Morsmelkhormoner og tidlig spedbarnsvekst hos kvinner med svangerskapsdiabetes mellitus

Forsøkspersoner Nulliparous kvinner med GDM og friske kvinner, som hadde til hensikt å utelukkende amme sine singletons, ble rekruttert fortløpende fra obstetriske avdelinger ved Peking Union Medical College Hospital og Beijing Obstetrics and Gynecology Hospital i løpet av den 37. svangerskapsuken. Eksklusjonskriteriene var: diabetes før graviditet, føtal anomali, svangerskapshypertensjon, svangerskapsforgiftning, fostervekstbegrensning, ødelagte membraner, postpartum glukoseavvik (se nedenfor), og introduksjon av formelmating under oppfølgingene. Kvinner med plasmaglukose >7,8 mmol/L i 1-times 50g glukosebelastningstesten (GLT) i løpet av 24.-28. svangerskapsuke gjennomgikk en 3-timers 100g diagnostisk oral glukosetoleransetest (OGTT) etter en 12-timers faste over natten. GDM ble diagnostisert hvis to eller flere plasmaglukoseavlesninger i OGTT var lik eller overskred terskelen ifølge Carpenter og Coustan. Alle forsøkspersoner diagnostisert med GDM fikk i utgangspunktet diettbehandling for å oppnå glykemiske mål: 3,3-5,6 mmol/L ved faste, 3,3-5,8 mmol/L pre-prandialt, 4,4-6,7 mmol/L 2 timer post-prandialt og 4,4-6,7 mmol/L om natten. Deltakerne ble fulgt av dietister for å sikre euglykemi, passende vektøkning og tilstrekkelig næringsinntak. Deltakerne som ikke oppnådde glykemiske mål innen 2 uker etter oppstart av diettbehandlingen, fikk insulin via injeksjon. Siden makronæringsstoffer i BM hovedsakelig ble bestemt av mors glukosemetabolske status, ekskluderte etterforskerne kvinner med postpartum glukoseabnormaliteter, dvs. nedsatt glukosetoleranse (IGT) med 2-timers plasmaglukose mellom 7,8 og 11,0 mmol/l og type 2 diabetes med 2-timers plasmaglukose ≥11,1 mmol/l i 75g OGTT på postpartum dag 42.

Antropometriske målinger Data ble registrert ved hjelp av skreddersydde kasusrapportskjemaer. Obstetriske data, som glykemiske tester, svangerskapsalder og leveringsmåte, ble hentet fra journalene. Vekt før graviditet ble selvrapportert. Mødres høyde ble målt to ganger til nærmeste 0,1 cm med et veggmontert stadiometer. Mødres vekt ble målt to ganger til nærmeste 0,1 kg med medisinsk balansevekt før fødsel, på dag 42 og 90 etter fødsel. Vekten, lengden og hodeomkretsen til spedbarnene ble målt ved fødselen, på dag 42 og 90. Spedbarnene ble veid to ganger naken ved hjelp av en presisjonsvekt (Seca, CA, USA). Kroppslengde og hodeomkrets ble målt to ganger til nærmeste 0,1 cm med lengdebrett og ikke-strekkbare målebånd (Seca, CA, USA). Gjennomsnittsverdiene av de to avlesningene ble brukt til dataanalyse.

Innsamling av melkeprøver, prosessering og laboratorietester Råmelkprøver ble samlet inn mellom kl. 08.00 og 09.00. før spedbarnsmating den tredje dagen etter fødselen. Moden melk, inkludert både formelk og bakmelk, ble levert og samlet fra ett bryst før spedbarnsmating ved hjelp av en elektrisk pumpe (Medela, Baar, Sveits) mellom kl. og 16.00. på dag 42 og 90 i klinikkene. Melkeprøvene ble frosset umiddelbart i steriliserte plastrør ved -80°C. Før kvantifisering av hormonene i BM ble prøvene tint ved 4°C, sonikert og sentrifugert. Prøvene ble sonikert ved bruk av en soniker (Braun-sonic sonicator, B. Braun, Melsungen, Tyskland) ved 50 watt i 3 støt med 10 sekunders intervaller og sentrifugert ved 100 000 g i 1 time ved 4°C. Supernatantfettet ble kastet og skummet melk ble brukt til å kvantifisere adiponektin, leptin, insulin og ghrelin ved ELISA ved Key Laboratory of Endocrinology i Peking Union Medical College Hospital. Analysen hadde en intra- og inter-analyse CV på henholdsvis <5,4 og <8,5 % for adiponectin, og <7,4 % og <9,3 % for leptin. Insulinanalysen hadde ingen kryssreaktivitet mot proinsulin (<0,05 %), og hadde en sensitivitet på 0,5 mU/L og en inter-analyse CV på <9,0 %. Total ghrelin ble testet ved å bruke det totale humane ghrelin ELISA-settet (Millipore, USA). Intra- og inter-assay CV-ene for ghrelin-analysen var <1,9 % og <7,7 %.