Kinetyka odpowiedzi cytokin nosowych na stymulację mechaniczną

Alergiczny nieżyt nosa (AR) i astma alergiczna są częstymi objawami alergii typu I, choroby nadwrażliwości zależnej od IgE, która według szacunków dotyka nawet 40% światowej populacji. IgE jest wytwarzana przez limfocyty B i wiąże się z powierzchnią komórek tucznych i bazofili poprzez swój receptor Fce I (FceRI) o wysokim powinowactwie. Sieciowanie powierzchniowej IgE przez jej specyficzny alergen indukuje degranulację komórek, jak również uwalnianie mediatorów stanu zapalnego. Ten proces, który rozwija się w ciągu kilku minut, prowadzi do typowych objawów ocznych, nosowych i płucnych ANN i astmy, takich jak swędzenie, zaczerwienienie oczu, katar i/lub zatkany nos oraz świszczący oddech z powodu uwięzienia powietrza w wyniku niedrożności dolnych dróg oddechowych. U niektórych pacjentów mogą również wystąpić reakcje późnej fazy (LPR). Reakcje te zwykle rozwijają się 2-6 godzin po ekspozycji na alergen, osiągając szczyt intensywności między 6-9 godzinami i charakteryzują się głównie obrzękiem tkanek, który objawia się zablokowaniem przepływu powietrza w drogach oddechowych.

Od czasu wprowadzenia łatwych w użyciu i wysoce chłonnych urządzeń do pobierania wydzieliny śluzówkowej mediatory zaangażowane w natychmiastową i późną reakcję alergiczną oraz kinetykę ich uwalniania zostały dobrze scharakteryzowane w ciągu ostatnich kilku lat. Wysiłki Imperial College London i niepublikowane dane grupy badaczy z Wiednia wykazały, że kluczowe mediatory zaangażowane w fazę bezpośrednią obejmują mediatory pochodzące z komórek tucznych (tryptaza, PGD2), alarminy nabłonkowe (IL-33, sST2) i dopełniacz (C3a , C4a, C5a, D-Dimer). Do mediatorów zaangażowanych w reakcje późnej fazy należą także alarminy (sST2, TSLP), cytokiny Th2 (IL-4, IL-5, IL-13), mediatory neutrofili (MMP-9) i mediatory eozynofili (EDN).

Jednak to, co ostatnio stało się jasne dzięki badaniom kontrolowanym placebo, to fakt, że niektóre mediatory są pośredniczone mechanicznie (niepublikowane obserwacje), są uwalniane do środowiska pozakomórkowego w wyniku samego procesu pobierania próbek. Ma to ogromne znaczenie, ponieważ zrozumienie, które cytokiny są mechaniczne, a które specyficzne dla alergenu, pomoże ukierunkować przyszłe badania mające na celu ukierunkowanie na określone biomarkery do leczenia lub monitorowania choroby. Aby zrozumieć, czy mechaniczne uwalnianie odgrywa jakąkolwiek rolę w patologicznej odpowiedzi na alergeny, należy zbadać różne kohorty pacjentów, aby sprawdzić, czy ich reakcje różnią się w jakikolwiek sposób.

Racjonalne badanie

W świetle tego badacze proponują badanie mające na celu zbadanie wpływu pobierania próbek błony śluzowej na uwalnianie cytokin z nabłonka nosa. Badacze planują pobrać próbki od różnych kohort pacjentów (alergiczny nieżyt nosa, astma alergiczna, niealergiczni), aby zobaczyć, w jaki sposób pobieranie próbek oraz stan alergiczny lub niealergiczny wpływają na efekty mechaniczne. Włączając 10 pacjentów do każdej grupy, badacze mają nadzieję ustalić zakres „normalnego” mechanicznego uwalniania cytokin istotnych dla alergenu w każdej badanej grupie, co pomoże w przyszłych badaniach nad odpowiedziami specyficznymi dla alergenu. W celu zmapowania zarówno objawowych, jak i obiektywnych odpowiedzi na próbkowanie dróg oddechowych, zastosowane zostaną oceny objawów i przepływomierze dróg oddechowych. Aby zmapować kinetykę odpowiedzi, uczestnicy przejdą cykl pobierania próbek błony śluzowej w ciągu 8 godzin jednego dnia. Ponieważ nie podaje się żadnych substancji interwencyjnych, badanie to będzie wiązało się z bardzo niskim ryzykiem dla zaangażowanych osób, jednocześnie rzucając ważne światło na reakcje nabłonka na manipulację mechaniczną.

Projekt badania W tym prowadzonym w jednym ośrodku badaniu pilotażowym łącznie 36 pacjentów (n=12 na grupę) zostanie zwerbowanych na zasadzie dobrowolności i wszyscy otrzymają wymazy z nosa. Uczestnicy badania zostaną pobrani podczas jednej wizyty.

Wizyta przesiewowa

Procedura:

• Podpisanie formularza świadomej zgody
• Przydział numeru kontrolnego
• Dane demograficzne
• Historia alergii
• Ocena kryteriów włączenia i wykluczenia
• Test ciążowy dla kobiet, jeśli wymagają SPT
• Historia medyczna
• Pacjenci zgłaszający astmę w wywiadzie będą musieli przedstawić obiektywne dowody na niedrożność dróg oddechowych i odwracalność (odwracalność spirometryczna lub PC20 metacholina/histamina <8 mg)
• Leki towarzyszące
• Rynoskopia przednia
• Standardowy SPT z handlowym ekstraktem z: leszczyny, jesionu, mieszanki traw, ambrozji, bylicy pospolitej, D. pteronyssinus, D. farina, sierści kota i psa, alternarii, cladosporium, histaminy i kontroli negatywnej
• Pobieranie krwi (maks. 60ml heparynizowanej krwi i surowicy) - Część próbki krwi zostanie przesłana bezpośrednio do laboratorium w celu oznaczenia IgE całkowitego i IgE swoistego dla odpowiednich alergenów. Z reszty krwi zostanie przygotowany RNA i przechowywany w temperaturze -80°C, a surowica zostanie oddzielona i przechowywana w temperaturze -20°C.
• pobieranie próbek z nosa (pobieranie próbek z kirety śluzowej i pobieranie wydzieliny z nosa)

Wizyta próbna

Procedura:

• Ponowna ocena kryteriów włączenia i wykluczenia (wyniki swoistych dla alergenu IgE)
• Rejestracja leków towarzyszących
• Wyjściowe pobieranie krwi
• Wyjściowe pobieranie próbek z nosa z obu nozdrzy (pobieranie próbek wydzieliny z nosa) w 0 min
• Wyjściowy wynik TNSS
• Wyjściowy PNIF
• Rejestrowanie zdarzeń niepożądanych (AE).

• Krew, PNIF, pobieranie próbek z nosa (oba nozdrza: pobieranie próbek błony śluzowej z łyżeczki i pobieranie wydzieliny z nosa) oraz wynik TNSS, 15 min, 30 min, 45 min, 60 min, 75 min, 90 min, 120 min, 180 min, 240 min, 300 min, 360 min, 420 min, 480 min po wystąpieniu przebiegu próbkowania

  4 Procedury badawcze

4.1 Historia medyczna uczestników, dane demograficzne, leki towarzyszące Uczestnicy zostaną poproszeni o podanie historii medycznej, w tym danych demograficznych i leków towarzyszących, objawów alergicznych, w tym nasilenia i czasu trwania oraz historii leków alergicznych.

4.2 Historia alergii i wynik TNSS Uczestnicy zostaną poproszeni o występowanie kichania, wycieku z nosa, świądu nosa, przekrwienia błony śluzowej nosa oraz o ocenę każdego objawu. Użyją następującej metody oceny objawów: 0 = nieobecny; 1 = łagodna – obecna, ale dobrze tolerowana; 2 = umiarkowany – obecny, objaw jest dokuczliwy, ale nie przeszkadza w codziennych czynnościach; 3 = ciężki – objaw jest trudny do zniesienia i utrudnia codzienne czynności.

4.3 Rynoskopia przednia Rynoskopia przednia zostanie przeprowadzona raz podczas wizyty przesiewowej w celu wykluczenia odchyleń anatomicznych (np. skrzywienie przegrody) lub zmiany patologiczne (np. polipy nosa). Zostanie on wykonany za pomocą wziernika, gdy pacjent siedzi z głową lekko do tyłu.

4.4 Szczytowy wdechowy nosowy przepływomierz (PNIF) Przenośność i łatwość PNIF zapewnia wyjątkową możliwość uzyskania obiektywnych pomiarów. Został on również niedawno zatwierdzony jako narzędzie badawcze podczas prowokacji alergenem donosowym.

4.4.1 Procedura: PNIF wykorzystuje rurkę o zmiennej średnicy kalibrowaną bezpośrednio w litrach na minutę wraz z pierścieniem wskaźnika o niskiej bezwładności. Pozycja pierścienia po manewrze wdechowym wskazuje maksymalny osiągnięty przepływ. Urządzenie działa, gdy pacjent robi wdech ustami lub nosem, co powoduje zassanie powietrza przez miernik, a kursor przesuwa się po skali, wskazując prędkość wdechu. Uzyskane natężenie przepływu można odnotować, sprawdzając położenie kursora względem skalibrowanej skali.

4.4.2 PNIF w prowadzeniu badania: Uczestnicy zostaną przeszkoleni w zakresie korzystania z PNIF w dniu badania, a następnie będą go używać we wszystkich punktach czasowych badania w celu uzyskania informacji na temat przepływu przez nos.

4.5 Punktowy test skórny 4.5.1 Procedura: Alergeny wprowadza się do skóry właściwej przedramienia, delikatnie nakłuwając skórę przez kroplę (20 ul) roztworu zawierającego alergen sterylnym lancetem w odległości co najmniej 2 cm między poszczególnymi punktami aplikacji. 0,9% roztwór chlorku sodu zostanie użyty jako kontrola negatywna, a histamina jako kontrola pozytywna. U wcześniej uczulonych osób swędzący obrzęk i zaczerwienienie skóry (bąbel i zaczerwienienie) wystąpią w ciągu 15 minut po prowokacji odpowiednim alergenem. Po 20 minutach roztwory alergenów zostaną wytarte, a brzegi bąbli zaznaczone długopisem. Przezroczysta taśma zostanie przyklejona do skóry w celu przeniesienia konturu bąbla na taśmę do płyt. Powierzchnia bąbli zostanie obliczona za pomocą cyfrowej planimetrii. W celu włączenia bąble o średnicy co najmniej 3 mm będą uważane za reakcje dodatnie.

4.5.2 Roztwory testowe: Dostępny w handlu panel alergenów pyłków drzew i traw, chwastów i bylin (Allergopharma, Wiedeń, Austria) zostanie wykorzystany podczas wizyty przesiewowej i będzie przechowywany zgodnie z instrukcjami producenta. Jako kontrole zostaną użyte sterylny 0,9% roztwór NaCl (kontrola negatywna) i histamina (kontrola pozytywna, Allergopharma, Wiedeń, Austria). Będą przechowywane zgodnie z zaleceniami producenta.

4.5.3 SPT w prowadzeniu badania:

Wizyta przesiewowa:

Wykonany zostanie standardowy punktowy test skórny z komercyjnym ekstraktem z pyłku brzozy oraz panelem alergenów pyłków drzew i traw, chwastów i bylin (wszystkie Allergopharma, Wiedeń, Austria) stosowanych w rutynowej diagnostyce w poradni alergologicznej oddziału laryngologicznego w celu oceny profilu uczulenia uczestników podczas wizyty przesiewowej.

4.5.4 Środki ostrożności Ze względów bezpieczeństwa uczestnicy będą monitorowani przez 30 minut po teście. Wszystkie badania będą wykonywane w Przychodni Oddziału Laryngologicznego, gdzie dostępne jest pełne wyposażenie ratunkowe.

4.6 Pobieranie krwi i pomiar parametrów immunologicznych Próbki krwi będą pobierane podczas wizyty przesiewowej i podczas wszystkich wizyt badawczych przez nakłucie żyły łokciowej przed badaniem skóry. Maksymalnie 60 ml na wizytę zostanie pobrane w postaci heparynizowanej (np. do testów wrażliwości na bazofile) lub do przygotowania surowicy (np. do oceny poziomu immunoglobulin całkowitych i specyficznych dla alergenu lub testu RBL). Fiolki z surowicą będą przetwarzane, a surowica będzie przechowywana w temperaturze -20°C. Swoiste dla alergenu IgE w próbkach krwi z wizyty przesiewowej zostaną zmierzone metodą CAP-FEIA w celu oceny swoistej dla alergenu klasy RAST pacjentów. Pomiar całkowitych, wolnych i swoistych dla alergenu surowiczych IgE, IgG, IgA i IgM zostanie przeprowadzony metodą CAP-FEIA, metodą pomiaru mikromacierzy lub testu ELISA. Mediatory odpornościowe będą mierzone za pomocą platformy MSD przez nas lub przez naszych współpracowników z AstraZeneca, Cambridge, Wielka Brytania. Pomiar zostanie przeprowadzony na koniec badania we wszystkich zebranych próbkach surowicy, aby zminimalizować zmienność między testami.

4.7 Testy ciążowe U uczestniczek ciąża zostanie wykluczona za pomocą standardowego testu ciążowego z moczu. Badanie będzie wykonywane przed pierwszym testem skórnym na wizycie przesiewowej, a następnie raz w miesiącu.

4.8 Pobieranie wycinków z nosa Pobieranie wycinków z nosa będzie przeprowadzane podczas wszystkich wizyt. Podczas każdej wizyty próbki będą pobierane za pomocą nososorpcji FXi/PU (zawierającej syntetyczną matrycę absorpcyjną (SAM)) lub kirety plastikowej o długości 10 cm (urządzenia do nosorpcji firmy Hunt Developments, Wielka Brytania) (urządzenia Curette firmy Arlington Scientific, USA)

4.8.1 Nasosorpcja przy użyciu FXi/PU (Hunt Developments, Wielka Brytania). Na wizualizacji urządzenie zostanie wprowadzone do jamy nosowej i umieszczone wzdłuż bocznej ściany przy małżowinie nosowej dolnej. Palec wskazujący pacjenta zostanie użyty do naciśnięcia zewnętrznych części chrząstki skrzydełkowej i bocznej nosa, aby utrzymać urządzenie na miejscu. Po 1 minucie urządzenia zostaną usunięte, a następnie zamrożone w temperaturze -80°C.

4.8.2 Pobieranie próbek mRNA błony śluzowej Użyje się 10-centymetrowej łyżeczki do nosa (Rhino-Probe, Arlington Scientific, USA lub Cellskim, Hunt Developments, Wielka Brytania). Podczas bezpośredniej wizualizacji kireta zostanie przyłożona do środkowo-dolnej części małżowiny nosowej dolnej. Kiretę dociska się do powierzchni błony śluzowej i przesuwa na zewnątrz 2-3 razy. Ten ruch zostanie powtórzony 2-3 razy, aby zapewnić dobre pobranie próbki. Wykazano, że ta kireta i technika nie powodują znacznego dyskomfortu u uczestników, a zatem ma tę zaletę, że nie wymaga znieczulenia miejscowego. Po pobraniu Komórki zostaną poddane lizie w buforze Qiagen RLT i przechowywane w temperaturze -80°C do późniejszej analizy mRNA.

5 Badane produkty i badany lek 5.3 Leki towarzyszące 5.3.1 Informacje ogólne Wszystkie dodatkowe leki przyjmowane przez uczestników przed przystąpieniem do badania lub w jakimkolwiek momencie badania są traktowane jako leki towarzyszące i zostaną udokumentowane w CRF. Jednoczesne stosowanie leków powinno być ograniczone do minimum podczas badania, ale jeśli uzna się to za konieczne, można je podać, jeśli nie koliduje to z protokołem badania.

5.3.2 Lek doraźny Chociaż w tym badaniu zdarzenia anafilaktyczne są bardzo mało prawdopodobne, zawsze należy je brać pod uwagę jako możliwe. Dlatego kompletny zestaw ratunkowy będzie dostępny natychmiast w przypadku wystąpienia reakcji anafilaktycznych w SPT. Ponadto, jeśli uczestnik cierpi na silne objawy skórne, po SPT zostanie podana desloratadyna 5 mg w celu złagodzenia objawów.

5.3.3 Zabronione jednoczesne stosowanie leków

Uczestnicy muszą pozostać bez leków zakłócających procedury badania przez cały czas trwania badania. Podczas tego badania niedozwolone jest jednoczesne stosowanie następujących leków:

• Ogólnoustrojowe lub miejscowe kortykosteroidy
• Inne leki immunosupresyjne
• Leki przeciwhistaminowe lub kromoglikan disodu 3 dni przed wizytą przesiewową
• Ogólnoustrojowe lub donosowe leki adrenergiczne
• Leki psychofarmakologiczne

• Inhibitory ACE lub beta-blokery

  6 Zdarzenia niepożądane Zdarzenie niepożądane to każde zdarzenie podczas badania klinicznego, w tym współistniejąca choroba lub wypadek, które pogarsza samopoczucie uczestnika; może również przybrać formę nieprawidłowej wartości laboratoryjnej. Termin zdarzenie niepożądane nie oznacza związku przyczynowego z badanym leczeniem.

Wszyscy uczestnicy, u których wystąpią zdarzenia niepożądane – niezależnie od tego, czy zostaną uznane za związane ze stosowaniem badanego leku, czy nie – będą monitorowani do czasu ustąpienia objawów i powrotu nieprawidłowych wartości laboratoryjnych do wartości wyjściowych lub do czasu zadowalającego wyjaśnienia zaobserwowanych zmian lub do śmierci , w takim przypadku zostanie dostarczony pełny raport patologiczny sporządzony przez wykwalifikowanego patologa. Wszystkie ustalenia należy zgłosić na stronie „zdarzenie niepożądane” w formularzu dokumentacji przypadku.

Wszystkie zdarzenia niepożądane będą zgłaszane i dokumentowane w sposób opisany poniżej. Zdarzenia niepożądane dzielą się na kategorie „poważne” i „niepoważne”. Określa procedurę, którą należy zastosować w celu zgłoszenia/udokumentowania zdarzenia niepożądanego (patrz poniżej).

6.1 Definicja poważnych i innych niż poważne zdarzeń niepożądanych

Poważnym zdarzeniem niepożądanym jest:

• Każde zdarzenie, które jest śmiertelne lub zagrażające życiu
• Dowolne zdarzenie, które trwale wyłącza
• Każde zdarzenie wymagające lub przedłużające hospitalizację
• Każde zdarzenie związane z rakiem, wadą wrodzoną lub występujące w wyniku przedawkowania (zastosowanie dawki większej niż zalecana).

Zdarzenia niepożądane, które nie mieszczą się w tych kategoriach, są określane jako niepoważne.

6.2 Ocena ciężkości AE

Niezależnie od klasyfikacji zdarzenia niepożądanego jako poważnego lub nieciężkiego (patrz wyżej), jego ciężkość należy ocenić jako łagodną, ​​umiarkowaną lub ciężką, wyłącznie na podstawie kryteriów medycznych:

Łagodny = nie koliduje z rutynowymi czynnościami, akceptowalny Umiarkowany = koliduje z rutynowymi czynnościami Poważny = niemożliwy do wykonania rutynowych czynności, uznany przez lekarza za niedopuszczalny, wymagający leczenia, wymagający przerwania badania lub ma efekt szczątkowy.

Należy zauważyć, że poważne zdarzenie niepożądane nie musi mieć poważnego charakteru. Niezależnie od ciężkości, wszystkie poważne zdarzenia niepożądane muszą być zgłaszane w sposób przedstawiony poniżej.

6.3 Zgłaszanie/dokumentowanie zdarzeń niepożądanych Zdarzenia niepożądane zbierane są poprzez spontaniczne zgłoszenia. 6.3.1 Zgłaszanie/dokumentowanie poważnych zdarzeń niepożądanych Wszystkie poważne zdarzenia niepożądane, które wystąpiły podczas tego badania, niezależnie od tego, czy są uważane za związane z badaniem, czy nie, muszą być udokumentowane na stronie „Zdarzenie niepożądane” w formularzu zapisu przypadku.

Należy sporządzić sprawozdanie uzupełniające zawierające wszystkie nowe informacje uzyskane w związku z poważnym zdarzeniem, które zostanie zebrane.

Na żądanie badacz przedłoży komisji etycznej kopie wszystkich tych raportów. W razie potrzeby śledczy poinformują władze.

6.3.2 Zgłaszanie/dokumentowanie zdarzeń niepożądanych innych niż poważne Należy je udokumentować na stronie „Zdarzenie niepożądane” w formularzu dokumentacji przypadku.

7 Analiza statystyczna Analizy te będą miały na celu zbadanie wszelkich statystycznie istotnych różnic w wzdłużnych trajektoriach cytokin w nosie między osobami zdrowymi, osobami z atopią i astmatykami. Najpierw zajmiemy się podstawowymi statystykami opisowymi. Charakterystyka podmiotu (np. stan zdrowia, zmienne demograficzne) i zmienne wynikowe (np. uwalnianie cytokin przez nos, odpowiedzi kliniczne) zostaną opisane przez obliczenie wartości maksymalnej, minimalnej, mediany, średniej i odchylenia standardowego dla zmiennych metrycznych oraz bezwzględnych i względnych częstości dla zmiennych kategorycznych dla każdej grupy pacjentów (osoby zdrowe, osoby z atopią i astmatycy).

Zmiany dziennika od linii bazowej będą porównywane między grupami iw każdym punkcie czasowym przy użyciu testów t dla każdego porównania parami między grupami, aby zbadać kształt trajektorii w czasie. W celu graficznej ilustracji zostaną wykreślone indywidualne trajektorie zmian logarytmiczno-początkowych każdego pacjenta, jak również średnie grupowe z 95% przedziałem ufności.

Jeśli zmiany logarytmu w stosunku do linii bazowej wykażą rozsądną liniowość, przetestujemy związek między grupami pacjentów a trajektoriami podłużnymi, używając mieszanych modeli liniowych z losowymi punktami przecięcia specyficznymi dla podmiotu, aby uwzględnić korelacje wewnątrzosobnicze powtarzanych pomiarów i grupować według warunki interakcji czasowej, aby przetestować statystycznie istotne różnice w trajektoriach. Motywacją do tego mieszanego podejścia do modelowania będzie zwiększenie mocy poprzez łączenie informacji w wielu punktach czasowych. Zostaną również wykreślone średnie trajektorie i 95% przedziały ufności wywnioskowane z modelowania mieszanego

8 Aspekty etyczne i prawne Badanie zostanie przeprowadzone zgodnie z lokalnymi wymogami prawnymi i GCP. Zostanie przeprowadzony zgodnie z wytycznymi Deklaracji Helsińskiej (1964), uwzględniając aktualne rewizje.

8.1 Świadoma zgoda uczestnika Przed dopuszczeniem do badania uczestnik musi wyrazić zgodę na udział po wyjaśnieniu w zrozumiałej dla niego formie, rodzaju, zakresie i możliwych konsekwencjach badania klinicznego. Podmiot musi wyrazić zgodę na piśmie. Podpis badacza potwierdzi zgodę osoby badanej. Pacjent może wycofać zgodę, nawet bez zgłaszania uwag, w dowolnym momencie i bez negatywnych konsekwencji dla swojej przyszłej opieki medycznej. Próbki nosorpcji i/lub RNA i/lub krwi mogą być przesyłane w anonimowej formie do partnerów współpracujących poza Austrią w celu analizy (np. analiza rozszczepionej i całej IL-33 przez AstraZeneca, Cambridge UK). Pacjent jest o tym informowany w formularzu świadomej zgody.

8.2 Potwierdzenie/zatwierdzenie badania Przed rozpoczęciem badania protokół badania zostanie przedłożony Komisji Etyki Uniwersytetu Medycznego w Wiedniu i szpitala ogólnego w Wiedniu (Borschkegasse 8b/E 06, 1090 Wiedeń, Austria).

8.3 Ubezpieczenie Wszystkie osoby biorące udział w tym badaniu będą ubezpieczone w Zürich Insurance Company (Zürich-Versicherungs-Aktiengesellschaft, Schwarzenbergplatz 15, 1010 Wiedeń, Tel. +43 50 1255 1255).

8.4 Poufność Wszystkie nazwiska osób badanych będą utrzymywane w tajemnicy w aktach badaczy. Osoby badane będą identyfikowane w całej dokumentacji i ocenie na podstawie liczby przydzielonej im podczas badania. Osoby badane zostaną poinformowane, że wszystkie wyniki badań będą przechowywane i przetwarzane w ścisłej tajemnicy.

9 Dokumentacja i wykorzystanie wyników badań 9.1 Dokumentacja wyników badań Wszystkie wyniki zebrane podczas badania zostaną zebrane w pliku danych źródłowych, a następnie przeniesione do formularzy opisów przypadków (CRF). Wszystkie wpisy na kartach akt sprawy będą czytelne, czarnym lub niebieskim atramentem. W przypadku wprowadzenia poprawek do wpisów w formularzu akt sprawy, słowa lub cyfry zostaną otoczone i przekreślone pojedynczą kreską. Obok starego wpisu i daty zostanie wpisana poprawna wartość, a poprawka zostanie zaparafowana. Wpisów błędnych nie wolno zakrywać płynem korygującym ani zamazywać lub w jakikolwiek sposób czynić nieczytelnymi. Wypełnione CRF zostaną podpisane przez badacza. CRF zostaną zakończone natychmiast po egzaminie końcowym. Dokumentacja medyczna, na której opiera się CRF, będzie przechowywana przez co najmniej 15 lat.

9.2 Wykorzystanie wyników badania Wyniki tego badania zostaną opublikowane przez badaczy w czasopiśmie naukowym i zaprezentowane na spotkaniach naukowych. Manuskrypt zostanie rozesłany do wszystkich współbadaczy przed złożeniem.

10 Rozważania dotyczące potencjalnych zagrożeń i korzyści dla uczestników badania oraz wybór dawki

Włączeni uczestnicy nie odniosą bezpośrednich korzyści z badania. Ponieważ jednak kinetyka mechanicznej stymulacji błony śluzowej wciąż nie jest w pełni poznana, to kompleksowe badanie pilotażowe będzie okazją do pokierowania przyszłymi badaniami, które, miejmy nadzieję, doprowadzą do odkrycia nowych celów terapeutycznych.

Potencjalne zagrożenia dla uczestników to ból, infekcja i krwiak w miejscu pobrania krwi. Podczas pobierania próbek błony śluzowej nosa i wydzieliny możliwe jest lekkie krwawienie z nosa. Podczas SPT, chociaż jest to wysoce nieprawdopodobne, możliwe są reakcje anafilaktyczne. Aby zminimalizować ryzyko reakcji anafilaktycznych i zapewnić optymalne leczenie w przypadku wystąpienia reakcji anafilaktycznej, pacjenci będą monitorowani przez co najmniej 30 minut po SPT. Podczas wszystkich wizyt uczestników przeszkolony personel i leki ratunkowe będą dostępne przez cały czas.