Papel dos protozoários e helmintos intestinais no curso da colite ulcerosa

O estudo de coorte prospectivo e randomizado, duplo-cego, controlado por placebo será conduzido com base no Instituto de Pesquisa de Epidemiologia, Microbiologia e Doenças Infecciosas e Departamento de Coloproctologia do hospital clínico da República №1, Ministério da Saúde Pública da República do Uzbequistão.

Participantes O diagnóstico de CU será confirmado usando critérios clínicos, endoscópicos, radiográficos e patológicos padrão de acordo com a classificação de Montreal de extensão e gravidade da colite ulcerosa (Silverberg MS et al. 2006). As categorias de UC incluem proctite, colite do lado esquerdo e colite extensa ou pancolite. A atividade da doença será medida pelo escore da Mayo Clinic, que consiste em 4 itens: frequência das fezes, sangramento retal, achados da proctossigmoidoscopia flexível e avaliação funcional do paciente (D'Haens G et al. 2007). A duração da doença será medida em anos a partir da primeira vez do início dos sintomas.

Os pacientes UC internados no departamento de coloproctologia do hospital clínico da República №1 serão examinados antes da cirurgia e receberão medicamentos. Grupos de coorte adicionais: o 1º incluirá pacientes com UC infectados com B. hominis que serão examinados antes e depois de tomar nitazoxanida (monoterapia), o 2º grupo incluirá pacientes com UC infectados com B. hominis antes e depois de tomar nitazoxanida e mesalazina (combinação terapia) e 3ª - pacientes com UC infectados com B. hominis antes e depois de tomar mesalazina (monoterapia).

O grupo de controle incluirá residentes da região de Tashkent sem queixas do trato gastrointestinal, que se inscreverão na clínica para exames médicos planejados. Idade sugerida da população de 17 a 90 anos

Critérios de exclusão Pacientes com diagnóstico de doença de Crohn serão excluídos da análise. Outros critérios de exclusão são megacólon tóxico, abscesso abdominal, estenose colônica sintomática, estoma, histórico de colectomia, risco aumentado de complicações infecciosas (por exemplo, como resultado de infecção piogênica recente, patógenos entéricos detectados em análise microbiológica de fezes, tuberculose ativa ou latente, imunodeficiência, hepatite B ou C, ou vacinação viva recente), anormalidades laboratoriais clinicamente significativas, gravidez ou lactação, distúrbios médicos instáveis ​​ou não controlados, necessidade antecipada de cirurgia de grande porte, displasia colônica ou adenomas e neoplasias malignas.

Para grupos adicionais, exceto os mencionados acima, serão excluídos os seguintes pacientes: indivíduos que foram operados, já usaram imunossupressores ou drogas biológicas, infectados por bactérias patogênicas intestinais, incluindo Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp e Mycobacteria .

Método parasitológico Coleta de amostras de fezes. Três amostras de fezes para exame parasitológico serão coletadas de ambos os controles e pacientes com UC em 2 dias de intervalo antes da terapia (todos os participantes) e na 2ª semana de monoterapia com nitazoxanida, nitazoxanida em combinação com mesalazina e monoterapia com mesalazina e na 6ª e 12 semanas desde o início da terapia. Amostras de fezes (1-2g.) serão coletados em recipientes individuais, com 5 ml de conservante de Turdiev, desde conservação e coloração de cistos de proozoários e ovos de vermes por um ano. O conservante de Turdiev inclui: 80 ml de solução aquosa a 0,2% de nitrito de sódio, 10 ml de formaldeído, 2 ml de glicerina, 8 ml de solução de Lugol, 250 ml de água destilada.

Amostras de fezes (1-2g.) para detecção de C. parvum (Cryptosporidium parvum) serão coletados em recipientes individuais vazios pelo menos 1 hora antes do exame parasitológico.

Microscopia. O diagnóstico parasitológico será realizado por tripla coproscopia utilizando a técnica de concentração de formalina - acetato de etila [Truant AL, Elliott SH] e esfregaços corados com iodo [King M.]. Para preparações, a solução de Lugol será usada. A intensidade de protozoários será estimada pelo número de protozoários no campo de visão (ocular x10, objetiva x40) em esfregaços corados com iodo colhidos antes da aplicação da técnica de concentração de formalina - acetato de etila, o número de protozoários será calculado pelo menos em 10 campos de visão. 1-2, 3-4 e 5-6 microrganismos em um campo de visão foram considerados como infecção de baixa, média e alta intensidade respectivamente. Para detecção de C. parvum será utilizado o método Ziehl - Neelsen modificado [Henricksen SA, Pohlenz JF] para coloração das preparações. Os esfregaços corados serão escaneados com lentes de imersão em óleo ×100 para a presença de C. parvum.

Métodos microbiológicos Serão conduzidos métodos microbiológicos para a detecção de bactérias patogênicas, incluindo Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp e Mycobacteria apenas de pacientes com UC infectados com B. hominis antes da terapia. Se bactérias patogênicas intestinais forem detectadas, os participantes serão excluídos de uma investigação mais aprofundada.

Coleta de amostras de fezes. Amostras fecais serão coletadas de pacientes com UC infectados com B. hominis antes da terapia em recipientes estéreis, de boca larga e com tampa de rosca e imediatamente transferidos para o laboratório, preferencialmente dentro de 2 h. As amostras serão processadas para microscopia, cultura anaeróbica e aeróbica e ELISA (somente para Clostridium difficile).

Procedimentos Serão fornecidos exames parasitológicos em pacientes com UC e na população. Pacientes adicionais com UC infectados com B. hominis serão divididos em 3 coortes, de forma duplo-cega, para receber 1 dos seguintes tratamentos: (1) pacientes com UC infectados com B. hominis serão tratados com nitazoxanida, 1,0 g/dia (dois comprimidos) duas vezes por via oral por 14 dias consecutivos; (2) Pacientes com UC infectados com B. hominis serão tratados com nitazoxanida 1,0 g/dia (um comprimido - 500 mg) duas vezes por via oral e mesalazina 1,5 g/dia (um comprimido - 500 mg) três vezes ao dia por via oral para 14 dias consecutivos; (3) pacientes com UC infectados por B. hominis serão tratados com mesalazina ≥3 g/dia (um comprimido - 500 mg) três vezes ao dia por via oral por 14 dias consecutivos. Exceto os pacientes de drogas dos três grupos aderiram à dieta. O objetivo do acompanhamento foi monitorar a adesão aos medicamentos e registrar a resposta à terapia, eventos adversos e recorrência dos sintomas.

Outros protozoários e helmintos patogênicos detectados foram tratados com dosagem padrão de drogas antiparasitárias.

Acompanhamento O estudo foi realizado em duas etapas. Na primeira etapa, será fornecido exame parasitológico de pacientes com CU antes do tratamento e da população. Na segunda fase do estudo em pacientes com UC infectados com B. hominis, drogas com atividade anti-Blastocystis serão aplicadas, bem como o monitoramento da eficácia da terapia. Exames parasitológicos, microbiológicos, clínicos e endoscópicos serão realizados antes da terapia e na 2ª, 6ª e 12ª semanas. Em cada visita, uma pontuação da Mayo Clinic será calculada e a intensidade/eliminação de B. hominis será determinada.

Medidas de resultado As medidas de resultado da terapia são: erradicação/redução da intensidade da infecção por B. hominis e uma resposta clínica de pacientes com UC na 2ª, 6ª e 12ª semanas será definida como uma redução na pontuação da Mayo Clinic.