Экспресс-тестирование антител IgG к SARS-CoV-2 у медицинских работников из группы высокого риска (COVID-Antibody)

Успех Сингапура, Тайваня и Гонконга в ограничении воздействия внезапного острого респираторного синдрома коронавируса-2 (SARS-CoV-2), также известного как COVID-19, объясняется их готовностью, но в основном внедрением и распространением быстрых диагностических тестов на SARS-CoV-2 и создание децентрализованного тестирования по месту оказания медицинской помощи (POC) (https://www.nature.com/articles/d41587-020-00010-2). До сих пор основным ответом на вспышку SARS-CoV-2 было тестирование методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР является золотым стандартом для диагностики инфекционного агента, и его преимущество заключается в том, что праймеры, необходимые для таких тестов, могут быть получены относительно быстро, как только станет известна вирусная последовательность.

Первые количественные ПЦР-тесты на основе обратной транскриптазы (ОТ-ПЦР) для обнаружения SARS-CoV2 были разработаны и распространены Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) в январе, вскоре после того, как вирус был идентифицирован. Однако протокол испытаний сложен и дорог и в основном подходит для крупных централизованных диагностических лабораторий. Тесты обычно занимают 4-6 часов, но логистические требования к отправке клинических образцов означают, что время обработки составляет в лучшем случае 24 часа. Новый быстрый ПЦР-тест (45 минут) от Cepheid был одобрен Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США 21 марта и будет доступен в конце месяца. Быстрые POC-тесты также необходимы для ускорения принятия клинических решений и снятия части нагрузки с централизованных испытательных лабораторий. Что наиболее важно, текущее положение дел в системе здравоохранения Университета Индианы, а также во многих других странах таково, что медицинские работники, в том числе из отделений неотложной помощи и интенсивной терапии, в настоящее время не могут пройти адекватное тестирование в существующих учреждениях. Хуже всего то, что их доступ к соответствующим средствам индивидуальной защиты (СИЗ) был ограничен, что увеличивает риск заражения и вызывает значительный стресс и беспокойство у передовых медицинских работников по всей стране.

Возвращаясь к сингапурскому опыту, они использовали иммуноанализы, которые могут предоставить историческую информацию о воздействии вируса, а также диагностические данные. Они использовали распознавание антиген-антитело либо с помощью моноклональных антител (мАт) для обнаружения вирусных антигенов в клинических образцах, либо с помощью клонированных вирусных антигенов для обнаружения антител пациентов, направленных против вируса. Формат анализа с латеральным потоком — по сути, измерительная полоска, заключенная в кассету, — содержит реагенты захвата (либо mAb, направленные на вирусный антиген, либо вирусный антиген, распознаваемый антителами пациента), иммобилизованные в определенных местах на нитроцеллюлозной мембране, а также как меченые детекторные mAb, которые распознают одну и ту же мишень. Положительный результат, вызванный связыванием анализируемого вещества и захватывающего mAb, а также связыванием mAb-детектора, виден в виде цветной линии. Достаточно двух капель крови из булавочного укола, чтобы обнаружить вирус. По сути, это те же домашние наборы для беременных. Некоторые из этих тестов доступны в Азии, и большинство европейских стран также используют их. В США компания RayBiotech разработала аналогичный тест, используя знания азиатских тестов (https://www.raybiotech.com/covid-19-igm-igg-rapid-test-kit/). Этот продукт имеет маркировку CE и сертифицирован для диагностического использования в ЕС. Заявка на получение разрешения FDA на экстренное использование тестов была подана 16 марта 2020 года. На данный момент FDA одобрило только ПЦР-тестирование. По состоянию на 23 марта 2020 года испытания на боковой поток не были утверждены. Однако этот тест на латеральный поток может использоваться на законных основаниях в США для диагностики in vitro в качестве теста POC, когда его проводит лицензированный практикующий врач. Эти наборы были разработаны Ray Biotech собственными силами и проверены с использованием образцов, взятых в больнице от пациентов с клиническими симптомами в Гуанчжоу, Китай (все подтверждены с помощью ПЦР). Текущие запасы в размере 10 000 комплектов ежедневно пополняются в RayBiotech, и в течение следующей недели планируется увеличить производство в десять раз. Сертификат CE можно найти здесь: https://www.raybiotech.com/files/images/CG-COV_CE-Certificates.jpg.

Основываясь на положительном опыте Сингапура, Тайваня и Гонконга, а также для сдерживания быстрого распространения вируса в США, мы предлагаем использовать антитела POC SARS-CoV-2 IgG у медицинских работников высокого риска с симптомами или без них, ранее находящихся на карантине. или нет. Действительно, мы предполагаем, что частота сероконверсии среди медицинских работников отделений неотложной помощи и отделений интенсивной терапии высока и выше, чем предсказывают современные модели, и что некоторые случаи протекают бессимптомно или с легкими симптомами.

Есть два дополнительных преимущества тестирования сероконверсии.

1. Хотя официальных отчетов нет, мы отчетливо слышим и видим селфи тревоги, стресса и истощения от наших коллег на передовой. Таким образом, для медицинских работников знание того, что у них произошла сероконверсия, поможет им быть более уверенными в том, что теперь они защищены и могут работать в более безопасных условиях, поскольку недавно было показано, что повторное заражение не может произойти у инфицированных SARS-CoV-2 макак-резус https: //www.biorxiv.org/content/10.1101/2020.03.13.990226v1.
2. Медицинские работники представляют собой идеальный пул доноров для реконвалесцентной плазмы из-за их приверженности и того факта, что они обычно проходят тестирование на сдачу крови или в настоящее время являются донорами крови. FDA только что утвердило основной протокол сбора и введения реконвалесцентной плазмы: https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/investigational-new-drug-ind-or-device-exemption-ide-process-cber. /Investigational-covid-19-выздоравливающий-плазма-экстренная ситуация-inds

Таким образом, «вы не можете бороться с огнем с завязанными глазами, и мы не можем остановить эту пандемию, если не знаем, кто заражен». (Генеральный директор Всемирной организации здравоохранения, 16 марта 2020 г.).

В случае успеха и подтверждения мы надеемся быстро масштабировать его, чтобы предложить быстрое тестирование на антитела IgG к SARS-CoV-2 для населения в целом, как это было сделано в странах, в которых почти не было смертей от COVID-19.