孟加拉国环境肠功能障碍研究 (BEED)

研究设计 这将是一项基于社区的干预研究。 受试者的调查、筛选和招募将在达卡市的米尔布尔进行。

受试者将从两个年龄组招募参与者：儿童组（12 至 18 个月）和成人组（18 至 45 岁）。 儿童群组将由两组儿童发育迟缓儿童（LAZ 分数 < -2）和有发育迟缓风险的儿童（LAZ <-1 至 -2）组成。 一组营养不良的成年人（BMI <18.5）也将从儿童的父母中招募，并通过来自达卡市米尔布尔地区的横断面调查。

样本量：

将以横断面的方式收集和招募参与者。 根据具有 10% 精度和 95% 置信区间的样本量计算，将招募至少 35 名发育迟缓儿童、35 名有发育迟缓风险的儿童和 35 名成人。 因此，内窥镜检查的最终样本量为 105 名受试者 (35+35+35)。 由于内窥镜检查是一种侵入性手术，因此假设在营养干预后没有反应的人中只有三分之一会同意进行内窥镜检查。 因此，对于至少 105（35 x 3）名发育迟缓儿童（LAZ <-2）、105（35 x 3）名有发育迟缓风险的儿童（LAZ <-1 至 2）和 105（ 35 X 3) 无法茁壮成长的营养不良成年人 (BMI < 18.5)。 为了实现这一目标，将招募 525 名发育迟缓儿童、525 名有发育迟缓风险的儿童和 525 名营养不良的成年人进行营养干预，因为假设尽管进行了营养干预，每组中约有 20% 的人将无法做出反应。 根据目前两个年龄组的营养不良患病率，该招募调查至少需要调查 3977（1312+2665）名 12-18 个月大的儿童和 2100 名成人。 对于成人对照组，将从达卡医学院和国际腹泻病研究中心、孟加拉国员工诊所以方便抽样的方式招募相同数量（35 名）的成人对照组

场地说明：

这项研究将在米尔布尔的居民中进行，米尔布尔是该国首都达卡的 21 个行政单位之一。

招募、筛选和同意 如果参与者有兴趣自愿参与研究，指定的工作人员将进行筛选和同意。 筛选将包括对上面列出的纳入和排除标准的审查。 如果受试者有资格参加，该过程将继续进行，包括以适合儿童父母/参与者识字水平的方式彻底审查书面同意书。 在签署同意书之前，他们将有机会询问有关研究的任何问题。 如果实地研究助理 (FRA) 确定参与者已证明对研究有足够的理解，则同意书将由 FRA 和孩子的父母/成人参与者签署。 如果父母/成年参与者的文化程度不足以阅读和/或签署同意书，则将在与研究无关的证人在场的情况下获得同意书和拇指印象。 孩子的父母/成人参与者将获得一份已签署的同意书副本。

直接观察营养疗法的详细过程：

入组后，参与者将接受每日直接观察的营养治疗。 营养疗法包括鸡蛋和牛奶，将由研究免费提供。 发育迟缓儿童、发育迟缓风险儿童和营养不良成人的营养干预持续时间分别为 3、2 和 2 个月，营养治疗将在上午 10:00 至 11:00 之间的任何时间在早上和中午之间进行：早上 30 点。 参与者将被要求每天到指定的营养中心（将设立在米尔普尔）进行营养治疗，以避免食物共享的问题。 如果参加者不来营养中心，工作人员将登门拜访。 除了以食物为基础的营养疗法外，参与者还将获得以下营养和健康支持：

• 根据国家指南进行抗蠕虫治疗（阿苯达唑/双羟萘酸吡喃酯）
• 父母/照顾者将获得营养咨询
• 对于儿童队列，父母将在两个月内每天服用一袋多种微量营养素喷剂。
• 研究团队发现的任何并发疾病也将得到照顾。

基于食物的营养疗法：用一个鸡蛋和 150 毫升全脂牛奶补充通常的家庭饮食，这将为登记受试者的日常饮食提供额外的 178 千克卡路里、11.1 克蛋白质和 11.5 克脂肪。 将提供小袋多种微量营养素粉，供在家中晚餐时使用。

为了阐明以食物为基础的营养治疗的作用，将有 40 名发育迟缓儿童和 40 名有发育迟缓风险的儿童作为比较亚组，他们将分别接受为期 3 个月和 2 个月的随访，没有接受任何营养治疗。 在3个月和2个月的观察期结束时，将对这些儿童进行与入组参与者相同的营养治疗。

中止研究：如果一个孩子表现出连续 7 天不愿意进食（包括每天摄入 50% 或更少将提供的食物量），他/她将被中止研究并转介进行医学评估。 将招募一名新的符合条件的儿童担任营养干预的职务。

生物样本采集：

所有生物样本（血液、尿液、粪便、十二指肠抽吸物和内窥镜活检）将按照为本协议准备的标准手术程序（SOP）收集。 在营养干预前后，将从每位参与者身上采集总量为 5 毫升的血液。 将收集尿液用于乳果糖-鼠李糖测定和代谢组学研究；将收集呼吸样本用于测试小肠细菌过度生长 (SIBO)。 第二次 SIBO 将在内窥镜检查前 1-2 周进行，以便将内窥镜检查的结果与呼气测试进行比较。 将收集粪便样本用于生物标志物、Taqman 阵列卡 (TAC) 测定和用于年龄 Z 评分 (MAZ)/Bug 荧光激活细胞分选的微生物组/微生物群。

生物标志物检测的详细流程

将要测试的生物标记是——

粪便生物标志物

• 再生基因1Beta
• 新蝶呤
• 髓过氧化物酶
• α-1-抗胰蛋白酶
• 钙卫蛋白
• 用于肠病原体的 TaqMan Array Card
• 肠道微生物组分析
• Bug 荧光激活细胞分选。

尿液生物标志物

• 乳果糖-鼠李糖试验

血液生物标志物

• C-反应蛋白
• α-1-酸性糖蛋白
• 可溶性分化簇 14
• 犬尿氨酸-色氨酸比率
• 胰高血糖素样肽-2
• 胰岛素样生长因子-2
• 组织转谷氨酰胺酶
• 铁蛋白
• 锌
• 胃蛋白酶原 I/II 比率
• 低密度脂蛋白相关受体 1 (LRP1)
• 血浆代谢组学

其他提议的生物标志物

• 小肠细菌过度生长

营养治疗完成后，所有登记的参与者都将接受反应评估，其中包括：

• 人体测量
• 收集一份 5 ml 血液样本用于肠道功能的血清生物标志物和用于内窥镜检查的活检筛查测试（如果该程序指示无法茁壮成长）
• 收集粪便标本作为肠道功能的生物标志物
• 施用乳果糖-鼠李糖溶液并收集长达 2 小时的尿液以获取肠道功能的尿液生物标志物

此时，将评估内窥镜活检的最终纳入标准，以确定参与者是否营养治疗失败或反应充分，或是否患有导致营养不良的潜在疾病。 本研究中营养治疗失败或没有反应，定义为没有任何其他基础疾病，如肺结核：

• 发育迟缓儿童队列的 LAZ 分数仍然 < -2
• “有发育迟缓风险”的儿童队列的 LAZ 分数仍然 < -1
• BMI < 18.5 且成人 BMI 增加 < 10%。

将检查符合“未能响应”研究定义的参与者是否存在任何继发性营养不良原因，如结核病、癌症、任何寄生虫感染等。用于寄生虫鉴定的粪便显微镜检查将尽快在 icddr,b 寄生虫学实验室进行收集粪便样本后可能。 如果找不到任何结论，可能会要求参与者进行上消化道内窥镜检查和活组织检查的准备，因为他们可能会从进一步评估中获益，以确定干预失败的潜在原因并确定适当的治疗过程。 它还将通过验证环境肠道功能障碍的非侵入性生物标志物特征使其他人受益。 将接受内窥镜检查的参与者将根据诊断接受必要的治疗。

患有乳糜泻和凝血障碍（通过凝血酶原时间/国际标准化比率凝血障碍测试）的参与者将被排除在研究之外。 上消化道内窥镜检查将按照北美儿科胃肠病学、肝脏病学和营养学会（NASPGHAN0、美国胃肠病学会 (ACG) 和美国胃肠内窥镜学会 (ASGE)）推荐的标准进行。