Efeitos das proteínas dietéticas no metabolismo lipídico hepático

Este projeto de pesquisa inclui três subestudos de homens jovens saudáveis ​​e com peso normal.

Sub-estudo A1: Os efeitos do aumento agudo e crônico na ingestão de proteínas no corpo inteiro e no metabolismo lipídico hepático serão estudados em homens saudáveis. Serão recrutados dois grupos de 7 sujeitos.

Um grupo será estudado em três ocasiões, durante as quais seu metabolismo será avaliado em condições basais, pós-absortivas e mais de 6 horas após a ingestão de refeição mista contendo carboidrato, gordura (incluindo triglicerídeos de cadeia média (MCT) marcados com 13C3 tri-octanoato ) e proteína.

• controle: em uma ocasião os indivíduos terão recebido uma dieta isocalórica (55% de carboidratos, 30% de gordura, 15% de proteína) durante 4 dias. Na manhã do 5º dia, serão estudados durante 2 horas em condições basais, pós-absortivas e mais 6 horas após a ingestão de uma refeição que forneça cerca de 10 kcal/kg de peso corporal e contenha 55% de hidratos de carbono, 35% de gordura (dos quais 15 % de triglicerídeos de cadeia média (MCT) marcados com 13C3 trioctanoato e 10% de proteína.
• aumento agudo na ingestão de proteínas: na segunda ocasião, eles terão recebido uma dieta isocalórica (55% carboidrato, 30% gordura, 15% proteína) durante 4 dias. Na manhã do 5º dia, eles serão estudados por 2 horas em condições basais, pós-absortivas e mais 6 horas após a ingestão de uma refeição fornecendo cerca de 12,5 kcal /kg de peso corporal e contendo 45% de carboidratos, 30% de gordura (dos quais 13% de triglicerídeos de cadeia média (MCT) marcados com 13C3 trioctanoato e 25% de proteína.
• ingestão proteica crônica: na terceira ocasião, eles terão recebido uma dieta hipercalórica (130% de necessidade energética, fornecendo 42% de carboidratos, 23% de gorduras, 35% de proteínas; isso corresponde à dieta isocalórica fornecida nas duas primeiras ocasiões, adicionada com 1g/dia de proteína) durante 4 dias. Na manhã do 5º dia, eles serão estudados por 2 horas em condições basais, pós-absortivas e mais 6 horas após a ingestão de uma refeição fornecendo cerca de 12,5 kcal/kg de peso corporal e contendo 45% de carboidratos, 30% de gordura (dos quais 13% de triglicerídeos de cadeia média (MCT) marcados com 13C3 trioctanoato) e 25% de proteína. Os três testes serão feitos em ordem aleatória, com um período de washout de pelo menos 4 semanas entre cada teste.

Em cada ocasião, os seguintes parâmetros serão monitorados em condições basais e após a ingestão da refeição mista.

Glicose deuterada (6,6 2H2-glicose) e glicerol (glicerol 2H5) serão infundidos ao longo dos testes. As medições incluirão:

• gasto energético corporal total e oxidação líquida do substrato (calorimetria indireta)
• glicose plasmática, ácidos graxos livres, VLDL-TG, corpos cetônicos, insulina, glucagon, hormônio do crescimento
• Oxidação MCT (respiração 13CO2)
• Turnover de glicose e glicerol
• Cinética VLDL (modelização da incorporação de 2H5 em triglicerídeos VLDL. Subestudo A2: Um segundo grupo de 7 indivíduos será estudado em três ocasiões de acordo com o mesmo protocolo, exceto que a refeição de teste não incluirá MCT e que os triglicerídeos de cadeia longa (LCT) serão marcados com trioleína 13C3. Os mesmos parâmetros metabólicos serão registrados, exceto a oxidação do MCT, que será substituída pela oxidação do LCT.

Este sub-estudo permitirá avaliar a hipótese de que as proteínas dietéticas aumentam a oxidação lipídica hepática de todo o corpo e diminuem a secreção hepática de triglicerídeos VLDL.

Subestudo B: Os efeitos do aumento agudo e crônico na ingestão de proteínas na lipogênese hepática de novo induzida por frutose e na secreção de triglicerídeos VLDL serão estudados em homens saudáveis. Um grupo de 8 indivíduos será recrutado. Cada indivíduo será estudado em 4 ocasiões separadas durante as quais seu metabolismo será estudado por 2 horas em condições basais e mais de 6 horas após a ingestão de uma refeição de teste padrão contendo 0,75 g/kg de frutose marcada com 13C6 frutose e 0,3 ou 0,8 g/kg de proteína.

• controle: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta rica em frutose (dieta isocalórica contendo 45% de carboidratos complexos, 10% de açúcares, 30% de gordura e 15% de proteína, adicionada de 3,0 g/kg de peso corporal/dia de frutose) e medições será realizada em condições basais e após a administração de uma refeição teste padrão com 0,3 g/kg de proteína.
• efeitos agudos da proteína: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta rica em frutose, e as medições serão realizadas em condições basais e após a administração de uma refeição teste padrão com 0,8 g/kg de proteína
• Efeitos crônicos da alta proteína: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta rica em frutose adicionada de 1g/kg de proteína de peso corporal/dia e após a administração de uma refeição de teste padrão com 0,3 g/kg de proteína.
• Efeitos crônicos + agudos de alta proteína: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta rica em frutose adicionada de 1g/kg de proteína de peso corporal/dia e após a administração de uma refeição de teste padrão com 0,8 g/kg de proteína

Glicose deuterada (6,6 2H2 Glucose) e glicerol (2H5 glicerol) serão infundidos ao longo dos testes. As medições incluirão:

• gasto energético corporal total e oxidação líquida do substrato (calorimetria indireta)
• glicose plasmática, ácidos graxos livres, VLDL-TG, corpos cetônicos, insulina, glucagon, hormônio do crescimento
• Oxidação da frutose (respiração 13CO2)
• Lipogênese hepática de novo (13C VLDL-palmitato)
• Gliconeogênese (glicose 13C)
• Turnover de glicose e glicerol
• Cinética VLDL (modelização da incorporação de 2H5 em VLDL-triglicéridos Este sub-estudo permitirá avaliar a hipótese de que as proteínas dietéticas inibem a lipogénese hepática de novo e aumentam a oxidação da frutose.

Biópsias de tecido adiposo subcutâneo serão obtidas em duas ocasiões, ou seja, após dieta hiperproteica e controle para análise da expressão gênica.

Subestudo B3: Os efeitos da hiperglucagonemia na lipogênese hepática de novo induzida por frutose e na secreção de triglicerídeos VLDL serão estudados em homens saudáveis. Um grupo de 6 indivíduos será recrutado. Cada indivíduo será estudado em 2 ocasiões separadas durante as quais seu metabolismo será estudado por 2 horas em condições basais e mais de 8 horas após a ingestão de uma refeição de teste padrão contendo 0,75 g/kg de frutose marcada com 13C6 frutose e 0,3 g/kg de proteína.

• controle: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta balanceada em energia e as medições serão realizadas em condições basais e após a administração de uma refeição teste padrão com 0,75 g/g de frutose marcada com 13C e 0,3 g/kg de proteína.
• efeitos agudos do glucagon: os indivíduos serão estudados após 6 dias de uma dieta balanceada em energia e as medições serão realizadas em condições basais e após a administração de uma refeição de teste padrão com 0,75 g/g de frutose marcada com 13C e 0,3 g/kg de proteína juntamente com uma infusão de glucagon (5ng/kg/min)

Glicose deuterada (6,6 2H2 Glucose) e glicerol (2H5 glicerol) serão infundidos ao longo dos testes. As medições incluirão:

• gasto energético corporal total e oxidação líquida do substrato (calorimetria indireta)
• glicose plasmática, ácidos graxos livres, VLDL-TG, corpos cetônicos, insulina, glucagon, hormônio do crescimento
• Oxidação da frutose (respiração 13CO2)
• Lipogênese hepática de novo (13C VLDL-palmitato)
• Gliconeogênese (glicose 13C)
• Turnover de glicose e glicerol
• Cinética VLDL (modelização da incorporação de 2H5 em VLDL-triglicéridos Este sub-estudo permitirá avaliar a hipótese de que as proteínas dietéticas inibem a lipogénese hepática de novo e aumentam a oxidação da frutose.

através de uma secreção aumentada de glucagon