De rol van intestinale protozoa en wormen in het verloop van colitis ulcerosa

De prospectieve cohort en gerandomiseerde, dubbelblinde, placebo-gecontroleerde studie zal worden uitgevoerd op basis van het Research Institute of Epidemiology, Microbiology and Infectious Diseases and Coloproctology department of the Republic clinical hospital №1, Ministry of Public Health of the Republic of Oezbekistan.

Deelnemers De diagnose van CU zal worden bevestigd met behulp van standaard klinische, endoscopische, radiografische en pathologische criteria volgens de Montreal-classificatie van omvang en ernst van colitis ulcerosa (Silverberg MS et al. 2006). CU-categorieën omvatten proctitis, linkszijdige colitis en uitgebreide colitis of pancolitis. De activiteit van de ziekte zal worden gemeten aan de hand van de Mayo Clinic-score die uit 4 items bestaat: ontlastingsfrequentie, rectale bloeding, bevindingen van flexibele proctosigmoidoscopie en functionele beoordeling van de patiënt (D'Haens G et al. 2007). De ziekteduur wordt gemeten in jaren vanaf het eerste begin van de symptomen.

UC-patiënten die in het ziekenhuis zijn opgenomen op de afdeling coloproctologie van het klinisch ziekenhuis nr. 1 van de Republiek zullen worden onderzocht vóór de operatie en het ontvangen van medicijnen. Aanvullende cohortgroepen: de 1e groep zal UC-patiënten bevatten die zijn geïnfecteerd met B. hominis, die zullen worden onderzocht voor en na inname van nitazoxanide (monotherapie), de 2e groep zal UC-patiënten bevatten die zijn geïnfecteerd met B. hominis voor en na inname van nitazoxanide en mesalazine (combinatie therapie) en 3e - patiënten met CU geïnfecteerd met B. hominis voor en na inname van mesalazine (monotherapie).

De controlegroep bestaat uit inwoners van de regio Tasjkent zonder enige klachten van het maagdarmkanaal, die zich bij de kliniek zullen aanmelden voor geplande medische onderzoeken. Voorgestelde leeftijd van de bevolking van 17 tot 90 jaar

Uitsluitingscriteria Patiënten met de diagnose van de ziekte van Crohn worden uitgesloten van de analyse. Andere uitsluitingscriteria zijn toxisch megacolon, abces in de buik, symptomatische colonstrictuur, stoma, een voorgeschiedenis van colectomie, een verhoogd risico op infectieuze complicaties (bijv. immunodeficiëntie, hepatitis B of C, of ​​recente levende vaccinatie), klinisch relevante laboratoriumafwijkingen, zwangerschap of borstvoeding, onstabiele of ongecontroleerde medische aandoeningen, een verwachte noodzaak voor een grote operatie, colondysplasie of adenomen, en maligne neoplasmata.

Voor aanvullende groepen behalve de bovengenoemde worden de volgende patiënten uitgesloten: personen die zijn geopereerd, ooit immunosuppressiva of biologische geneesmiddelen hebben gebruikt, geïnfecteerd zijn met darmpathogene bacteriën, waaronder Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp en Mycobacteria .

Parasitologische methode Verzameling van ontlastingsmonsters. Drie ontlastingsmonsters voor parasitologisch onderzoek zullen worden genomen van zowel controlepersonen als CU-patiënten met een interval van 2 dagen vóór de therapie (alle deelnemers) en in de 2e week van monotherapietherapie met nitazoxanide, nitazoxanide in combinatie met mesalazine en monotherapie met mesalazine en in de 6e en 12 weken vanaf het begin van de therapie. Ontlastingmonsters (1-2g.) zal worden verzameld in individuele containers, met 5 ml Turdiev's conserveringsmiddel voor conservering en kleuring van proozoa-cysten en eieren van wormen gedurende een jaar. Het conserveermiddel van Turdiev omvat: 80 ml 0,2% waterige oplossing van natriumnitriet, 10 ml formaldehyde, 2 ml glycerine, 8 ml Lugol-oplossing, 250 ml gedestilleerd water.

Ontlastingmonsters (1-2g.) voor detectie van C. parvum (Cryptosporidium parvum) worden verzameld in individuele lege containers uiterlijk 1 uur voor parasitologisch onderzoek.

Microscopie. Parasitologische diagnose zal worden uitgevoerd door middel van drievoudige coproroscopie met behulp van formaline-ethylacetaatconcentratietechniek [Truant AL, Elliott SH] en met jodium gekleurde uitstrijkjes [King M.]. Voor preparaten kleuring zal Lugol's oplossing worden gebruikt. De intensiteit van protozoa zal worden geschat door het aantal protozoa in het gezichtsveld (oculair x10, objectief x40) in met jodium gekleurde uitstrijkjes die zijn genomen vóór toepassing van de formaline-ethylacetaatconcentratietechniek, het aantal protozoa zal ten minste worden berekend op 10 gezichtsvelden. 1-2, 3-4 en 5-6 micro-organismen in een gezichtsveld werden beschouwd als een infectie van respectievelijk lage, gemiddelde en hoge intensiteit. Voor detectie van C. parvum gemodificeerde Ziehl-Neelsen methode [Henricksen SA, Pohlenz JF] zal worden gebruikt voor het kleuren van de preparaten. De gekleurde uitstrijkjes worden gescand met × 100 olie-immersielens op de aanwezigheid van C. parvum.

Microbiologische methoden Microbiologische methoden zullen worden uitgevoerd voor de detectie van pathogene bacteriën, waaronder Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp en Mycobacteria, uitsluitend van UC-patiënten die voorafgaand aan de therapie zijn geïnfecteerd met B. hominis. Als darmpathogene bacteriën worden aangetroffen, worden deelnemers uitgesloten van verder onderzoek.

Verzameling van ontlastingsmonsters. Fecale monsters worden verzameld van UC-patiënten die zijn geïnfecteerd met B. hominis voorafgaand aan de therapie in steriele containers met wijde opening en schroefdop en onmiddellijk overgebracht naar het laboratorium, bij voorkeur binnen 2 uur. Specimens worden verwerkt voor microscopie, anaerobe en aerobe kweek en ELISA (alleen voor Clostridium difficile).

Procedures Parasitologisch onderzoek bij UC-patiënten en populatie zal worden verstrekt. Aanvullende CU-patiënten die zijn geïnfecteerd met B. hominis zullen worden verdeeld in 3 cohorten, op dubbelblinde wijze, om 1 van de volgende behandelingen te krijgen: (1) patiënten met UC die zijn geïnfecteerd met B. hominis zullen worden behandeld met nitazoxanide, 1,0 g/dag (twee pillen) tweemaal oraal gedurende 14 opeenvolgende dagen; (2) UC-patiënten die zijn geïnfecteerd met B. hominis zullen worden behandeld met nitazoxanide met 1,0 g/dag (één pil - 500 mg) tweemaal oraal en mesalazine 1,5 g/dag (één pil - 500 mg) driemaal daags oraal gedurende 14 opeenvolgende dagen; (3) patiënten met CU-geïnfecteerde B. hominis zullen worden behandeld met mesalazine ≥3 g/dag (één pil - 500 mg) driemaal daags oraal gedurende 14 opeenvolgende dagen. Behalve medicijnen hielden de patiënten van alle drie de groepen zich aan het dieet. Het doel van de follow-up was om de naleving van medicijnen te controleren en om de respons op de therapie, bijwerkingen en herhaling van symptomen vast te leggen.

Andere gedetecteerde pathogene protozoa en helminthes werden behandeld met een standaarddosering van antiparasitaire geneesmiddelen.

Vervolg Het onderzoek is in twee fasen uitgevoerd. In de eerste fase zal parasitologisch onderzoek van patiënten met UC plaatsvinden voorafgaand aan behandeling en populatie. In de tweede fase van de studie bij patiënten met CU die geïnfecteerd zijn met B. hominis zullen medicijnen met anti-Blastocystis-activiteit worden toegepast, evenals monitoring van de therapie-efficiëntie. Parasitologisch, microbiologisch, klinisch en endoscopisch onderzoek zal worden uitgevoerd vóór de therapie en in de 2e, 6e en 12e week. Bij elk bezoek wordt een Mayo Clinic-score berekend en wordt de intensiteit/eliminatie van B. hominis bepaald.

Uitkomstmaten De uitkomstmaten van de therapie zijn: uitroeiing/vermindering van de intensiteit van B. hominis-infectie en een klinische respons van UC-patiënten in de 2e, 6e en 12e week wordt gedefinieerd als een verlaging van de Mayo Clinic-score.