Utilizzo della tecnologia di microcampionamento volumetrico ad assorbimento (VAMS) per monitorare il tacrolimus e la creatinina

Verranno reclutati un minimo di 50 pazienti adulti sottoposti a trapianto renale (> 18 anni) che assumono tacrolimus come immunosoppressore quando si presenteranno al loro appuntamento di follow-up ambulatoriale di routine o se selezionati come idonei dai consulenti renali e dagli infermieri specializzati in trapianti. Il consenso scritto sarà ottenuto da tutti i partecipanti.

Ai pazienti che si recano in una clinica trasfusionale per sottoporsi ai prelievi di sangue di routine verrà anche fatta una puntura sul dito e una piccola quantità di sangue (10 µl) verrà raccolta mediante microcampionamento volumetrico assorbente (VAMS) utilizzando il dispositivo Mitra® (Neoteryx), secondo le istruzioni del produttore . Due campioni di sangue venoso verranno raccolti dai pazienti mediante venipuntura da prelievi/infermieri formati. Un campione di EDTA da 4 ml e un campione di gel di siero da 4 ml (per misurare il tacrolimus e la funzionalità renale come parte delle cure di routine). Tacrolimus e creatinina vengono misurati nei campioni di sangue venoso come parte della cura di routine del paziente, pertanto questi verranno elaborati normalmente e i risultati verranno riportati. I campioni capillari accoppiati raccolti utilizzando il dispositivo Mitra® verranno raggruppati e analizzati, se appropriato, mediante cromatografia liquida-spettrometria di massa (LC-MS/MS). I dispositivi Mitra® verranno conservati a -20 gradi Celsius, prima dell'analisi.

I campioni di sangue intero venoso EDTA (raccolti mediante venipuntura) e i campioni di sangue intero capillare (raccolti mediante VAMS®) verranno analizzati per il tacrolimus utilizzando un test LC-MS/MS convalidato nell'uso clinico di routine in laboratorio utilizzando il sistema Waters ACQUITY UPLC e Xevo MS TQD. I campioni di sangue intero capillare (raccolti da VAMS®) e i campioni di siero verranno analizzati per la creatinina utilizzando un metodo LC-MS/MS che sarà sviluppato internamente. Per il confronto dei metodi, i campioni di siero (raccolti mediante venipuntura) verranno analizzati per la creatinina utilizzando un metodo enzimatico sulla piattaforma Roche. Tutte le analisi dei campioni verranno eseguite in un laboratorio accreditato ISO 15189.