Role střevních prvoků a helmintů v průběhu ulcerózní kolitidy

Prospektivní kohortová a randomizovaná, dvojitě zaslepená, placebem kontrolovaná studie bude provedena na základě oddělení Výzkumného ústavu epidemiologie, mikrobiologie a infekčních nemocí a koloproktologie Republikové klinické nemocnice č. 1, Ministerstva veřejného zdravotnictví Republiky Uzbekistán.

Účastníci Diagnóza UC bude potvrzena pomocí standardních klinických, endoskopických, radiografických a patologických kritérií podle Montrealské klasifikace rozsahu a závažnosti ulcerózní kolitidy (Silverberg MS et al. 2006). Kategorie UC zahrnují proktitidu, levostrannou kolitidu a rozsáhlou kolitidu nebo pankolitidu. Aktivita onemocnění bude měřena skóre Mayo Clinic, které se skládá ze 4 položek: frekvence stolice, rektální krvácení, nálezy flexibilní proktosigmoidoskopie a funkční hodnocení pacienta (D'Haens G et al. 2007). Doba trvání onemocnění se bude měřit v letech od prvního nástupu příznaků.

Pacienti s UC hospitalizovaní na koloproktologickém oddělení Republikové klinické nemocnice č. 1 budou před operací a podáním léků vyšetřeni. Další kohortové skupiny: do 1. skupiny budou patřit pacienti s UC infikovaní B. hominis, kteří budou vyšetřeni před a po užití nitazoxanidu (monoterapie), do 2. skupiny budou zahrnuti pacienti s UC infikovaní B. hominis před a po užití nitazoxanidu a mesalazinu (kombinace terapie) a 3. - pacienti s UC infikovanými B. hominis před a po užití mesalazinu (monoterapie).

Kontrolní skupina bude zahrnovat obyvatele regionu Taškent bez jakýchkoliv potíží s gastrointestinálním traktem, kteří budou na klinice žádat o plánovaná lékařská vyšetření. Doporučený věk obyvatel od 17 do 90 let

Kritéria vyloučení Pacienti s diagnózou Crohnovy choroby budou z analýzy vyloučeni. Dalšími vylučovacími kritérii jsou toxický megakolon, abdominální absces, symptomatická striktura tlustého střeva, stomie, kolektomie v anamnéze, zvýšené riziko infekčních komplikací (např. v důsledku nedávné pyogenní infekce, střevní patogeny zjištěné při mikrobiologické analýze stolice, aktivní nebo latentní tuberkulóza, imunodeficience, hepatitida B nebo C nebo nedávné živé očkování), klinicky významné laboratorní abnormality, těhotenství nebo kojení, nestabilní nebo nekontrolované zdravotní poruchy, očekávané požadavky na velký chirurgický zákrok, dysplazie nebo adenomy tlustého střeva a zhoubné novotvary.

Pro další skupiny kromě výše uvedených budou vyloučeni sledovaní pacienti: jedinci, kteří byli operováni, někdy užívali imunosupresiva nebo biologické léky, infikovaní střevními patologickými bakteriemi, včetně Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp a Mycobacteria .

Parazitologická metoda Odběr vzorků stolice. Kontrolním subjektům i pacientům s UC budou odebrány tři vzorky stolice na parazitologické vyšetření v intervalu 2 dnů před terapií (všichni účastníci) a ve 2. týdnu monoterapie terapie nitazoxanidem, nitazoxanidem v kombinaci s mesalazinem a monoterapií mesalazinem a v 6. resp. 12. týden od začátku terapie. Vzorky stolice (1-2g.) budou odebírány do jednotlivých nádob, přičemž 5 ml Turdievova konzervantu zajistí konzervaci a barvení proozoálních cyst a vajíček červů po dobu jednoho roku. Turdievův konzervant obsahuje: 80 ml 0,2% vodného roztoku dusitanu sodného, ​​10 ml formaldehydu, 2 ml glycerinu, 8 ml Lugolova roztoku, 250 ml destilované vody.

Vzorky stolice (1-2g.) pro detekci C. parvum (Cryptosporidium parvum) bude odebrán do jednotlivých prázdných nádob minimálně 1 hodinu před parazitologickým vyšetřením.

Mikroskopie. Parazitologická diagnostika bude provedena trojitou koproskopií za použití koncentrační techniky formalín - ethylacetát [Truant AL, Elliott SH] a stěrů obarvených jódem [King M.]. Pro přípravky k barvení bude použit Lugolův roztok. Intenzita prvoků bude odhadnuta počtem prvoků v zorném poli (okulár x10, objektiv x40) ve stěrech obarvených jódem odebraných před aplikací koncentrační techniky formalín - ethylacetát, počet prvoků bude vypočítán minimálně za 10 zorných polí. 1-2, 3-4 a 5-6 mikroorganismů v zorném poli bylo považováno za infekci nízké, střední a vysoké intenzity. Pro detekci C. parvum bude pro barvení preparátů použita modifikovaná metoda Ziehl - Neelsen [Henricksen SA, Pohlenz JF]. Obarvené šmouhy budou skenovány olejovou imerzní čočkou ×100 na přítomnost C. parvum.

Mikrobiologické metody Mikrobiologické metody budou prováděny pro detekci patogenních bakterií, včetně Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp, a Mycobacteria pouze od pacientů s UC infikovaných B. hominis před léčbou. Pokud budou zjištěny střevní patogenní bakterie, účastníci budou vyloučeni z dalšího vyšetřování.

Odběr vzorků stolice. Vzorky stolice budou odebrány pacientům s UC infikovanými B. hominis před terapií do sterilních nádob se šroubovacím uzávěrem se širokým hrdlem a ihned přeneseny do laboratoře, nejlépe do 2 hodin. Vzorky budou zpracovány pro mikroskopii, anaerobní a aerobní kultivaci a ELISA (pouze pro Clostridium difficile).

Postupy Bude zajištěno parazitologické vyšetření pacientů a populace s UC. Další pacienti s UC infikovaní B. hominis budou rozděleni do 3 kohort dvojitě zaslepeným způsobem, aby dostali 1 z následujících ošetření: (1) pacienti s UC infikovaní B. hominis budou léčeni nitazoxanidem, 1,0 g/den (dvě pilulky) dvakrát perorálně po dobu 14 po sobě jdoucích dnů; (2) Pacienti s UC infikovaní B. hominis budou léčeni nitazoxanidem v dávce 1,0 g/den (jedna pilulka – 500 mg) dvakrát perorálně a mesalazinem 1,5 g/den (jedna pilulka – 500 mg) třikrát denně perorálně po dobu 14 po sobě jdoucích dnů; (3) pacienti s B. hominis infikovanými UC budou léčeni mesalazinem ≥3 g/den (jedna pilulka – 500 mg) třikrát denně perorálně po dobu 14 po sobě jdoucích dnů. S výjimkou léků pacienti všech tří skupin dodržovali dietu. Účelem sledování bylo sledovat compliance s medikací a zaznamenat odpověď na terapii, nežádoucí účinky a recidivu symptomů.

Ostatní detekovaní patogenní prvoci a helminti byli léčeni standardním dávkováním antiparazitik.

Následné sledování Studie byla provedena ve dvou fázích. V první fázi bude zajištěno parazitologické vyšetření pacientů s UC před léčbou a populace. Ve druhé fázi studie bude u pacientů s UC infikovaných B. hominis aplikována léčiva s anti Blastocystis aktivitou a sledování účinnosti terapie. Před léčbou a ve 2., 6. a 12. týdnu bude provedeno parazitologické, mikrobiologické, klinické a endoskopické vyšetření. Při každé návštěvě bude vypočítáno skóre Mayo Clinic a bude stanovena intenzita/eliminace B. hominis.

Měření výsledku Měření výsledku terapie jsou: eradikace/snížení intenzity infekce B. hominis a klinická odpověď pacientů s UC ve 2., 6. a 12. týdnu bude definována jako snížení skóre Mayo Clinic.