Ruolo dei protozoi intestinali e degli elminti nel corso della colite ulcerosa

Lo studio prospettico di coorte e randomizzato, in doppio cieco, controllato con placebo sarà condotto sulla base dell'Istituto di ricerca di epidemiologia, microbiologia e malattie infettive e dipartimento di coloproctologia dell'ospedale clinico della Repubblica №1, Ministero della sanità pubblica della Repubblica dell'Uzbekistan.

Partecipanti La diagnosi di CU sarà confermata utilizzando criteri clinici, endoscopici, radiografici e patologici standard secondo la classificazione di Montreal dell'estensione e della gravità della colite ulcerosa (Silverberg MS et al. 2006). Le categorie di CU includono proctite, colite del lato sinistro e colite estesa o pancolite. L'attività della malattia sarà misurata dal punteggio della Mayo Clinic che consiste in 4 elementi: frequenza delle feci, sanguinamento rettale, risultati di proctosigmoidoscopia flessibile e valutazione funzionale del paziente (D'Haens G et al. 2007). La durata della malattia sarà misurata in anni dalla prima comparsa dei sintomi.

I pazienti con UC ricoverati nel dipartimento di coloproctologia dell'ospedale clinico della Repubblica №1 saranno esaminati prima dell'intervento chirurgico e riceveranno i farmaci. Ulteriori gruppi di coorte: il 1° gruppo includerà pazienti con CU infetti da B. hominis che saranno esaminati prima e dopo l'assunzione di nitazoxanide (monoterapia), il 2° gruppo includerà pazienti con CU infetti da B. hominis prima e dopo l'assunzione di nitazoxanide e mesalazina (combinazione terapia) e 3a - pazienti con CU infetti da B. hominis prima e dopo l'assunzione di mesalazina (monoterapia).

Il gruppo di controllo includerà i residenti della regione di Tashkent senza lamentele dal tratto gastrointestinale, che si rivolgeranno alla clinica per gli esami medici programmati. Età suggerita della popolazione da 17 a 90 anni

Criteri di esclusione I pazienti con diagnosi di morbo di Crohn saranno esclusi dall'analisi. Altri criteri di esclusione sono il megacolon tossico, l'ascesso addominale, la stenosi del colon sintomatica, lo stoma, una storia di colectomia, un aumentato rischio di complicanze infettive (ad es. immunodeficienza, epatite B o C, o recente vaccinazione viva), anomalie di laboratorio clinicamente significative, gravidanza o allattamento, disturbi medici instabili o non controllati, necessità anticipata di chirurgia maggiore, displasia o adenomi del colon e neoplasie maligne.

Per gruppi aggiuntivi, ad eccezione di quelli sopra menzionati, saranno esclusi i pazienti seguiti: individui che sono stati operati, hanno mai usato immunosoppressori o farmaci biologici, infetti da batteri patogeni intestinali, inclusi Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp e Mycobacteria .

Metodo parassitologico Raccolta di campioni di feci. Verranno prelevati tre campioni di feci per l'esame parassitologico sia dai soggetti di controllo che dai pazienti con CU a 2 giorni di intervallo prima della terapia (tutti i partecipanti) e nella 2a settimana di terapia in monoterapia con nitazoxanide, nitazoxanide in combinazione con mesalazina e monoterapia con mesalazina e in 6a e 12a settimana dall'inizio della terapia. Campioni di feci (1-2 g.) saranno raccolti in contenitori individuali, con 5 ml di conservante di Turdiev purché conservazione e colorazione di cisti di proozoi e uova di vermi per un anno. Il conservante di Turdiev comprende: 80 ml di soluzione acquosa allo 0,2% di nitrito di sodio, 10 ml di formaldeide, 2 ml di glicerina, 8 ml di soluzione di Lugol, 250 ml di acqua distillata.

Campioni di feci (1-2 g.) per il rilevamento di C. parvum (Cryptosporidium parvum) saranno raccolti in singoli contenitori vuoti non meno di 1 ora prima dell'esame parassitologico.

Microscopia. La diagnosi parassitologica sarà eseguita mediante tripla coproscopia utilizzando la tecnica della concentrazione di formalina - acetato di etile [Truant AL, Elliott SH] e strisci colorati con iodio [King M.]. Per i preparati coloranti verrà utilizzata la soluzione di Lugol. L'intensità dei protozoi sarà stimata dal numero di protozoi nel campo visivo (oculare x10, obiettivo x40) in strisci colorati con iodio prelevati prima dell'applicazione della tecnica di concentrazione di formalina - acetato di etile, il numero di protozoi sarà calcolato almeno in 10 campi visivi. 1-2, 3-4 e 5-6 microrganismi in un campo visivo sono stati considerati come infezione di intensità bassa, media e alta rispettivamente. Per la rilevazione di C. parvum verrà utilizzato il metodo Ziehl - Neelsen modificato [Henricksen SA, Pohlenz JF] per la colorazione delle preparazioni. Gli strisci colorati saranno scansionati con lente ad immersione in olio ×100 per la presenza di C. parvum.

Metodi microbiologici Saranno condotti metodi microbiologici per il rilevamento di batteri patogeni, inclusi Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp e Mycobacteria solo da pazienti con CU infettati da B. hominis prima della terapia. Se vengono rilevati batteri patogeni intestinali, i partecipanti saranno esclusi da ulteriori indagini.

Raccolta di campioni di feci. I campioni fecali saranno raccolti da pazienti con CU infetti da B. hominis prima della terapia in contenitori sterili, a bocca larga, con tappo a vite e trasferiti immediatamente al laboratorio, preferibilmente entro 2 ore. I campioni saranno processati per microscopia, coltura anaerobica e aerobica ed ELISA (solo per Clostridium difficile).

Procedure Verrà fornito l'esame parassitologico nei pazienti con UC e nella popolazione. Ulteriori pazienti con CU infetti da B. hominis saranno divisi in 3 coorti, in doppio cieco, per ricevere 1 dei seguenti trattamenti: (1) i pazienti con CU infetti da B. hominis saranno trattati con nitazoxanide, 1,0 g/die (due pillole) due volte per via orale per 14 giorni consecutivi; (2) I pazienti con UC infettati da B. hominis saranno trattati con nitazoxanide da 1,0 g/giorno (una pillola - 500 mg) due volte per via orale e mesalazina 1,5 g/giorno (una pillola - 500 mg) tre volte al giorno per via orale per 14 giorni consecutivi; (3) i pazienti con UC infetta da B. hominis saranno trattati con mesalazina ≥3 g/giorno (una pillola - 500 mg) tre volte al giorno per via orale per 14 giorni consecutivi. Eccetto i pazienti di farmaci di tutti i tre gruppi hanno aderito alla dieta. Lo scopo del follow-up era monitorare la compliance con i farmaci e registrare la risposta alla terapia, gli eventi avversi e la ricorrenza dei sintomi.

Altri protozoi ed elminti patogeni rilevati sono stati trattati con un dosaggio standard di farmaci antiparassitari.

Follow-up Lo studio è stato condotto in due fasi. Nella prima fase verrà fornito l'esame parassitologico dei pazienti con CU prima del trattamento e della popolazione. Nella seconda fase dello studio in pazienti con CU infetti da B. hominis verranno applicati farmaci con attività anti Blastocystis e monitoraggio dell'efficacia della terapia. L'esame parassitologico, microbiologico, clinico ed endoscopico sarà condotto prima della terapia e alla 2a, 6a e 12a settimana. Ad ogni visita, verrà calcolato un punteggio della Mayo Clinic e verrà determinata l'intensità/eliminazione di B. hominis.

Misure di esito Le misure di esito della terapia sono: eradicazione/riduzione dell'intensità dell'infezione da B. hominis e una risposta clinica dei pazienti con CU alla 2a, 6a e 12a settimana sarà definita come una riduzione del punteggio della Mayo Clinic.