deben sentir ningún dolor mientras se obtiene la biopsia con sacabocados. Luego, el círculo se cierra con uno a cinco puntos finos por sitio, lo que evita el sangrado, acelera la curación y mejora la apariencia. Los puntos se retiran 10-14 días después.

3.4.7. Fotografías: Se tomarán fotografías de los sitios de prueba a lo largo de este protocolo. En el caso de que se tome una fotografía de la cara del sujeto o cualquier otra característica identificable, la identidad del sujeto puede llegar a conocerse.

3.5. VISITAS DE ESTUDIO

3.5.1 Visita de selección

• Consentimiento informado
• Los criterios de inclusión y exclusión
• Historia médica y dermatológica
• Examen físico y signos vitales de medicamentos/procedimientos concomitantes
• Extracción de sangre: niveles basales de vitamina D en suero y suero almacenado
• Fotografías de los sitios de prueba de las pruebas MED

3.5.2 Visita 2: UVR #1

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Sitio #1 Exposición UVR: 1, 2, 3 y 3 MED

3.5.3 Visita 3: 24 horas post UVR #1

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos/procedimientos concomitantes
• Lectura cromática
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel

3.5.4 Visita 4: 48 horas post UVR #1

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Biopsia con sacabocados de un 3 MED del sitio #I

3.5.5 Visita 5: 72 horas post UVR #1

• Revisión de los Criterios de Inclusión y Exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel

3.5.6 Visita 6:1semana post UVR #1

• Revisión de los Criterios de Inclusión y Exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel

3.5.7 Visita 7: UVR #2: 2 semanas post UVR #1

• Revisión de los Criterios de Inclusión y Exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de fotografías de los sitios de prueba
• Mediciones del grosor de la piel
• Sitio #2 Exposición UVR: I, 2, 3 y 3 MED
• Dosis única del medicamento del estudio (vitamina D o placebo), 1 hora después de la UVR

3.5.8 Visita 8: 24 horas post UVR #2

• Revisión de los Criterios de Inclusión y Exclusión
• Revisión de Eventos Adversos y Medicamentos Concomitantes/Procedimientos de lectura de Chromameter
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Extracción de sangre: niveles séricos de vitamina D y suero almacenado

3.5.9 Visita 9: 48 horas post UVR #2

• Revisión de los Criterios de Inclusión y Exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Extracción de sangre: niveles séricos de vitamina D y suero almacenado
• Biopsia con sacabocados de un 3 MED del sitio n.º 2

3.5.10 Visita 10: 72 horas post UVR #2

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos/procedimientos concomitantes
• Lectura cromática
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Extracción de sangre: niveles séricos de vitamina D y suero almacenado

3.5.11 Visita 11: 1 semana post UVR #2

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Extracción de sangre: niveles séricos de vitamina D y suero almacenado

3.5.12 Visita 12: 2 semanas post UVR #2

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos concomitantes/procedimientos de lectura del cromámetro
• Fotografías de los sitios de prueba.
• Mediciones del grosor de la piel
• Extracción de sangre: niveles séricos de vitamina D y suero almacenado

3.5.13 Visita 13: Un mes post UVR #2

• Revisión de los criterios de inclusión y exclusión
• Revisión de eventos adversos y medicamentos/procedimientos concomitantes

• Fotografías de los sitios de prueba.

  4. RIESGOS Y MOLESTIAS - MINIMIZADOS

4.1. Medicamento del estudio (vitamina D/placebo): la vitamina D se tolera bien y se usa con frecuencia en la práctica clínica. Está disponible gratuitamente como suplemento de venta libre. Hay pocos efectos secundarios de la vitamina D oral, siendo el más grave la hipercalcemia con el uso prolongado de una dosis alta. La toxicidad por vitamina D puede ocurrir cuando se administra la forma activa (1,25 dihidroxivitamina D) o con una exposición prolongada a altas dosis de vitamina D3. Tanto los adultos jóvenes como los adultos mayores han tomado dosis altas de vitamina D3 por única vez de manera segura. Es posible que ocurra una reacción alérgica al medicamento y se les pedirá a los participantes que informen sobre los síntomas.

4.2. Medición del grosor de la piel: no existen riesgos conocidos al evaluar o medir el grosor de la piel con un micrómetro.

4.3. Dosis mínima de eritema (MED) y exposición a la luz ultravioleta (UVR): los riesgos asociados con este procedimiento son mínimos, ya que solo estarán expuestos los sitios de prueba. Las consecuencias de estar expuesto a la luz ultravioleta son a corto plazo y consisten principalmente en un enrojecimiento leve en el sitio de exposición, seguido de picazón leve y sequedad de la piel varios días después. El grado de la quemadura solar suele ser de leve a moderado y la dosis de UV utilizada no es suficiente para causar ampollas en la piel.

4.4. Extracción de sangre: los riesgos de una extracción de sangre pueden incluir la aparición de molestias y/o hematomas en el lugar de la punción y, con menor probabilidad, la formación de un pequeño coágulo, la hinchazón de la vena o el sangrado en el lugar de la punción.

4.5. Biopsia con sacabocados (muestra de tejido): las biopsias con sacabocados presentan un riesgo mínimo y se instruye a los voluntarios sobre el cuidado adecuado del sitio de la biopsia. La lidocaína puede causar una sensación de hormigueo o ardor cuando se inyecta en la piel. Los posibles problemas localizados en el sitio de la biopsia incluyen sangrado o supuración, malestar o infección. El sitio de la biopsia sanará con una pequeña cicatriz plana, que puede estar roja durante varios meses. La cicatriz también puede volverse más clara o más oscura que la piel circundante después de un tiempo.

4.6. Fotografías: No existen riesgos conocidos al tomar fotografías. En el caso de que se tome una fotografía de la cara del sujeto o cualquier otra característica de identificación, la identidad del paciente puede ser conocida.