Выбор пола сперматозоидов человека

Целью исследования является тестирование простого, надежного и недорогого метода отбора сперматозоидов, специфичных для пола. Пары будут проходить обследование и лечение в соответствии со стандартными процедурами клиники. Образцы спермы, предоставленные для лечения бесплодия, будут дополнительно проанализированы обычным анализом спермы на объем, концентрацию, подвижность и морфологию. Образцы спермы будут предоставлены добровольными мужчинами, проходящим лечение от бесплодия. Многослойный градиент плотности будет выполняться с использованием одобренного FDA решения, среды для изоляции клеток Enhance-S Plus (Vitrolife, Сан-Диего, Калифорния).

Этот градиент плотности также используется для стандартной подготовки спермы к внутриматочной инсеминации. X-содержащие сперматозоиды и Y-содержащие сперматозоиды будут идентифицированы по фракциям градиента плотности. Суспензию спермы наносят на предметные стекла для анализа FISH с использованием центромерных зондов для хромосом 18, X и Y. Соотношение сперматозоидов, несущих X- и Y-хромосому, будет оцениваться в процентах по крайней мере на 200 клеток на предметное стекло. Анеуплоидные клетки и клетки без сигналов будут опущены. Неотобранные фракции каждого образца будут служить контролем. Будет рассчитана доля сперматозоидов, несущих Х, после 4-слойного градиента плотности. После тщательного консультирования выбранный образец пола до зачатия затем будет использоваться для вспомогательного репродуктивного оплодотворения - экстракорпорального оплодотворения с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ИКСИ) или без нее или внутриматочной инсеминации, которые являются стандартными процедурами лечения.