Qualidade de Embriões Humanos em FIV, Cultura em Oxigênio Diferenciado

O objetivo deste ensaio clínico é avaliar a importância da tensão diferencial de O2 para os embriões em desenvolvimento. Como objetivo secundário, investigamos os níveis de espécies reativas de oxigênio (ROS) no meio gasto dos blastocistos em desenvolvimento.

Este é um estudo prospectivo, intervencional multicêntrico usando embriões irmãos.

Mulheres (idade 18-41 e peso normal) submetidas a tecnologia de reprodução assistida (ART), com ciclos planejados de fertilização in vitro ou injeção intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) podem ser incluídas no estudo.

Os pacientes incluídos no projeto seguirão o protocolo padrão de fertilização in vitro e tratamento, incluindo injeções hormonais, coleta de oócitos, transferência de embriões e criopreservação de blastocistos. Nenhum outro exame ou desvio do tratamento padrão é necessário para participar do projeto.

Ao recuperar ≥ 8 ovócitos após a coleta e mediante aceitação prévia da paciente, ela/o casal pode ser incluído no estudo. O número mínimo de 8 oócitos foi determinado para garantir uma média de dois blastocistos. Os ovócitos, serão divididos em 2 grupos. A primeira parte dos oócitos coletados será incluída como controle, enquanto a segunda parte dos oócitos coletados será incluída como grupo de estudo.

De acordo com o tratamento padrão, ambos os grupos de ovócitos serão colocados em incubadora com 5% de O2. A partir de vídeos de lapso de tempo, observações de fertilização e clivagem após 20 horas ± 1h e 44 horas ± 1h, respectivamente, serão anotadas. Após 3 dias de cultivo (68h± 1h), as placas com os embriões-estudo serão transferidas para incubadora time-lapse com tensão ultrabaixa de O2 (2%). Os embriões de controle permanecerão na incubadora convencional de lapso de tempo de 5% O2.

No quinto dia, os embriões serão avaliados por um embriologista treinado, e o blastocisto com maior potencial de implantação esperado será transferido para o útero da paciente. Os embriões excedentes com potencial de implantação esperado serão criopreservados. Após a transferência ou criopreservação, os meios dos poços com os blastocistos usados ​​serão coletados e armazenados para análise de ROS.

Resultado primário:

a) Parâmetros morfocinéticos melhorados; diminuição da diferença de tempo de 5 células (t5) para estágio de blastocisto (tB) nos embriões cultivados em tensões diferenciais de O2.

Como resultados secundários:

1. Diminuição da atividade de ROS no meio gasto dos blastocistos em desenvolvimento cultivados em tensões diferenciais de O2.
2. Número de blastocistos transferíveis/vitrificados nos grupos de estudo e teste
3. Verificação da gravidez clínica, por ecografia por volta da 7ª semana. Todas as gestações ou abortos espontâneos serão registrados para todos os pacientes, se possível.

Valor para a Saúde Pública:

Se nossa hipótese for confirmada como esperado, seremos capazes de otimizar as condições de desenvolvimento, ou seja, taxa de desenvolvimento mais rápida de t5 a tB e diminuição dos níveis de ROS para o embrião in vitro. Do ponto de vista clínico, isso pode afetar a taxa de implantação do blastocisto e, portanto, o sucesso da gravidez de casais inférteis, reduzindo o número de tratamentos para obter uma gravidez viável.