Rolle intestinaler Protozoen und Helminthen im Verlauf der Colitis ulcerosa

Die prospektive Kohorte und randomisierte, doppelblinde, placebokontrollierte Studie wird auf der Grundlage des Forschungsinstituts für Epidemiologie, Mikrobiologie und Infektionskrankheiten und der Abteilung für Koloproktologie des Republikanischen klinischen Krankenhauses Nr. 1 des Ministeriums für öffentliche Gesundheit der Republik Usbekistan durchgeführt.

Die Diagnose der CU wird anhand klinischer, endoskopischer, radiologischer und pathologischer Standardkriterien gemäß der Montrealer Klassifikation des Ausmaßes und der Schwere der Colitis ulcerosa bestätigt (Silverberg MS et al. 2006). UC-Kategorien umfassen Proktitis, linksseitige Kolitis und ausgedehnte Kolitis oder Pankolitis. Die Krankheitsaktivität wird anhand des Mayo-Clinic-Scores gemessen, der aus 4 Elementen besteht: Stuhlfrequenz, rektale Blutungen, Befunde der flexiblen Proktosigmoidoskopie und funktionelle Beurteilung des Patienten (D'Haens G et al. 2007). Die Krankheitsdauer wird in Jahren ab dem ersten Auftreten der Symptome gemessen.

CU-Patienten, die in der Abteilung für Koloproktologie des Republikanischen Klinikums Nr. 1 stationär aufgenommen werden, werden vor der Operation und der Einnahme von Medikamenten untersucht. Zusätzliche Kohortengruppen: Die 1. Gruppe umfasst mit B. hominis infizierte UC-Patienten, die vor und nach der Einnahme von Nitazoxanid (Monotherapie) untersucht werden, die 2. Gruppe umfasst mit B. hominis infizierte UC-Patienten vor und nach der Einnahme von Nitazoxanid und Mesalazin (Kombination). Therapie) und 3. - Patienten mit CU, die mit B. hominis vor und nach der Einnahme von Mesalazin (Monotherapie) infiziert waren.

Die Kontrollgruppe umfasst Einwohner der Region Taschkent ohne Beschwerden des Magen-Darm-Trakts, die sich für geplante medizinische Untersuchungen an die Klinik wenden. Empfohlenes Alter der Bevölkerung von 17 bis 90 Jahren

Ausschlusskriterien Patienten mit der Diagnose Morbus Crohn werden von der Analyse ausgeschlossen. Weitere Ausschlusskriterien sind toxisches Megakolon, abdominaler Abszess, symptomatische Kolonstriktur, Stoma, Kolektomie in der Anamnese, erhöhtes Risiko für infektiöse Komplikationen (z. Immunschwäche, Hepatitis B oder C oder kürzlich erfolgte Lebendimpfung), klinisch bedeutsame Laboranomalien, Schwangerschaft oder Stillzeit, instabile oder unkontrollierte medizinische Störungen, erwartete Notwendigkeit einer größeren Operation, Dickdarmdysplasie oder Adenome und bösartige Neubildungen.

Für zusätzliche Gruppen außer den oben genannten werden die folgenden Patienten ausgeschlossen: Personen, die operiert wurden, jemals Immunsuppressiva oder biologische Arzneimittel verwendet haben und mit intestinalen pathologischen Bakterien infiziert sind, einschließlich Clostridium difficile, Salmonella spp., Shigella spp., Campylobacter spp., Yersinia spp. und Mycobacteria .

Parasitologische Methode Entnahme von Stuhlproben. Drei Stuhlproben zur parasitologischen Untersuchung werden sowohl von Kontrollpersonen als auch von CU-Patienten im Abstand von 2 Tagen vor der Therapie (alle Teilnehmer) und in der 2. Woche der Monotherapietherapie mit Nitazoxanid, Nitazoxanid in Kombination mit Mesalazin und Monotherapie mit Mesalazin und in der 6. und 12. Woche ab Beginn der Therapie. Stuhlproben (1-2g.) werden in einzelnen Behältern gesammelt, die mit 5 ml Konservierungsmittel von Turdiev versehen sind, um ein Jahr lang Proozoa-Zysten und Eier von Würmern zu konservieren und zu färben. Das Konservierungsmittel von Turdiev enthält: 80 ml 0,2%ige wässrige Lösung von Natriumnitrit, 10 ml Formaldehyd, 2 ml Glycerin, 8 ml Lugolsche Lösung, 250 ml destilliertes Wasser.

Stuhlproben (1-2g.) zum Nachweis von C. parvum (Cryptosporidium parvum) werden mindestens 1 Stunde vor der parasitologischen Untersuchung in einzelnen leeren Behältern gesammelt.

Mikroskopie. Die parasitologische Diagnose wird durch Dreifach-Koproskopie unter Verwendung der Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik [Truant AL, Elliott SH] und Jod-gefärbter Abstriche [King M.] durchgeführt. Zur Präparationsfärbung wird Lugolsche Lösung verwendet. Die Intensität der Protozoen wird anhand der Anzahl der Protozoen im Sichtfeld (Okular x10, Objektiv x40) in mit Jod gefärbten Abstrichen geschätzt, die vor der Anwendung der Formalin-Ethylacetat-Konzentrationstechnik genommen wurden, die Anzahl der Protozoen wird auf mindestens 10 berechnet Sichtfelder. 1–2, 3–4 und 5–6 Mikroorganismen in einem Sichtfeld wurden als Infektion mit niedriger, mittlerer bzw. hoher Intensität angesehen. Zum Nachweis von C. parvum wird ein modifiziertes Ziehl-Neelsen-Verfahren [Henricksen SA, Pohlenz JF] zum Anfärben der Präparate verwendet. Die gefärbten Ausstriche werden mit einer 100-fachen Ölimmersionslinse auf das Vorhandensein von C. parvum gescannt.

Mikrobiologische Methoden Mikrobiologische Methoden werden zum Nachweis pathogener Bakterien, einschließlich Clostridium difficile, Salmonella spp., Shigella spp., Campylobacter spp., Yersinia spp. und Mykobakterien, nur von CU-Patienten durchgeführt, die vor der Therapie mit B. hominis infiziert wurden. Bei Nachweis darmpathogener Bakterien werden die Teilnehmer von weiteren Untersuchungen ausgeschlossen.

Entnahme von Stuhlproben. Stuhlproben von UC-Patienten, die mit B. hominis infiziert sind, werden vor der Therapie in sterilen Weithalsbehältern mit Schraubverschluss gesammelt und sofort ins Labor gebracht, vorzugsweise innerhalb von 2 Stunden. Die Proben werden für Mikroskopie, anaerobe und aerobe Kultur und ELISA (nur für Clostridium difficile) verarbeitet.

Verfahren Eine parasitologische Untersuchung bei UC-Patienten und -Bevölkerung wird bereitgestellt. Zusätzliche UC-Patienten, die mit B. hominis infiziert sind, werden doppelblind in 3 Kohorten aufgeteilt, um eine der folgenden Behandlungen zu erhalten: (1) Patienten mit UC, die mit B. hominis infiziert sind, werden mit Nitazoxanid behandelt, 1,0 g/Tag (zwei Pillen) zweimal oral an 14 aufeinanderfolgenden Tagen; (2) CU-Patienten, die mit B. hominis infiziert sind, werden mit Nitazoxanid mit 1,0 g/Tag (eine Pille – 500 mg) zweimal oral und mit Mesalazin 1,5 g/Tag (eine Pille – 500 mg) dreimal täglich oral behandelt 14 aufeinanderfolgende Tage; (3) Patienten mit CU-infizierten B. hominis werden mit Mesalazin ≥ 3 g/Tag (eine Pille – 500 mg) dreimal täglich oral an 14 aufeinanderfolgenden Tagen behandelt. Außer Medikamenten hielten sich die Patienten aller drei Gruppen an die Diät. Der Zweck der Nachsorge bestand darin, die Einhaltung der Medikamente zu überwachen und das Ansprechen auf die Therapie, unerwünschte Ereignisse und das Wiederauftreten von Symptomen aufzuzeichnen.

Andere nachgewiesene pathogene Protozoen und Helminthen wurden mit einer Standarddosierung von Antiparasitika behandelt.

Follow-up Die Studie wurde in zwei Phasen durchgeführt. In der ersten Phase wird eine parasitologische Untersuchung von Patienten mit CU vor der Behandlung und Population durchgeführt. In der zweiten Phase der Studie werden bei Patienten mit CU, die mit B. hominis infiziert sind, Medikamente mit Anti-Blastocystis-Aktivität sowie eine Überwachung der Therapieeffizienz eingesetzt. Vor der Therapie sowie in der 2., 6. und 12. Woche werden parasitologische, mikrobiologische, klinische und endoskopische Untersuchungen durchgeführt. Bei jedem Besuch wird ein Mayo Clinic Score berechnet und die Intensität/Eliminierung von B. hominis bestimmt.

Ergebnismaße Die Ergebnismaße der Therapie sind: Eradikation/Verringerung der Intensität der B. hominis-Infektion und ein klinisches Ansprechen von UC-Patienten in der 2., 6. und 12. Woche wird als Verringerung des Mayo Clinic-Scores definiert.