Rôle des protozoaires et des helminthes intestinaux dans l'évolution de la colite ulcéreuse

La cohorte prospective et l'étude randomisée, en double aveugle et contrôlée par placebo seront menées sur la base de l'Institut de recherche en épidémiologie, microbiologie et maladies infectieuses et département de coloproctologie de l'hôpital clinique de la République №1, ministère de la Santé publique de la République d'Ouzbékistan.

Participants Le diagnostic de RCH sera confirmé à l'aide de critères cliniques, endoscopiques, radiographiques et pathologiques standard selon la classification de Montréal de l'étendue et de la gravité de la colite ulcéreuse (Silverberg MS et al. 2006). Les catégories de CU comprennent la proctite, la colite du côté gauche et la colite étendue ou la pancolite. L'activité de la maladie sera mesurée par le score de la Mayo Clinic composé de 4 éléments : la fréquence des selles, les saignements rectaux, les résultats de la proctosigmoïdoscopie flexible et l'évaluation fonctionnelle du patient (D'Haens G et al. 2007). La durée de la maladie sera mesurée en années à partir de la première apparition des symptômes.

Les patients UC hospitalisés dans le département de coloproctologie de l'hôpital clinique de la République №1 seront examinés avant la chirurgie et la réception des médicaments. Groupes de cohorte supplémentaires : le 1er groupe comprendra des patients atteints de RCH infectés par B. hominis qui seront examinés avant et après la prise de nitazoxanide (monothérapie), le 2e groupe comprendra des patients RCH infectés par B. hominis avant et après la prise de nitazoxanide et de mésalazine (combinaison thérapie) et 3e - patients atteints de RCH infectés par B. hominis avant et après la prise de mésalazine (monothérapie).

Le groupe témoin comprendra des résidents de la région de Tachkent sans aucune plainte du tractus gastro-intestinal, qui s'adresseront à la clinique pour les examens médicaux prévus. Âge suggéré de la population de 17 à 90 ans

Critères d'exclusion Les patients avec un diagnostic de maladie de Crohn seront exclus de l'analyse. D'autres critères d'exclusion sont un mégacôlon toxique, un abcès abdominal, une sténose colique symptomatique, une stomie, des antécédents de colectomie, un risque accru de complications infectieuses (par exemple à la suite d'une infection pyogène récente, d'agents pathogènes entériques détectés lors d'une analyse microbiologique des selles, d'une tuberculose active ou latente, immunodéficience, hépatite B ou C, ou vaccination vivante récente), anomalies de laboratoire cliniquement significatives, grossesse ou allaitement, troubles médicaux instables ou non contrôlés, nécessité anticipée d'une intervention chirurgicale majeure, dysplasie colique ou adénomes et néoplasmes malins.

Pour les groupes supplémentaires à l'exception de ceux mentionnés ci-dessus, les patients suivis seront exclus : les personnes qui ont été opérées, qui ont déjà utilisé des immunosuppresseurs ou des médicaments biologiques, infectées par des bactéries pathogènes intestinales, y compris Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp et Mycobacteria .

Méthode parasitologique Prélèvement d'échantillons de selles. Trois échantillons de selles pour examen parasitologique seront prélevés à la fois sur des sujets témoins et sur des patients atteints de CU à 2 jours d'intervalle avant le traitement (tous les participants) et au cours de la 2e semaine de traitement en monothérapie avec du nitazoxanide, du nitazoxanide en association avec de la mésalazine et en monothérapie avec de la mésalazine et en 6e et 12e semaines à partir du début de la thérapie. Échantillons de selles (1-2g.) seront collectés dans des récipients individuels, avec 5 ml de conservateur de Turdiev assurant la conservation et la coloration des kystes de proozoa et des œufs de vers pendant un an. Le conservateur de Turdiev comprend: 80 ml de solution aqueuse à 0,2% de nitrite de sodium, 10 ml de formaldéhyde, 2 ml de glycérine, 8 ml de solution de Lugol, 250 ml d'eau distillée.

Échantillons de selles (1-2g.) pour la détection de C. parvum (Cryptosporidium parvum) seront collectés dans des conteneurs vides individuels au moins 1 heure avant l'examen parasitologique.

Microscopie. Le diagnostic parasitologique sera réalisé par triple coproscopie en utilisant la technique de concentration formol - acétate d'éthyle [Truant AL, Elliott SH] et des frottis colorés à l'iode [King M.]. Pour les préparations, la solution de coloration de Lugol sera utilisée. L'intensité des protozoaires sera estimée par le nombre de protozoaires dans le champ de vision (oculaire x10, objectif x40) dans les frottis colorés à l'iode réalisés avant application de la technique de concentration formol - acétate d'éthyle, le nombre de protozoaires sera calculé au minimum sur 10 champs de vision. 1-2, 3-4 et 5-6 micro-organismes dans un champ de vision ont été considérés comme une infection d'intensité faible, moyenne et élevée respectivement. Pour la détection de C. parvum modifié, la méthode Ziehl - Neelsen [Henricksen SA, Pohlenz JF] sera utilisée pour colorer les préparations. Les frottis colorés seront scannés avec une lentille à immersion d'huile ×100 pour la présence de C. parvum.

Méthodes microbiologiques Des méthodes microbiologiques seront utilisées pour détecter les bactéries pathogènes, y compris Clostridium difficile, Salmonella spp, Shigella spp, Campylobacter spp, Yersinia spp et Mycobacteria uniquement chez les patients atteints de CU infectés par B. hominis avant le traitement. Si des bactéries pathogènes intestinales sont détectées, les participants seront exclus d'une enquête plus approfondie.

Prélèvement d'échantillons de selles. Des échantillons fécaux seront prélevés sur des patients UC infectés par B. hominis avant le traitement dans des récipients stériles à large ouverture et à bouchon vissé et immédiatement transférés au laboratoire, de préférence dans les 2 h. Les échantillons seront traités pour la microscopie, la culture anaérobie et aérobie et ELISA (uniquement pour Clostridium difficile).

Procédures Un examen parasitologique chez les patients atteints de CU et dans la population sera fourni. Des patients supplémentaires atteints de CU infectés par B. hominis seront divisés en 3 cohortes, en double aveugle, pour recevoir 1 des traitements suivants : (1) les patients atteints de CU infectés par B. hominis seront traités avec du nitazoxanide, 1,0 g/jour (deux pilules) deux fois par voie orale pendant 14 jours consécutifs ; (2) Les patients atteints de RCH infectés par B. hominis seront traités avec du nitazoxanide à raison de 1,0 g/jour (un comprimé - 500 mg) deux fois par voie orale et de la mésalazine à raison de 1,5 g/jour (un comprimé - 500 mg) trois fois par jour par voie orale pendant 14 jours consécutifs ; (3) les patients atteints de RCH infectés par B. hominis seront traités avec de la mésalazine ≥ 3 g/jour (un comprimé - 500 mg) trois fois par jour par voie orale pendant 14 jours consécutifs. À l'exception des médicaments, les patients de tous les trois groupes ont adhéré au régime. Le but du suivi était de surveiller l'observance des médicaments et d'enregistrer la réponse au traitement, les événements indésirables et la récurrence des symptômes.

D'autres protozoaires et helminthes pathogènes détectés ont été traités par un dosage standard de médicaments antiparasitaires.

Suivi L'étude s'est déroulée en deux temps. Au premier stade un examen parasitologique des patients atteints de RCH avant traitement et population sera assuré. Lors de la deuxième étape de l'étude chez les patients atteints de RCH infectés par B. hominis, des médicaments ayant une activité anti-Blastocystis seront appliqués ainsi qu'un suivi de l'efficacité du traitement. Un examen parasitologique, microbiologique, clinique et endoscopique sera effectué avant le traitement et aux 2e, 6e et 12e semaines. À chaque visite, un score Mayo Clinic sera calculé et l'intensité/l'élimination de B. hominis sera déterminée.

Mesures de résultats Les mesures de résultats du traitement sont : l'éradication/réduction de l'intensité de l'infection à B. hominis et une réponse clinique des patients atteints de RCH aux 2e, 6e et 12e semaines seront définies comme une réduction du score de la Mayo Clinic.