Papel de los protozoos y helmintos intestinales en el curso de la colitis ulcerosa

El estudio de cohorte prospectivo y aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo se llevará a cabo sobre la base del Instituto de Investigación de Epidemiología, Microbiología y Enfermedades Infecciosas y Departamento de Coloproctología del hospital clínico de la República №1, Ministerio de Salud Pública de la República de Uzbekistán.

Participantes El diagnóstico de CU se confirmará utilizando criterios clínicos, endoscópicos, radiográficos y patológicos estándar de acuerdo con la clasificación de Montreal de extensión y gravedad de la colitis ulcerosa (Silverberg MS et al. 2006). Las categorías de CU incluyen proctitis, colitis del lado izquierdo y colitis o pancolitis extensa. La actividad de la enfermedad se medirá mediante la puntuación de Mayo Clinic que consta de 4 ítems: frecuencia de las deposiciones, sangrado rectal, hallazgos de la proctosigmoidoscopia flexible y evaluación funcional del paciente (D'Haens G et al. 2007). La duración de la enfermedad se medirá en años desde la primera aparición de los síntomas.

Los pacientes de UC hospitalizados en el departamento de coloproctología del hospital clínico de la República №1 serán examinados antes de la cirugía y la recepción de medicamentos. Grupos de cohortes adicionales: el primero incluirá pacientes con CU infectados por B. hominis que serán examinados antes y después de tomar nitazoxanida (monoterapia), el segundo grupo incluirá pacientes con CU infectados por B. hominis antes y después de tomar nitazoxanida y mesalazina (combinación terapia) y 3º - pacientes con CU infectados con B. hominis antes y después de tomar mesalazina (monoterapia).

El grupo de control incluirá a los residentes de la región de Tashkent sin ninguna queja del tracto gastrointestinal, quienes solicitarán a la clínica los exámenes médicos planificados. Edad sugerida de la población de 17 a 90 años

Criterios de exclusión Los pacientes con diagnóstico de enfermedad de Crohn serán excluidos del análisis. Otros criterios de exclusión son megacolon tóxico, absceso abdominal, estenosis colónica sintomática, estoma, antecedentes de colectomía, mayor riesgo de complicaciones infecciosas (p. ej., como resultado de una infección piógena reciente, patógenos entéricos detectados en análisis microbiológicos de heces, tuberculosis activa o latente, inmunodeficiencia, hepatitis B o C, o vacunación viva reciente), anomalías de laboratorio clínicamente significativas, embarazo o lactancia, trastornos médicos inestables o no controlados, requisitos anticipados para cirugía mayor, displasia colónica o adenomas y neoplasias malignas.

Para grupos adicionales, excepto los mencionados anteriormente, se excluirán los siguientes pacientes: personas que fueron operadas, alguna vez usaron inmunosupresores o medicamentos biológicos, infectadas con bacterias patogénicas intestinales, incluidas Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp y Mycobacteria .

Método parasitológico Recogida de muestras de heces. Se tomarán tres muestras de heces para examen parasitológico tanto de sujetos de control como de pacientes con CU en un intervalo de 2 días antes de la terapia (todos los participantes) y en la 2ª semana de monoterapia con nitazoxanida, nitazoxanida en combinación con mesalazina y monoterapia con mesalazina y en la 6ª y 12 semanas desde el inicio de la terapia. Muestras de heces (1-2g.) se recolectarán en recipientes individuales, con 5 ml de conservante de Turdiev siempre que se conserven y coloreen los quistes de proozoos y huevos de lombrices durante un año. El conservante de Turdiev incluye: 80 ml de solución acuosa al 0,2% de nitrito de sodio, 10 ml de formaldehído, 2 ml de glicerina, 8 ml de solución de Lugol, 250 ml de agua destilada.

Muestras de heces (1-2g.) para la detección de C. parvum (Cryptosporidium parvum) se recolectarán en recipientes individuales vacíos no menos de 1 hora antes del examen parasitológico.

Microscopía. El diagnóstico parasitológico se realizará por triple coproscopia utilizando la técnica de concentración de formalina - acetato de etilo [Truant AL, Elliott SH] y frotis teñidos con yodo [King M.]. Para las preparaciones de tinción se utilizará la solución de Lugol. La intensidad de los protozoos se estimará por el número de protozoos en el campo de visión (ocular x10, objetivo x40) en frotis teñidos con yodo tomados antes de la aplicación de formalina - técnica de concentración de acetato de etilo, el número de protozoos se calculará al menos en 10 campos de visión. 1-2, 3-4 y 5-6 microorganismos en un campo de visión se consideraron como infección de baja, media y alta intensidad respectivamente. Para la detección de C. parvum se utilizará el método de Ziehl - Neelsen modificado [Henricksen SA, Pohlenz JF] para teñir las preparaciones. Los frotis teñidos se escanearán con una lente de inmersión en aceite de 100 × para detectar la presencia de C. parvum.

Métodos microbiológicos Se llevarán a cabo métodos microbiológicos para la detección de bacterias patógenas, incluidas Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp y Mycobacteria solo de pacientes con CU infectados con B. hominis antes de la terapia. Si se detectan bacterias patógenas intestinales, los participantes serán excluidos de una mayor investigación.

Recogida de muestras de heces. Se recolectarán muestras fecales de pacientes con CU infectados con B. hominis antes de la terapia en recipientes estériles de boca ancha con tapa de rosca y se transferirán inmediatamente al laboratorio, preferiblemente dentro de las 2 h. Las muestras serán procesadas para microscopía, cultivo anaeróbico y aeróbico y ELISA (solo para Clostridium difficile).

Procedimientos Se brindará examen parasitológico en pacientes con CU y población. Los pacientes adicionales con CU infectados con B. hominis se dividirán en 3 cohortes, de forma doble ciego, para recibir 1 de los siguientes tratamientos: (1) los pacientes con CU infectados con B. hominis serán tratados con nitazoxanida, 1,0 g/día (dos pastillas) dos veces por vía oral durante 14 días consecutivos; (2) Los pacientes con CU infectados con B. hominis serán tratados con nitazoxanida en dosis de 1,0 g/día (una pastilla - 500 mg) dos veces por vía oral y mesalazina 1,5 g/día (una pastilla - 500 mg) tres veces al día por vía oral durante 14 días consecutivos; (3) los pacientes con B. hominis infectados con CU serán tratados con mesalazina ≥3 g/día (una pastilla - 500 mg) tres veces al día por vía oral durante 14 días consecutivos. Excepto medicamentos pacientes de los tres grupos se adhirieron a la dieta. El propósito del seguimiento fue monitorear el cumplimiento de los medicamentos y registrar la respuesta a la terapia, los eventos adversos y la recurrencia de los síntomas.

Otros protozoos y helmintos patógenos detectados fueron tratados con dosis estándar de medicamentos antiparasitarios.

Seguimiento El estudio se realizó en dos etapas. En la primera etapa se brindará el examen parasitológico de los pacientes con CU antes del tratamiento y población. En la segunda etapa del estudio en pacientes con CU infectados con B. hominis se aplicarán fármacos con actividad anti Blastocystis y se monitorizará la eficacia de la terapia. Se realizarán exámenes parasitológicos, microbiológicos, clínicos y endoscópicos antes de la terapia y en las semanas 2, 6 y 12. En cada visita, se calculará una puntuación de Mayo Clinic y se determinará la intensidad/eliminación de B. hominis.

Medidas de resultado Las medidas de resultado de la terapia son: erradicación/reducción de la intensidad de la infección por B. hominis y una respuesta clínica de los pacientes con CU en las semanas 2, 6 y 12 se definirá como una reducción en la puntuación de la Clínica Mayo.